人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养及鉴定

本研究拟建立人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养方法。采用连续分次胶原酶消化法分离培养人嗜铬细胞瘤细胞，采用细胞培养液中儿茶酚胺水平检测、多聚甲醛诱发荧光及细胞嗜铬粒蛋白A(CgA)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫组化染色等方法进行细胞性质和功能鉴定，并用噻唑兰(MTT)法观察原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞的生长状况。结果表明，人嗜铬细胞瘤细胞在培养3～7天时生长较快，7天后细胞开始分化。经检测细胞培养液中的儿茶酚胺浓度、多聚甲醛诱发荧光等，证明该细胞有合成和分泌儿茶酚胺的功能。并且培养的细胞CgA和NSE免疫组化染色阳性。因此，本研究成功建立了人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养方法，并鉴定其具有嗜铬细胞瘤的分泌和表达功能，国内尚未见报告。     

阴囊Paget病(附6例报告)

阴囊Paget病又称阴囊湿疹样癌或炎性癌,是一种少见的乳腺外Paget病(EMPD),同时也是一种少见的阴囊恶性肿瘤,1983～1999年我院共收治6例,现报告如下。 临床资料 本组6例,年龄49～74岁,平均61.5岁,病程1～15年,平均6年。初诊均表现为阴囊皮损。皮损表现为湿疹样改变,局部皮肤红斑、隆起、糜烂、破溃,可有脱屑,表面有渗液结痂,伴或不伴瘙痒、疼痛,皮损可渐增大,累及阴茎根部、大腿内侧、腹股沟区域,甚至累及耻骨上皮肤,皮损界限多较清楚。6例中右阴囊病变2例,双侧阴囊病变1例,右阴囊及右腹股沟病变1例,左阴囊及双腹股沟病变1例,左阴囊及右腋窝病变1例;病变皮损面积平均5cm×4cm左右。误诊时间1～12年,平均5.5年。6例中1例有右腹股沟淋巴结肿大,活检证实为转移。除1例因有肺、脑、骨、骨髓等多处转移仅行阴囊及右腹股沟淋巴结病灶活检外,其余5例均行距病灶2cm外单纯病灶切除术,深达皮下或睾丸鞘膜。6例中1例因多发转移,全身衰竭,于活检后1个月死亡,4例得到随访,随访时间1个月～9.8年,平均5.8年,1例术后8.5年于原手术对侧阴囊复发,1例术后5年于原手术部位复发,此2例均再次行病灶切除术,二次术后已分别达2年1例,1年1例,另2例术后已3.9年1例,1例术后1个月。     

经尿道1.9μm激光切除术与经尿道电切术治疗浅表性膀胱癌的疗效及安全性比较

目的 比较经尿道1.9 μm激光切除术与经尿道电切术治疗浅表性膀胱癌的疗效与安全性.方法 对北京协和医院泌尿外科2013年1月-2015年12月收治的53例浅表性膀胱癌患者,分别采用经尿道1.9 μm激光切除术(n=25)和经尿道电切术(n=28)治疗.比较两组手术时间、术中出血量、术后留置尿管时间、术后住院时间以及并发症发病率和肿瘤复发情况.结果 1.9 μm激光切除术组患者术中出血量为[(21.6±4.6) min]、术后留置尿管时间为[(22.4±6.4)h]、术后住院时间为[(2.2 ±0.7)d]、术后并发症发病率(12％)及术后复发率(16％)均低于经尿道电切术组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 经尿道1.9 μm激光切除术治疗浅表性膀胱癌具有安全、有效、并发症少、复发率低等特点,值得临床推广.     

不同浓度右美托咪定对脓毒症大鼠炎性因子、OCT和STAT3的影响及肝损伤保护机制

目的分析不同浓度的右美托咪定对脓毒症大鼠鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)、炎性因子和信号转导与转录因子3(STAT3)的影响及肝损伤保护机制。方法取50只雄性SD大鼠,随机分为假手术组(仅打开腹腔翻动盲肠)、模型组(经盲肠结扎穿孔术建立脓毒症大鼠模型)、低浓度组(脓毒症+右美托咪定2.50μg·kg-1·h-1)、中浓度组(脓毒症+右美托咪定5.00μg·kg-1·h-1)、高浓度组(脓毒症+右美托咪定10.00μg·kg-1·h-1),每组各10只。于造模后12 h,通过酶联免疫吸附试验法测定大鼠肝脏组织中炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和OCT的水平;用免疫印迹法测定肝脏组织中STAT3蛋白表达水平;经苏木精-伊红染色观察各组大鼠肝脏组织病理形态学改变。结果相比假手术组,模型组、低浓度组、中浓度组和高浓度组大鼠肝组织均出现不同程度的病理学损伤。模型组、低浓度组、中浓度组和高浓度组大鼠肝脏组织中OCT、IL-6、IL-10及STAT3的水平均显著高于假手术组(P<0.05);相比模型组,低浓度组、中浓度组和高浓度组OCT、IL-6、IL-10及STAT3的水平均显著降低(P<0.05);在低浓度组、中浓度组和高浓度组中高浓度组OCT、IL-6、IL-10及STAT3的水平最低,其次为中浓度组、低浓度组(P<0.05)。结论右美托咪定具有保护脓毒症大鼠肝损伤的作用,并具有剂量依赖性的特点,其作用机制可能与STAT3蛋白表达下调而参与右美托咪定保护脓毒症大鼠肝损伤的过程密切相关。     

