毛樱桃总黄酮对LPS诱导大鼠滑膜细胞RSC-364炎症及自噬的影响

目的探索毛樱桃总黄酮(Prunus tomentosaThumb total flavones,PTTTF)对大鼠滑膜细胞RSC-364炎症反应的影响及其自噬相关机制。方法选用RSC-364细胞株,通过脂多糖(LPS)诱导大鼠滑膜细胞RSC-364建立类风湿关节炎滑膜炎性细胞模型,将细胞分为空白组(CON)、模型组(MOD)、地塞米松(DXM)和不同剂量(0.4、4.0和40.0 mg/L)的PTTTF组。用RT-PCR法检测大鼠滑膜细胞RSC-364细胞中环氧酶1(COX-1)、环氧酶2(COX-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)及肿瘤坏死因子(TNF-α)表达水平;采用Western blotting法检测大鼠滑膜细胞RSC-364细胞中自噬相关蛋白ATG5、ATG7、ATG12、Beclin1、Lc3II及Bcl-2的表达水平。结果与空白组相比,模型组中COX-2、IL-1β、IL-6、IL-17和TNF-αmRNA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),自噬相关蛋白ATG5、ATG7、ATG12、...     

黄芩苷对脂多糖诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞自噬的抑制作用

目的：探讨黄芩苷通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素（PI3k/Akt/mTOR）信号通路对脂多糖（LPS）诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞自噬的影响,并阐明其作用机制。方法：将对数生长期大鼠滑膜RSC-364细胞分为对照组、模型组、地塞米松（DXMS）组、10 μmol·L^-1黄芩苷组、20 μmol·L^-1黄芩苷组和40 μmol·L^-1黄芩苷组。对照组RSC-364细胞只加入培养基,其他各组RSC-364细胞均采用1 mg·L^-1LPS体外刺激12 h制作炎症细胞模型。采用MTT法检测各组RSC-364细胞存活率,RT-PCR法检测各组RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR、Beclin1和微管相关蛋白-轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ） mRNA表达水平,Western blotting法检测各组RSC-364细胞中Beclin1、Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ和P62蛋白表达水平。结果：与对照组比较,模型组RSC-364细胞存活率明显升高（P<0.01）,模型组RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR mRNA和P62蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ、Beclin1 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,不同浓度黄芩苷组RSC-364细胞存活率明显降低（P<0.05或P<0.01）,RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR mRNA和P62蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ、Beclin1 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。结论：黄芩苷可能通过激活PI3k/Akt/mTOR信号通路抑制LPS诱导的RSC-364细胞自噬。     

五味子木脂素对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用及对自噬相关通路的影响

目的观察五味子木脂素(SCL)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的抗炎作用,并探讨其自噬相关抗炎作用机制。方法大鼠右后足足跖皮下注射弗氏完全佐剂0.2 mL,足肿胀度≥0.8 mL为造模成功。第1天(D1)开始,大鼠ig给予地塞米松(Dex)0.25 mg·kg-1或SCL 25,50和100 mg·kg-1,持续28 d。测量D0和D28大鼠体质量,观察D1,D21和D28足跖形态。排水法检测足跖肿胀度;检测胸腺和脾指数;HE染色观察大鼠关节组织病理形态并分别半定量检测炎症细胞、滑膜组织增生和OOCHAS评分;RT-PCR法检测足跖滑膜组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-17、环氧合酶1(COX-1)和COX-2mRNA表达水平;RT-PCR法和Western印迹法检测足跖滑膜组织中腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、Beclin1、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬相关基因5(ATG5)、ATG7和ATG12基因及蛋白的表达。结果与正常对照组相比,模型组体质量明显下降(P<0.01);模型组炎症细胞...