输尿管部分梗阻后平滑肌细胞中游离Ca^2＋浓度改变

目的：测定大鼠单侧部分输尿管梗阻后输尿管平滑肌细胞中游离Ca^2＋浓度改变。方法：将Wistar雄性大鼠80只随机分为4组：8周PUUO组20只,16周PUUO组20只,同期对照组各20只。PUUO组采用将大鼠左侧上1＼2段输尿管包埋入腰大肌造成单侧输尿管部分梗阻的动物模型,对照组仪分离左侧输尿管。成模后分别于8周和16周分离取出输尿管．分离单个输尿管平滑肌细胞应用Fura-2／AM荧光探针负载检测输尿管平滑肌细胞中游离Ca^2＋的浓度。结果：输尿管平滑肌静态细胞内Ca^2＋荧光比值测定结果显示：8周的PUUO大鼠组与对照组大鼠之间细胞内游离Ca^2＋浓度的差异无统计学意义,而16周的PUUO大鼠组细胞内游离Ca^2＋的浓度显著升高,且差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：细胞内钙超载是输尿管梗阻后平滑肌功能损害病理过程的重要原因,但是发生较晚,可能在输尿管部分梗阻后期起着重要作用。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对体外及裸鼠体内前列腺癌细胞PC3生物学特性影响的研究

 目的　探讨血管内皮生长因子（VEGF）反义寡核苷酸对前列腺癌细胞PC3在体外和裸鼠体内生长特性的影响,以及局部注射反义寡核苷酸治疗裸鼠皮下移植肿瘤的疗效。方法　采用Oligofectamine携带VEGF反义寡核苷酸转染前列腺癌细胞PC3,实验分为反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组和对照组。软琼脂糖凝胶实验和细胞侵袭实验检测转染反义寡核苷酸的肿瘤细胞成瘤性和侵袭性。裸鼠成瘤实验观察VEGF反义寡核苷酸对体内PC3细胞增殖的影响。建立裸鼠前列腺癌种植瘤模型,局部注射VEGF反义核酸治疗,测定体内抑瘤率。结果　对照组、正义寡核苷酸组和反义寡核苷酸组的PC3细胞每组阳性克隆数分别为53.67±5.86、52.33±6.43和26±4.58（F＝13.73,P＜0.01）,反义组体外形成克隆数显著减少;三组细胞侵袭至下室的细胞数分别为45.60±5.53、42.35±6.21和18.37±3.52（F＝14.18,P＜0.01）;转染VEGF反义核酸的细胞移植瘤生长较慢,接种28 d后三组的肿瘤体积分别为（1330.32±81.38）、（1267.64±120.26）和（641.83±58.34）mm3（F＝17.26,P＜0.01）;局部注射治疗4周后,三组肿瘤质量分别为（1.25±0.08）g、（1.17±0.06）g和（0.41±0.05）g,与对照组比较,正义组和反义组肿瘤抑制率分别为6.4 %和67.2 %,差异有统计学意义（χ2＝17.72,P＜0.005）。结论　VEGF反义寡核苷酸可以抑制前列腺癌细胞PC3 VEGF的表达,进而促进细胞凋亡,降低其成瘤性,抑制侵袭能力。转染VEGF反义寡核苷酸的前列腺癌细胞PC3移植瘤在裸鼠体内生长受抑制,局部注射反义核酸可显著抑制移植瘤的生长。     

舒尼替尼对裸鼠肾癌个性化治疗的实验研究

目的明确血管内皮生长因子受体（VEGFR）及血小板衍生因子受体（PDGFR）在肾癌组织中表达情况,了解舒尼替尼的适用个体。方法建立裸鼠背部皮下人肾癌移植瘤模型,根据VEGFR-3、PDGFRa是否表达,分为VEGFR阳性组、PDGFR阳性组、双阳组、双阴组,各组内设给药组与对照组。分别于药后第5、20天及自然死亡后穿刺取活检测定瘤组织中VEGFR-3、PDGFRa表达强度的变化,记录生存时间。结果各给药组之间生存时间的差别有统计学意义（F=32．58,P〈0．001）,VEGFR-3、PDGFRa表达强度呈下降趋势。结论舒尼替尼可延长VEGFR-3、PDGFRa阳性表达荷瘤裸鼠的总生存期,对肾癌个性化治疗有一定的指导意义。     

