苗药四大血对佐剂性关节炎大鼠抗炎作用研究

目的研究苗药"四大血"对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用,并探讨其作用机制。方法 60只大鼠随机分成空白组、模型对照组、"四大血"高、中、低剂量组和阳性对照组,每组10只。除空白组外,其余各组采用足趾部皮下注射弗氏完全佐剂,建立佐剂性关节炎大鼠(AA)动物模型。观察各组大鼠右足跖外观变化、肿胀程度、滑膜组织病理特征;Elisa法检测大鼠膝关节滑膜组织炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果给药后,"四大血"中、高剂量组及阳性对照组足跖肿胀程度明显小于模型对照组(P0.05);病理切片显示,"四大血"中、高剂量组较模型对照组大鼠滑膜组织充血减轻,炎性细胞浸润减少。酶联免疫吸附试验(Elisa)检测显示与模型对照组比较,"四大血"能下调IL-1β和TNF-α的表达量(P0.05,P0.01)。结论 "四大血"有抑制AA大鼠滑膜组织炎症的作用,减少滑膜组织炎性细胞浸润及滑膜上皮细胞增生,其作用机制可能与下调炎症介质IL-1β、TNF-α的表达有关。     

多氯联苯对小鼠雌激素受体mRNA表达的影响

目的 观察不同剂量多氯联苯(PCBs)(Aroclor1254)对小鼠体内雌激素受体α、β(ERα、β)mRNA表达的影响.方法 分别用20、100、500 μg·kg-1·d-13种不同浓度的PCBs对小鼠进行腹腔注射,连续注射30 d后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠子宫中ERα、β mRNA的表达情况.结果 PCBs对小鼠ERα、β mRNA的表达均有抑制作用,且呈剂量依赖性.结论 ER基因表达的改变可能是PCBs实现内分泌干扰作用的机制之一.     

浅谈蛋白免疫印迹技术方法的改进

目的:探索蛋白免疫印迹技术关键步骤的改良方法.方法:以小鼠为研究对象,采用改良的蛋白免疫技术分析小鼠肝脏CYP1A1的表达水平.结果:不仅缩短实验时间,而且获得的目标条带清晰,非特异性的本底显色浅.结论:改良的蛋白免疫印迹技术一定程度上能够很好的分离目标蛋白,降低本底,获得比较满意的实验结果,有利于对蛋白质的进一步分析研究.     

苗药四大血对大鼠佐剂性关节炎作用的研究

目的： 探讨苗医验方四大血对大鼠佐剂性关节炎的作用及其机制。 方法： 建立类风湿性关节炎动物模型-佐剂性关节炎大鼠（adjuvant arthritis,AA）,设立空白组、模型对照组、四大血高、中、低剂量组（按生药计分别是40,20,10 g·kg^-1）、阳性对照组（雷公藤多苷片）。测量各组大鼠右后足跖肿胀度;大鼠滑膜细胞原代培养,取3代的传代培养细胞做实验。蛋白免疫印迹法（Western-blotting）检测各组大鼠滑膜细胞B细胞淋巴瘤/白血病2（Bcl-2）、Bcl-2相关x蛋白（Bax）蛋白质表达水平。 结果： 四大血有效抑制AA大鼠右足跖肿胀（P < 0.05）,且下调Bcl-2表达（P < 0.05,P < 0.01）、上调Bax表达（P < 0.01）,降低Bcl-2/Bax表达比值。 结论： 四大血拮抗AA病情发展,其作用机制可能与促进滑膜细胞凋亡,抑制滑膜细胞过度增生密切相关。     

慢病毒介导的重组人α1-抗胰蛋白酶在小鼠体内的表达

目的:构建重组人α1-抗胰蛋白酶(hAAT)因子的慢病毒表达载体,并通过体外细胞水平和小鼠体内分析其表达情况.方法:通过RT-PCR的方法扩增出hAAT基因的编码序列,并构建重组慢病毒质粒;经体外包装后,感染鼠成纤维细胞及注射小鼠.荧光显微镜下观察GFP的表达情况,同时对收获的细胞及感染小鼠的肝脏或血浆进行Western blot、ELISA检测.结果:获得重组hAAT因子的慢病毒表达质粒pLVX-ser;包装后得到8×106TU/mL滴度的慢病毒颗粒.通过荧光显微镜下观察,显示重组hAAT因子在成纤维细胞中正常表达;对小鼠尾静脉注射病毒之后,进行hAAT因子检测,Western blot结果说明hAAT因子在小鼠体内成功表达;通过ELISA检测发现hAAT在小鼠体内的表达平均达190g/L左右,而且在慢病毒的介导下hAAT在小鼠中的表达可持续3mo以上.结论:重组慢病毒载体可高效、持续表达hAAT因子,为通过基因工程生产重组hAAT因子以及为α1-AT缺乏症的基因治疗奠定基础.     

多氯联苯对小鼠肝微粒体CYP1A1酶活力及其mRNA表达的影响

多氯联苯是一种含氯有机化合物，因为具有良好的物理化学稳定性，自发明并实现工业生产以来被广泛用于各生产领域。但由于其极高的亲脂性和高生物富集性，多氯联苯对生物体诸如免疫功能、激素代谢和生殖遗传等各个方面有重要影响。细胞色素CYP450是机体中混合功能氧化酶系中最重要的一族氧化酶，主要分布在肝脏，参与了包括药物、