口腔肿瘤恶变与唾液蔗糖酶活性的相关性研究

目的 :探讨唾液蔗糖酶活性与口腔肿瘤恶变之间的相互关系。方法 :采用邻甲苯胺测糖法 ,测定单位时间内唾液蔗糖酶水解蔗糖生成的葡萄糖量 ;在PH6 ,37℃条件下进行酶反应用双倒数作图法测出表观Km和表观Vm值 ;检测蔗糖酶活性。结果 :正常人唾液蔗糖酶活性为 1 32 2± 0 434mU/mgpro ,口腔鳞癌患者唾液蔗糖酶活性为 1 5 48± 0 6 5 7mU/mgpro ,二者之间比较无显著差异 (P >0 0 5 ) ;正常人唾液蔗糖酶的表观Km =(1 1 2± 2 4)× 1 0 -2 mol/L ,表观Vm =1 1 38± 0 35 2 (每分钟光密度值 ) ,口腔鳞癌患者唾液蔗糖酶的表观Km =(9 5±2 2 )× 1 0 -2 mol/L ,表观Vm =(1 0 89± 0 6 32 ) (每分钟光密度值 )。结论 :口腔良性肿瘤、涎腺腺瘤、口腔鳞癌患者与正常人比 ,唾液蔗糖酶活性无显著差异。     

40例家犬淋巴细胞酸性萘乙酸酯酶反应观察

近年来,国内外都采用酯酶染色法,以非特异性酯酶酸性萘乙酸酯酶(acid α-naphthyl acetate esterase;ANAE)作为T淋巴细胞的酶标记,在普通光学显微镜下鉴别T、B淋巴细胞。有人将这种方法移植于犬外周血淋巴细胞ANAE反应的测定,但报导还比较少。我们在哈尔滨医科大学第一医院进行犬的脾切除和移     

谷胱甘肽对乳酸脱氢酶活性影响的动力学研究

目的研究谷胱甘肽(glutathione,GSH)对乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性影响的动力学机制并求取抑制常数。方法采用分光光度法追踪酶反应,用Lineweaver-Burk作图法分析动力学机制并用计算法求取抑制常数。结果在pH7．0、25℃、101．3kPa条件下,在由乳酸转变为丙酮酸的酶反应方向,加入不同浓度的GSH对LDH1及LDH5均具有可逆抑制作用,并存在量效关系。随GSH浓度增加,表观Km^NAD 及表观Vmax^NAD 逐渐减小,而表观KTNAD ／Vmax^NAD不变;表观Km^Lac逐渐增大,表观Vmax^Lac不变,而表观Km^Lac／Vmax^Lac增大。结论GSH相对于NAD^ 为LDH1及LDH5的反竞争抑制剂,相对于乳酸为LDH1及LDH5的竞争性抑制剂;GSH结合于E-NAD^ 二元复合物从而降低了酶活性。抑制常数为：KLDHI-NAD^ -CSH=0．397mol／L和KLDH5-NAD^ -CSH=0．033mol／L。     

蔗糖酶活性中心巯基的动力学定位

采用维生素Ｃ（Ｖｉｔ Ｃ）为激活剂在ＰＨ５．０，３０℃条件下测定了酵母蔗糖酶的活性，并用Ｌ－Ｂ作图法测得酵母糖酶的表观Ｋｍ和表观Ｖｍａｘ。结果表明，表明Ｋｍ＝Ｋｍ，表观Ｖｍａｘ随ＶｉｔＣ剂量的增加而增大。因Ｌ－Ｂ作图中所有曲线均交横轴于一点（交点不在其它任何象限），而ＶｉｔＣ又具有很强的还原性，由此推测蔗糖酶活性中心的巯基恬于催化基团。     

唾液蔗糖酶表观Km的测定

研究资料表明 ,人体口腔唾液蔗糖酶是由口腔内多种产酸菌分泌的。其活性的高低与龋齿的发生和发展关系十分密切。近期又有报道 ,蔗糖酶活性与大肠肿瘤的恶变 ,与糖尿病及贲门的Ｂａｒｒｅｔｔ’ｓ腺癌的发生也有关。唾液蔗糖酶活性的测定也有报道 ,但动力学研究还很少见 ,其Ｋｍ值测定尚未见报道[1] 。正常人唾液蔗糖酶表观Ｋｍ值的测定可为口腔肿瘤或其它疾患的患者的唾液蔗糖酶表观Ｋｍ值的测定提供一个方法学基础 ,也为疾病的诊断 ,肿瘤的恶变提供一个生化指标。本次实验测定了 36例正常成人 (无龋齿 ,不喜食糖果的健康成人 )唾液蔗糖酶…     

