骨化三醇对晚期糖基终末产物诱导的NRK52E细胞EMT的影响

目的 探讨骨化三醇对晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导的肾小管上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用及可能机制.方法 先单独用骨化三醇刺激细胞,再采用AGEs处理NRK52E细胞,建立由AGEs诱导的细胞EMT模型.分为4组:对照组、模型组、低剂量骨化三醇(10nmol/L)预处理的模型组、高剂量骨化三醇(100nmol/L)预处理的模型组.利用Western blot、逆转录实时定量PCR等方法检测E-cadherin、α-SMA、AGEs特异性受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)及NF-κB的磷酸化等的表达.结果 骨化三醇单独刺激时,大鼠肾小管上皮细胞上的E-cadherin和α-SMA的表达未发生明显变化;较对照组,AGEs培养后,NRK52E细胞E-cadherin表达显著下调,α-SMA表达明显上调,AGEs特异性受体显著表达增多,NF-κB途径活化;以上变化都能够被骨化三醇所逆转(P＜0.05),抗RAGE中和抗体(AF1616)可抑制AGEs引起的E-cadherin下调和α-SMA上调,骨化三醇抑制AGEs诱导RAGE的上调能够被NF-κB磷酸化抑制剂(IMD0354)部分阻断.结论 骨化三醇通过降低RAGE的表达和阻断NF-κB的磷酸化来抑制肾小管上皮细胞上皮间质转化.     

Sirt4在心肌细胞中增强血管紧张素Ⅱ对GATA结合蛋白4的激活作用

目的 探索Sirt4在大鼠原代心肌细胞中对GATA结合蛋白4(GATA-binding protein 4,GATA4)活性的影响.方法 构建过表达Sirt4(Ad-Sirt4)以及干扰Sirt4表达(Ad-shSirt4)的腺病毒并且在体外培养大鼠原代心肌细胞,将构建好的腺病毒及其相应的对照腺病毒(Ad-GFP/Ad-U6)分别感染大鼠原代心肌细胞,感染24 h后用PBS或1μmol/L血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)处理细胞48 h.采用Western blot及Real-time PCR检测GATA4的表达,通过免疫荧光及细胞核分离法检测GATA4的核转运,利用双荧光素酶报告基因法检测GATA4下游分子心房利钠肽(atrial natriureticpeptide,ANP)、脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)的启动子活性.结果 Sirt4在大鼠原代心肌细胞中不会影响GATA4的蛋白及mRNA水平(P＞0.05).与对照组比较,Sirt4过表达显著增加AngⅡ诱导的GATA4磷酸化,而干扰Sirt4表达降低GATA4的磷酸化水平.在大鼠原代心肌细胞中下调Sirt4表达可以明显抑制AngⅡ引起的GATA4入核;Sirt4过表达显著增加GATA4下游分子ANP、BNP的启动子活性(P＜0.01).结论 Sift4可以在大鼠原代心肌细胞中促进AngⅡ对GATA4的激活效应.     

“特殊”的肢体导联错接心电图1例

<正>患者，男，72岁。因“咳嗽纳差7天”于2023年3月15日第5次入住我院，入院诊断为：(1)继发性肺结核双肺涂（阳）培（阳）分子生物学（阳）复治；(2)支气管结核右侧吸取物涂（阳）培（阳）分子生物学（阳）复治；(3)喉结核；(4)慢性胃炎；(5)肾结石；(6)前列腺增生并结石。入院当日，病房护士完成床旁心电图的采集，由心电网络传至我科的心电图分析端，阅图（图1）发现Ⅰ导联成一条直线，