a-synuclein: 基因结构、进化与蛋白聚集

α-synuclein是synuclein家族的重要成员之一,主要在脑组织中大量表达,是帕金森病中特征性路易小体的主要组成部分。本文采用生物信息学等方法系统分析了不同物种synuclein家族蛋白的分子进化关系、基因结构特点以及不同形式α-synuclein对蛋白聚集的影响。结果表明：synuclein家族蛋白可聚为α, β和γ三类,直系同源基因α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein与由基因复制而产生的旁系同源α, β和γ-synuclein在进化上表现为较近的距离。人α-synuclein蛋白可分为3个区域：N端(1-60)的两性α螺旋区、中间NAC（61-95）较强的疏水性区域以及主要由酸性氨基酸组成的C端（96-140）区。α-synuclein存在3种突变体：A30P、E46K和A53T,突变位点位于α-synuclein基因的不同外显子上。α-synuclein外显子的异位拼接产生4种异构体,5个外显子都参与编码一个由140个氨基酸组成的蛋白,这是α-synuclein在体内存在的主要形式,同时外显子3和5存在选择性的剪接机制,分别编码形成126、112、98个氨基酸的剪接变体。本文同时还讨论了目前影响α-synuclein体外聚集的主要因素及主要的聚集抑制剂。本工作对于更好地了解α-synuclein的序列基础、深入探讨α-synuclein的生物学功能及帕金森病等神经退行性疾病的诊断和治疗具有重要的指导意义和价值。     

FoxM1的分子进化、结构与蛋白调控及与肿瘤的关系

0 引言Fox(fork head box)蛋白是一类从酵母到人类都广泛存在的转录因子,属于“螺旋-转角-螺旋”类蛋白的一个亚群.目前,根据DNA结合区的同源性,在不同种属中证实了100多个Fox家族成员,分属于17个亚族.Fox家族成员众多,生物学作用广泛,功能涉及胚胎发育、细胞周期调控、糖类和脂类代谢、生物衰老、免疫调节等多种生物学过程,其突变和表达异常与发育畸形、代谢性疾病以及肿瘤发生等密切相关.     

植物药复方MYD-20抗金黄色葡萄球菌的作用及机制研究

目的 研究植物药复方MYD-20及其软膏剂对金黄色葡萄球菌的抑制作用及初步作用机制。方法 采用肉汤稀释法测定复方MYD-20对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Methicillin-resistant S.aureus(MRSA)临床菌株的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC);通过测定药物处理后菌液的碱性磷酸酶(AKP)活性、胞外大分子浓度变化以及扫描电子显微镜的观察结果确定复方MYD-20的抑菌作用机制;建立小鼠烫伤感染模型,探究MYD-20软膏剂的药效作用。结果 MYD-20对金黄色葡萄球菌和MRSA表现出强抑菌活性,对金黄色葡萄球菌、MRSA的MIC和MBC均分别为1.0%、2.0%。经MYD-20处理后,菌液中AKP的活性、胞外大分子的含量均显著上升,结合扫描电子显微镜的观察结果,发现细菌的表面结构受到破坏。MYD-20软膏剂对皮肤深Ⅱ度烫伤感染的模型小鼠显示出显著的创口愈合作用;并降低了创口处炎症因子的表达。结论 复方MYD-20对金黄色葡萄球菌和MRSA具有较强的抗菌作用,其作用机制与破坏细菌细胞膜、细胞壁的通透性...     

反义 HSP70对人乳腺癌细胞的抑瘤效应

目的：观察反义热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70)RNA对人乳腺癌细胞学特性的影响,探讨其抗肿瘤作用。方法：将逆转录病毒真核表达载体介导的反义HSP70重组质粒pX-AHSP70和空载体pLXSN-neo转染至MCF7／Adr人乳腺癌细胞,通过细胞生长曲线和软琼脂集落实验以及裸鼠移植瘤实验观察转染反义HSP70重组质粒细胞的体内外抑瘤作用。结果：建立了稳定表达反义HSP70 RNA的MAp70细胞,与空载体细胞相比,HSP70蛋白的表达下降了48％。细胞群体生长速度明显减慢,软琼脂集落形成率和抑制率分别为6．08％和62．14％,裸鼠皮下接种的平均出瘤时间为15天,最终平均瘤重为108mg,以上参数与空载体细胞相比,均有显著差异。结论：反义HSP70RNA能够有效地抑制HSP70表达,进而抑制乳腺癌细胞的体外增殖和体内移植瘤的形成与发展。     

HBV启动子调控的GFP在肿瘤细胞中的表达

为进一步探讨针对晚期肺癌患者治疗的新方式 ,本文根据曾有动物实验研究报告 (即ＢＣＧ辅以ＩＬ 2吸入防治实验肺癌模型 ) ,通过采用超声雾化方式 ,在临床上试行将相关免疫制剂配合化疗药物以气溶胶微粒形式吸入肺组织用以治疗肺癌 ,先后对 10例患者进行共 16例次的治疗。初步观察该方法在控制肿瘤病灶发展、减轻病痛等方面临床意义 ,现报告如下。10例患者中 ,男 7例 ,女 3例 ;年龄 6 2～ 88岁。所有患者均以临床表现 ,影像学检查 ,部分经病理证实诊断为肺癌 ,其中 ,原发性肺癌 7例 (腺癌、鳞癌各 3例 ,1例无病理 ) ;转移性肺癌 3例。ＫＰＳ…     

黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其同属近缘物种的ITS2条形码鉴定与分析

运用ITS2 DNA条形码技术鉴定中药材黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其近缘物种,以保证药材质量,确保用药安全.文中对采自西藏拉萨的黄花紫堇、多刺绿绒蒿等13个药材样品进行了DNA提取、PCR扩增和测序;对实验序列和GenBank下载的71条切除两端的5.8S,28S区域,使用MEGA 5.0进行多重序列比对,并进行种内、种间遗传距离计算和进化树构建;同时预测了黄花紫堇、多刺绿绒蒿与其近缘种ITS2序列的二级结构.结果表明,作为DNA条形码,ITS2序列能够有效地对黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其同属近缘物种进行分子鉴定.该研究不仅可为黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其近缘物种、相关混伪品建立基于.ITS2序列的DNA条形码的规范和安全的检测技术及鉴别方法,也为其质量控制、安全用药及合理开发利用提供理论依据及数据支撑.     

人α-synuclein突变体的克隆及细菌表面展示

目的在细菌表面构建及展示人α-synuclein突变体A30P、E46K和A53T。方法采用叠套PCR介导的点突变方法,以野生型α-sy-nuclein为模板。结果成功克隆了α-synucleinA30P、E46K和A53T3个突变型基因,并利用细菌亲密素展示系统将野生型α-synuclein及突变体A30P、E46K和A53T成功展示在大肠杆菌表面。结论α-synuclein及其突变体的细菌表面展示对于α-synuclein空间结构的良好保持和基于α-synu-clein神经退行性疾病靶分子药物、分子诊断试剂的研发和α-synuclein蛋白结构与功能的研究等具有重要的意义和价值。     

抗金黄色葡萄球菌中药材的筛选及其复方MW1810抗菌机制的初探

目的 筛选抗金黄色葡萄球菌的中药材,并研究复方MW1810对金黄色葡萄球菌的抑制作用及机制.方法 采用倍比稀释法确定111种中药材和MW1810的最低抑菌浓度(MIC);通过测定药物处理后菌液的相对电导率、碱性磷酸酶(AKP)的变化和扫描电子显微镜(SEM)的观察结果确定MW1810的抑菌作用;qRT-PCR分析特异基...