葛根素对实验性大鼠牙周炎炎症反应和骨吸收的影响

目的：研究葛根素对实验性牙周炎大鼠的炎症和牙槽骨吸收的影响。方法：选用7周龄SpragueDawley大鼠36只，随机分为3组（n=12）。一组作为对照组，余下大鼠全麻下行左侧上颌第一磨牙牙颈部正畸结扎丝结扎，建立慢性牙周炎模型。3组大鼠采用灌胃给药14 d：对照组和牙周炎组给予等量生理盐水，葛根素组给予400 mg/kg浓度葛根素给药。最后一次给药24 h后麻醉大鼠，腹主动脉取血，离心取血清用于外周血中IL-4、IL-10、IL-6、IFN-γ含量的检测；再处死所有大鼠，部分大鼠分离左侧上颌骨，去除左上颌第一磨牙颊腭侧实验处新鲜牙龈组织，余下上颌骨组织用于Micro-CT的检测；部分大鼠左侧上颌骨标本取材后保留牙龈组织，制作切片用于HE染色检测。结果：HE染色显示，与牙周炎组相比，葛根素组炎性细胞浸润明显减少。ELISA分析显示，葛根素促进血清中IL-4和IL-10表达，降低IL-6和IFN-γ表达水平（P均<0.05）。Micro-CT显示与牙周炎组相比，葛根素显著减少牙槽骨吸收（P<0.05）。结论：葛根素给药可以抑制实验性大鼠牙周炎的炎症和牙槽骨吸收。     

葛根素通过Notch1信号通路抑制Raw264.7细胞向破骨细胞的分化

背景：前期研究表明葛根素干预后破骨细胞的分化被抑制,Notch1、HES1、Jagged1等Notch信号通路相关蛋白表达量下降,但Notch1信号通路对于葛根素抑制破骨细胞分化的作用机制尚不明确。目的：探究Notch信号通路对葛根素抑制小鼠巨噬细胞Raw264.7分化为破骨细胞的影响。方法：将Raw264.7细胞分为7组干预培养,空白对照组采用DMEM高糖完全培养基培养,破骨细胞诱导组采用破骨诱导培养基培养,葛根素干预组在破骨诱导的同时加入50μmol/L葛根素培养,葛根素+Notch1 si RNA对照组、葛根素+Notch1 si RNA组、葛根素+Notch1过表达对照组、葛根素+Notch1过表达组分别采用Notch1 si RNA对照序列、Notch1 si RNA序列、Notch1过表达对照质粒、Notch1过表达质粒转染Raw264.7细胞后,加入破骨诱导培养基和葛根素进行培养。培养7 d后,采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的数量和大小,F-actin染色观察破骨细胞骨架形成情况,RT-PCR检测破骨细胞形成标志物的基因表达水平。结果与结论：(1)抗酒石酸酸性磷酸...     

葛根素对牙周炎大鼠Th17/Treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响

目的 探究葛根素对牙周炎大鼠辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)/调节性T细胞（Regulatory T cell, Treg）免疫平衡及相关转录因子的影响。方法 采用分离牙龈、丝线结扎配合龈下注射大肠杆菌内毒素（ELPS）法建立大鼠牙周炎模型。将大鼠随机分为正常对照组（A组）、牙周炎模型组（B组）、200 mg/（kg·d）葛根素组（C组）。HE染色观察牙周组织病理形态学变化。通过Micro-CT对骨生物学参数定量分析牙槽骨吸收情况。流式细胞术、免疫印迹法（western blot,WB）分别检测牙周组织中Th17、Treg细胞比例、白介素-17(IL-17)、视黄酸相关孤儿受体（RORγt）、IL-10、叉头状转录因子-3(Foxp3)蛋白表达。结果 HE染色中葛根素组大鼠牙根部可见明显新生骨细胞增生,牙周膜可见少量炎症细胞聚集,牙槽骨结构较整齐。Micro-CT显示治疗组大鼠牙槽骨较模型组骨量略有下降,骨质量及强度有所上升。流式细胞术检测全血细胞发现葛根素组的TH17、Treg细胞比例均下降,且TH17/Treg的细胞比例也下降。IL-10、Foxp3在...     

葛根素对RAW264.7细胞破骨分化的影响

背景：葛根素是葛根中含有的一种黄酮类衍生物,其可以预防骨质疏松、促进新骨生成,有望成为治疗骨质破坏相关疾病的潜在药物。目的：观察葛根素对RAW264.7细胞破骨分化能力的影响,探究Notch信号通路在其中的调控作用。方法：将RAW264.7细胞分5组干预培养：对照组加入DMEM高糖培养基;破骨诱导组加入破骨诱导培养基(含巨噬细胞集落刺激因子与核因子κB受体活化因子配体的DMEM高糖培养基);低、中、高浓度葛根素组分别加入含10,25,50μmol/L葛根素的骨诱导培养基。培养7 d后,采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色及F-actin染色评估破骨细胞形成情况,RT-PCR检测破骨细胞形成相关基因的表达,Western blot及RT-PCR检测Notch信号通路相关指标表达。结果与结论：(1)抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示,与对照组比较,破骨诱导组破骨细胞形成能力升高(P <0.01);与破骨诱导组比较,低、中、高剂量葛根素组破骨细胞形成能力降低(P <0.05,P <0.01),且呈浓度依赖性;(2)F-actin染色显示,与对照组比较,破骨诱导组出现边界清晰的F-actin环...