谷胱甘肽、抗坏血酸对乳酸脱氢酶抑制作用的比较

目的 探讨谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸对乳酸脱氢酶(LDH)促动力学的影响,并对二者进行比较.方法 采用分光光度法追踪酶反应,用Lineweaver-Burk作图法分析动力学机制,并用计算法求取抑制常数及抑制率/[Ⅰ].结果 在pH7.0、25 ℃、101.3kPa条件下,在L-P方向,固定[Lac],变化[NAD ],随GSH和抗坏血酸浓度增加,表观KmNAD 及表观VmaxNAD 都逐渐减小,而表观KmNAD /VmaxNAD 不变;而固定[NAD ],变化[Lac],表观KmLac逐渐增大,表观VmaxLac不变,而表观KmLac/VmaxLac增大.反应体系加入GSH所求得的抑制常数大于加入抗坏血酸的抑制常数(KLDH1-NAD -GSH=0.0418mmol/L;KLDH-NAD 抗坏血酸=0.0397mmol/L和KLDH5-NAD -GSH=0.0606mmol/L;KLDH5-NAD -抗坏血酸=0.033mmol/L.)而抑制率/[Ⅰ]小于加入抗坏血酸的抑制率/[Ⅰ](im抗坏血酸LDHI=0.0336;im抗坏血酸LDH5=0.0281;imGsHLDHI=0.0066;imGSH LDH5=0.0059).结论 GSH和抗坏血酸二者都结合于LDH-NAD 二元复合物,形成死端三元复合物而抑制LDH催化的反应;GSH的抑制率/[Ⅰ]小于抗坏血酸的抑制率/[Ⅰ].     

脑梗塞患者红细胞变形性与其膜脂质及血脂的研究

采用激光衍射法检测３０例脑梗塞人和３０例同年龄正常人的红细胞变形指数（ＤＩ），发现在２００ｄｙｎ／ｃｍ＾２剪切力下，病人组ＤＩ值较正常对照组明显降低；同时还测定了两组红细胞膜脂质成分－－膜胆固醇、磷脂、二者比值及血浆脂质等成分，结果膜Ｃｈ、Ｃｈ／Ｐ１明显高于后才，血浆ＨＤＬ－Ｃ、ＡｐｏＡ－Ｉ明显降低，ＡｐｏＢ明显升高，而血总胆固醇（ＴＣ）无升同。相关分析发现，ＤＩ值与Ｃｈ／Ｐ１呈负相关。膜Ｃｈｄｇ     

兔肌乳酸脱酶米氏常数[Km（NADH）]的测定

本实验以兔肌乳酸脱氢酶为受试对象，在ＰＨ７．０，２５℃，１０１．３ｋＰａ条件下，采用不同配对的底物浓度方式，测定了不同时间的光吸收值，并计算出ＮＡＤＨ在Ａ３４０ｎｍ每分钟减少的平均差值。用二次作图法求出了ＬＤＨ的ｋｍ（ＮＡＤＨ）值为１．０６＊１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ，此结果与文献报道接近。     

乳酸脱氢酶催化反应的热力学研究

目的　探讨乳酸脱氢酶 (LDH)催化反应的热力学。方法　用Sigma公司生产的LDH ,在生化标准态 (pH7.0 ,2 5℃ ,10 1.3kPa)测定出其催化反应的平衡常数 (Keq) ,吉布斯自由能 (△G0′) ,将以上数值与用热力学公式(△G0′=-nF△E0′,△G0′=-RT1nKeq)计算出的Keq及△G0′相比较。结果　用酶反应测出的Keq =1.1× 10 1 0 mol L ,△G0′=- 5 7.1KJ mol;用热力学公式计算出的Keq =2 .5× 10 4 mol L ,△G0′ =- 2 5 .0 9KJ mol,差异非常显著。结论为了获得Keq及△G0′ 数值 ,应该用Keq =V1 KiQKmp V2 KiAKmB ,△G0′ =-V1 KiQKmp V2 KiAKmB 或Keq =[P][Q] [A][B],△G0′=-RT1nKeq来求取Keq。