HPLC-MS法测定Beagle犬血浆中槐果碱的浓度及其药代动力学研究

应用本研究组已经建立的LC-MS方法,采用双周期自身交叉设计研究Beagle犬灌胃、静注给予槐果碱后的药代动力学,结果显示两种给药方式下槐果碱的药时曲线均符合二房室模型,消除半衰期基本一致,分别为（2.75±0.17）h和（2.28±0.10）h;研究还表明,该药吸收快、体内分布快,Beagle犬灌胃的绝对生物利用度为45.28％.     

1例幼儿纵隔畸胎瘤术后肺部感染的护理体会

纵隔畸胎瘤来源于内胚层组织，多位于前纵隔，其囊肿中含有结缔组织、表皮、皮脂、毛皮，骨等组织，我科于2002年3月份收治了一例儿童纵隔畸胎瘤，此病术后肺部感染的控制与护理是否得当有很大关系。现将观察体会总结如下。     

穿心莲注射液的生产工艺和指纹图谱

采用中药指纹图谱技术，对10个厂家生产的穿心莲注射液进行研究，并确定了优化生产工艺，可用于穿心莲注射液的质量改进。     

先天性心脏病患者护理体会

临床资料我院在2002～2003年共收治46例先天性心脏病患者，男32例，女14例，年龄在2～27岁，体重在10～55kg，先天性房缺18例、室缺17例，法四4例，动脉导管末闭7例，46例患者均行手术治疗，其中导管末闭者行全麻结扎术，其余均在全麻体外循环下行修补术或矫治术。     

柴胡皂苷d的体内外肠道吸收机制研究

为揭示柴胡皂苷d（SSd）的体内外肠道吸收机制,采用Caco-2单层和大鼠在体单向肠灌流模型,研究了不同实验条件（时间、浓度、温度、pH、肠段）、转运蛋白抑制剂、细胞旁途径增强剂、代谢酶抑制剂等因素对SSd体内外肠道吸收的影响。研究结果表明,SSd的表观渗透系数（P_app）和有效渗透系数（P_eff）分别为4.75 × 10^-7 ~ 6.38 × 10^-7 cm/s和0.19 × 10^-4 ~ 0.27 × 10^-4 cm/s,提示其属于低渗透性化合物,SSd的跨膜转运具有浓度（0.5 ~ 5 μmol/L）和时间（0 ~ 180 min）依赖性,回肠是其主要吸收部位;P-糖蛋白抑制剂和细胞旁途径增强剂均显著增强SSd的体内外吸收（P < 0.05）;有机阴离子转运多肽（OATPs）抑制剂和有机阳离子转运蛋白（OCTs）抑制剂对SSd肠道吸收影响的体内外相关性较差,这可能与上述转运蛋白在空肠中表达量较低有关。本研究结果表明,SSd的肠道吸收涉及被动扩散、主动转运以及细胞旁通路途径等方式,P-糖蛋白在SSd的主动转运中发挥重要作用。     

苯甲酸阿格列汀中未知杂质的分离与鉴定

通过硅胶柱色谱法、溶剂提取法及制备液相色谱法等分离分析方法,从苯甲酸阿格列汀的大生产制备过程中分离得到4个新的有关物质,并根据其理化性质采用核磁共振光谱法、高分辨质谱法、傅里叶变换红外光谱法等多种波谱鉴定方法对其进行分析确证。确定了从苯甲酸阿格列汀的合成过程各步骤中所产生的4个有关物质的化学结构,将它们命名为杂质L、M、T、V,这4个杂质均为首次发现的新杂质。本研究对于苯甲酸阿格列汀生产过程中的质量控制和生产工艺的优化具有重要意义。     

LC-MS/MS法研究大承气汤与其君药大黄物质基础间的相关性

目的:从物质基础角度研究大承气汤与其君药大黄间的相关性。方法:采用高效液相色谱/串联质谱联用技术(LC-MS/MS)分析中药经典方剂大承气汤及其君药大黄水提液,研究两者化学成分间的相关性并对主要成分进行结构鉴定和推测。采用Zorbax SB C18色谱柱,0.2%甲酸-甲醇-乙腈三元梯度洗脱,ESI离子源,负离子模式下采集数据。结果:从大承气汤中共发现75个成分源于其君药大黄,经与标准品比对可确定其中9个;利用提取离子流技术(EIC)并结合质谱裂解规律可初步推测其中22个成分的结构。结论:大黄单煎剂中的主要成分在大承气汤中均有所体现;LC-MS/MS技术为中药方剂物质基础溯源、鉴定,方剂与单味药间的相关性研究提供了一种快速准确的方法。     

穿心莲药材的色谱指纹图谱

目的：建立穿心莲药材的HPLC／UV色谱指纹图谱，并对不同产地的药材进行比较。方法：应用Shimadzu VP-ODS柱，0.1％甲酸乙腈与0.2％甲酸进行梯度洗脱，流速为1.0ml／min，检测波长254nm，柱温为室温。结果：得到分离度、重现性均较好的穿心莲药材HPLC／UV指纹图谱，标示了9个共有峰。应用HPLC／MS技术对其7个主要色谱峰进行了初步归属，并对不同产地药材的色谱指纹图谱进行了相似度评价。结论：穿心莲药材指纹图谱的建立，为其质量控制提供了依据。     

非酒精性脂肪性肝病细胞模型中胆固醇代谢紊乱机制

肝脏胆固醇代谢紊乱在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的发生发展中具有重要作用。为揭示饱和脂肪酸诱导肝细胞胆固醇稳态失衡的分子机制,采用棕榈酸诱导HepG2细胞,通过油红O染色、试剂盒测定细胞内甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）含量评估脂质累积;采用RT-qPCR和Western blot检测与胆固醇稳态相关基因和蛋白表达水平;LC-MS/MS检测细胞胆汁酸和线粒体氧甾醇水平。结果发现,棕榈酸处理后,细胞内脂滴明显累积且TG与TC含量显著升高（P <0.000 1）;胆固醇合成和摄取相关基因表达无明显变化,但ABCG5和LXRα蛋白表达显著下调,表明胆固醇外排减少;负责胆汁酸替代合成的限速酶STARD1和CYP7B1基因表达显著增强,线粒体中胆固醇、27-羟基胆固醇（27-OHC）以及细胞中鹅去氧胆酸（CDCA）水平明显升高。本研究结果表明,棕榈酸刺激后可能通过抑制胆固醇外排和促进胆汁酸合成扰乱胆固醇稳态。