血管内皮生长因子反义核酸提高前列腺癌PC3细胞对化疗药物敏感性的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义核酸对前列腺癌细胞PC3对常用化疗药物作用的影响,联合反义核酸和紫杉醇治疗裸鼠移植肿瘤。方法采用新型脂质体Oligofectamine携带VEGF反义核酸转染前列腺癌细胞PC3。定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western杂交的方法检测细胞VEGFmRNA和蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测转染反义核酸的细胞对化疗药物的敏感性,联合反义核酸和紫杉醇对裸鼠移植肿瘤进行治疗,观察肿瘤抑制率,计算药物相互作用指数(CDI)。结果新型脂质体携带VEGF反义核酸转染前列腺癌细胞PC3,与对照组和正义组比较,反义组细胞VEGFmRNA和蛋白的表达明显下降,对2种前列腺癌常用化疗药物紫杉醇和米托蒽醌的敏感性明显增强(P<0.05)。治疗裸鼠移植肿瘤28d后肿瘤生长抑制率分别为反义组58.5%,紫杉醇组60.2%,联合组84.1%,CDI=0.97。结论 VEGF反义寡核苷酸抑制VEGF的表达,提高细胞对化疗药物的敏感性,联合反义核酸和紫杉醇可以更有效地抑制肿瘤生长,并且2种药物具有协同作用。     

单侧输尿管部分梗阻后输尿管平滑肌细胞中M3受体改变的实验研究

目的测定大鼠单侧输尿管部分梗阻（PUUO）后输尿管平滑肌细胞中M3受体mRNA的转录水平和蛋白表达水平改变的规律,以探讨PUUO后输尿管平滑肌细胞中M3受体的作用。方法 Wistar雄性大鼠80只,随机分为4组：8周PUUO组、16周PUUO组、8周对照组及16周对照组,每组各20只。两PUUO组（n=40）采用把大鼠输尿管左侧上1/2段埋入腰大肌做成PUUO的大鼠模型,两对照组（n=40）只游离左侧输尿管。模型制作成功后于8周和16周时取出输尿管,分别用RT-PCR检测输尿管平滑肌M3受体mRNA的含量,Western-blotting检测输尿管平滑肌M3受体蛋白的含量。结果 RT-PCR结果示：M3受体mRNA的表达8周PUUO组高于8周对照组（55.16±3.94）vs（36.48±3.87）,16周PUUO组低于16周对照组（19.37±3.70）vs（37.39±3.65）,8周PUUO组高于16周PUUO组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。Western-blotting结果示：M3受体蛋白的表达8周PUUO组高于8周对照组（27.13±1.77）vs（21.36±2.69）,16周PUUO组低于16周对照组（19.41±1.37）vs（23.43±1.58）,差异均有统计学意义（均P〈0.05）,8周对照组与16周对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论梗阻8周时大鼠输尿管平滑肌中M3受体的生物合成上调,梗阻至16周时输尿管平滑肌中M3受体生物合成下调,为后续与临床相结合的研究做了更进一步的铺垫。     