应用磁珠联合MALDI-TOF MS技术建立前列腺癌血清差异蛋白诊断模型

  目的  应用蛋白组学技术对前列腺癌血清差异蛋白进行筛选, 并建立前列腺癌诊断模型。  方法  2010年3月至5月间于北京协和医院泌尿外科病房采集12例前列腺癌患者及11例非前列腺癌对照者血清样本, 应用弱阳离子磁珠联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术对前列腺癌患者和对照者血清进行差异蛋白研究, 筛选出多个前列腺癌血清差异蛋白, 并应用ClinProTools 2.2软件通过遗传算法建立诊断模型。  结果  共筛选出前列腺癌与对照组之间差异蛋白峰126个, 具有较明显差异的蛋白峰24个(P=0.178)。通过遗传算法优化选择, 筛选出符合条件的15个差异蛋白峰建立诊断模型, 交叉验证准确性为81.82%, 识别能力为100%。  结论  应用磁珠联合MALDI-TOF MS技术及遗传算法成功建立前列腺癌血清差异蛋白的诊断模型, 该模型识别能力高, 有助于减少前列腺癌的漏诊率。     

肾细胞癌基础研究的新进展

肾癌是人类泌尿系肿瘤中占第三位的常见肿瘤。外科手术根治是最主要的治疗手段，一旦肾癌出现远处转移，其五年生存率不足20％。对肾癌的分子生物学的研究，可提供可靠的肾癌分类和新的诊断方法。通过使用反转录酶／聚合酶链式反应技术来探测MN/CAIX基因，可以发现血液循环中的肾肿瘤细胞。血液循环中的肿瘤细胞的特定基因改变的鉴别、von Hippel～Lindau体细胞突变的证实，高风险病人尿中的细胞外蛋白基质的查实对提高病人早期诊断和早期治疗都有很大帮助。传感信号和转录激活物被认为是肾癌根治术后复发的重要证据。体内和体外的研究都表明反义寡聚脱氧核苷酸有重要的治疗效果。干细胞移植治疗肾癌虽然副反应问题尚未解决，但已进行的临床试验表现出一定的疗效。最近蛋白酶体阻断剂在临床应用上的发展，表明它在转移性肾细胞癌的分子治疗上具有高度特异性和有效性。本文对肾癌基础研究方面的新进展进行综述。     

激光包皮环切术与常规包皮环切术的对比观察

近年来,随着激光仪器的发展,其临床应用的机会逐年增多。我科在1987年5月至1989年5月间采用激光包皮环切术与常规包皮环切术各60例进行对比观察表明,激光包皮环切术有不少优点。兹报告如下。一般资料本组年龄12～36岁,其中以19～24岁者最多,占78.3％。本组中包茎18例,龟头与包皮内膜粘连21例,龟头炎症有分泌物者28例。常规包皮环切术60例中,龟头与包皮内膜粘连者21例,包茎合并感染16例。激光包皮环切术的方法是在骶管麻醉下用2％新洁尔灭溶液消毒,用龙胆紫划记切离部位离冠状沟0.5cm,离系带处0.8cm)。包茎者可     

原发性色素性肾上腺结节增生四例诊治分析

目的 探讨原发性色素性肾上腺结节增生(PPNAD)的诊断与治疗方法.方法 回顾性分析2000--2007年收治的4例资料完整的PPNAD患者,包括临床表现、内分泌检查、手术方法及预后,结合文献复习,对此种疾病的诊断与治疗方法进行讨论.结果 1例行双侧肾上腺全切除,术后需皮质激素替代,3例肾上腺次全切除者库欣症状缓解,不需服用激素,其中1例术后2年出现甲状腺癌.结论 PPNAD是一类罕见的ACTH非依赖性库欣综合征,诊断依赖临床表现、内分泌检查及术后病理,症状明显者可采用肾上腺全切除,症状较轻者采用次全切除,术后要严密随访,注意有无其他内分泌器官病变.     

经尿道前列腺电汽化术治疗高龄患者良性前列腺增生症

目的评价经尿道前列腺电汽化术(TUVP)治疗高龄患者良性前列腺增生(BPH)症的疗效.方法对82例75～96岁高龄BPH患者施行TUVP,并于术后3、6、12个月进行随访.结果术后随访3、6、12个月,国际前列腺症状评分(IPSS)分别为10.2、6.4及5.2分;生活质量评分(QOL)为2.8、2.1及1.8分;最大尿流率(Qmax)12.7、16.6及18.2ml/s;残余尿量各项评估指标手术前后比较经统计学检验有显著性差异(P<0.01).结论 TUVP疗效确切、安全、易于掌握,是解除BPH引起的下尿路梗阻和提高高龄BPH患者生活质量的有效方法.     

TGF-a、TNF-a和VEGF对人嗜铬细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究转化生长因子a(TGF-a)、肿瘤坏死因子a(TNF-a)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法 用噻唑兰(MTT)法观察TGF-a、TNF-a和VEGF对原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖的作用；用PI染色流式细胞分析、Hochest33342染色的方法检测上述细胞因子对人嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响。结果 0．1～100ug／L的TGF-a、TNF-a和VEGF均促进入嗜铬细胞瘤细胞增殖。无血清培养72h，人嗜铬细胞瘤细胞的凋亡率为3．98％，100ug／L的TGF-a、TNF-a和VEGF对其凋亡无明显影响。结论 TGF-a、TNF-a和VEGF刺激原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖，但对其凋亡无明显影响。