同种肾组织移植改善慢性肾功能衰竭贫血：红细胞质量和数量验证

背景：既往通常采用的反复输血和重组人类促红细胞生成素纠正慢性肾功能衰竭后贫血，但由于多种副作用使其临床应用受到很大限制。 目的：通过动物实验，以现代医学公认的治疗慢性肾功能衰竭后贫血的药物重组人类促红细胞生成素作为阳性对照，从红细胞数量、质量方面验证同种肾组织移植的治疗效果。 设计、时间及地点：混合模型重复测量资料的方差分析，随机分组动物实验于2004-06/2005-03在山西医科大学生理实验室完成。 材料：选用成年健康雄性Wistar大白鼠80只作为受体，成年受体大鼠尾静脉每天一次注射盐酸阿霉素6.5 mg/kg，每周3次，共6周。然后切除右肾建立慢性肾功能衰竭模型。供肾组织移植用Wistar新生鼠20只,出生三四天，雌雄不拘。实验用主要试剂重组人类促红细胞生成素：2×106 U/L,由山东阿华医药公司提供（批号99435）。 方法：取20只大鼠为正常对照组，无特殊干预；其余60只大鼠制备慢性肾功能衰竭模型后，随机分为3组，每组20只：肾组织移植组，将取处新生鼠的肾组织块多点植入受体肾包膜下；促红细胞生成素治疗组，每次按30 U/kg剂量腹腔注射重组人促红细胞生成素，每周3次，连续6周；模型组，不给予其他干预。 主要观察指标：以SABC法检测促红细胞生成素在肾组织和移植物的表达及分布。取大鼠内眦静脉血，以ELISA法直接测定血清促红细胞生成素水平，常规方法测定血红蛋白水平，以相应的试剂盒测定红细胞膜Na+-K+ATP酶、超氧化物歧化酶活力，以及丙二醛水平。 结果：①促红细胞生成素抗原阳性反应在正常对照组内表达呈强阳性。而在模型组呈弱阳性或不表达，在移植组中呈强阳性，模型组与其他两组比较，差异有显著性意义（P < 0.01）。②实验30，45，60 d时促红细胞生成素治疗组、肾组织移植组血清促红细胞生成素水平和血红蛋白和红细胞计数比模型组显著升高(P < 0.05~0.01)，实验60 d时促红细胞生成素治疗组血清促红细胞生成素水平高于肾组织移植组(P < 0.05)。③实验30，45，60 d时促红细胞生成素治疗组、肾组织移植组红细胞膜丙二醛含量低于模型组 (P < 0.05), 促红细胞生成素治疗组与肾组织移植组比较，差异无显著性意义 (P > 0.05)。红细胞膜超氧化物歧化酶和Na+-K+ATP酶活力组间差异与丙二醛相反。 结论：肾组织移植可提高慢性肾功能衰竭贫血大鼠红细胞数量和质量，作用与重组人类促红细胞生成素基本相当。     

癌痛控制的影响因素分析与三阶梯治疗

目的 分析肿瘤患者癌痛控制的影响因素和三阶梯治疗的临床意义.方法 选择经病理学证实的癌痛患者300例,评估患者疼痛强度（PI）,总结癌痛控制的影响因素;根据疼痛强度给予不同阶梯的止痛药治疗,观察止痛效果.结果 影响癌痛控制的因素众多,其中包括医护方面的因素、患者方面的因素及其他药品管理因素.治疗后重度疼痛发生率显著低于治疗前（P〈0.05）.治疗后平均VAS得分显著低于治疗前（P〈0.05）.结论 治疗癌痛时综合分析各种影响患者疼痛控制的因素有重要的临床价值,三阶梯治疗癌痛的效果满意.     

V型肾静脉夹压致肾盂输尿管连接部梗阻:附一例报告

正肾盂输尿管连接部梗阻(ureteropelvic junction obstruction,UPJO)是引起儿童及青年人肾积水的常见原因。导致肾盂输尿管连接部梗阻的原因多种多样,其中肾盂输尿管管腔内狭窄、节段性无动力性功能失调、异位及纤维索条压迫、肾盂输尿管高位连接等是引起UPJO的常见原因[1]。近日,山西医科大学第一医院泌尿外科收治1例肾盂输尿管连接部梗阻患者,经术前影像学诊断及术中探查,考虑为V型异位肾静脉夹压致肾盂输尿管连接部梗阻,现报     

单侧部分输尿管梗阻后平滑肌中α_1-肾上腺素能受体改变的实验研究

<正>本研究小组在前期首先进行了对单侧输尿管部分梗阻(PUUO)实验大鼠输尿管中平滑肌形态及功能改变的实验研究,并从中观察发现了模型中病变输尿管肌条收缩力和收缩频率分别在不同梗阻时期的相应变化[1]。本实验则将继续采用前期的PUUO动物模型,通过对动物模型中不同梗阻时期     

血管内皮生长因子反义寡核苷核对前列腺癌细胞PC3生长特性的影响

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷核对前列腺癌细胞PC3生长特性的影响。方法采用新型脂质体Oligofectamine携带VEGF反义寡核苷酸转染激素非依赖性前列腺癌细胞PC3,实验分为对照组、反义寡核苷核苷酸组和正义寡核苷酸组。Western Blot杂交的方法检测细胞VEGF蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果新型脂质体可以携带VEGF反义寡核苷酸转染前列腺癌细胞PC3,与对照组和正义寡核苷酸组比较,反义寡核苷酸组细胞VEGF蛋白的表达明显下降,增殖受到明显抑制,凋亡率增加。结论新型脂质体Oligofectamine可以携带VEGF反义寡核苷酸成功转染前列腺癌细胞PC3,抑制VEGF的表达,进而抑制肿瘤细胞的增殖,促进其凋亡。