睾酮对胰岛素诱导的肝细胞糖原合成和Akt/GSK3β磷酸化水平的影响

目的:探讨睾酮(T)在肝脏胰岛素抵抗(IR)形成过程中的作用及其分子途径。方法:将成年C57BL/6雌鼠随机分为T组(n=11)及对照组(n=10),T组小鼠每日腹腔注射T(10μg/g体质量,溶剂为蓖麻油),对照组每日腹腔注射相同体积的蓖麻油,连续给药24周后处死,分离出原代小鼠肝细胞进行体外培养,用胰岛素(Ins)处理细胞后,通过液闪法检测原代肝细胞中的糖原合成率。分别用10~(-5) mol/L和10~(-7) mol/L浓度的T溶液短时间(1 h)或长时间(36 h)处理体外培养的人肝癌细胞系BEL-7404后,再用Ins处理BEL-7404细胞,然后通过液闪法检测细胞中的糖原合成率;并通过免疫印迹法检测细胞中Akt、GSK3β蛋白的表达水平和磷酸化水平。结果:Ins对T组小鼠原代肝细胞中糖原合成的诱导作用显著低于对照组(P0.05),提示T组小鼠原代肝细胞对Ins的敏感性降低。BEL-7404细胞经T短时间(1 h)处理后,Ins对细胞中糖原合成率以及Akt和GSK3β蛋白活性的诱导作用显著提高(P0.05);但当BEL-7404细胞经高浓度T(10~(-5) mol/L)长时间(36 h)处理后,Ins对细胞中糖原合成率以及Akt和GSK3β蛋白活性的诱导作用显著降低(P0.05),提示高浓度T在短时间内能增强BEL-7404细胞对Ins的敏感性,但长时间暴露后会降低细胞对Ins的敏感性。结论:长时间的T暴露可能会降低肝细胞中Ins信号转导活性,从而干扰肝细胞对Ins的敏感性,导致IR的产生。     

宫颈性不孕的病因及治疗

宫颈因素导致的不孕症在不孕症中占有一定的比例，但在临床上往往被忽视。简要介绍了宫颈性不孕的病因及中西医结合治疗。     

GnRH脉冲治疗在女性下丘脑性闭经中的应用

下丘脑性闭经是指下丘脑GnRH神经元分泌促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)的功能不足或缺陷,导致垂体促性腺激素分泌降低,进而引起卵巢功能低落及月经闭止状态,其临床表现为原发性或继发性闭经及低雌激素血症。下丘脑性闭经的治疗目前主要针对低促性腺激素引起卵巢功能低下的基础治疗,治疗方案是采用雌激素和(或)孕激素的激素替代治疗,纠正患者的低雌激素血症、维护性征发育和月经来潮、预防骨质疏松等并发症。国外的学者首次于1979年报道,采用电池驱动的便携式GnRH脉冲泵成功治疗了2例卡尔曼综合征(Kallmann syndrome)患者,使患者恢复排卵功能[1];此后GnRH脉冲治疗逐步应用于临床,目前已在国内外各医疗机构推广使用。本文主要介绍GnRH脉冲治疗在女性下丘脑性闭经中的临床应用。     

青春期多囊卵巢综合征诊治策略

<正>多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)是女性最常见的一种复杂的内分泌及代谢异常所致的临床症候群,以长期排卵功能障碍、雄激素过多,以及卵巢多囊样改变为主要特征,且普遍存在胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)。遗传因素、胎儿宫内不良环境及出生后不良生活方式是PCOS发生的重要危险因素,也与IR的发生密切相关。PCOS多起病于青春期,随病程发展,可出现月经失调、多毛、脱发、     

睾酮对小鼠RAW264.7巨噬细胞肿瘤坏死因子-α和单核细胞趋化蛋白-1表达的影响及其分子机制

目的 探讨雄激素对RAW264.7巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α和单核细胞趋化蛋白(MCP)-1表达的影响及其分子机制.方法 (1)用不同浓度睾酮处理小鼠RAW264.7巨噬细胞不同时间,分别用RT-PCR和ELISA法检测细胞TNF-α和MCP-1 mRNA和培养上清液中的表达;(2)10-7 mol/L睾酮处理细胞0、10、30、60、180、360 min后,Western印迹检测磷酸化NF-κB(p-NF-κB)的表达.(3)NF-κB的抑制剂PDTC处理细胞1 h后再用不同浓度睾酮处理,用RT-PCR和ELISA法检测TNF-α和MCP-1的表达.结果 (1)①10-9和10-7 mol/L睾酮处理细胞6 h后,TNF-α mRNA表达分别增加1.78倍和1.87倍(均P<0.05),MCP-1 mRNA的表达也显著增加(均P<0.01);②睾酮处理6 h后TNF-α和MCP-1的分泌量的变化差异均无统计学意义;睾酮处理24 h后,TNF-α和MCP-1的分泌量显著增加(均P<0.05);10-7 mol/L睾酮处理组的分泌量显著高于10-9 mol/L睾酮处理组(均P<0.05).(2)随着睾酮处理时间的增加,p-NF-κB的表达增加,60 min达峰值(2.49±0.40)倍,P<0.05,以后逐渐降低.(3)PDTC预处理后再用睾酮处理6 h,TNF-α和MCP-1 mRNA的表达均低于同浓度单纯睾酮处理组(均P<0.05),但仍高于空白对照组(均P<0.05).PDTC预处理后再用睾酮处理24 h,TNF-α和MCP-1的分泌量均低于同浓度单纯睾酮处理组(除10-9mol/L睾酮组外,均P<0.05),但仍高于空白对照组(均P<0.05).结论 睾酮能促进离体的小鼠RAW264.7巨噬细胞TNF-α和MCP-1表达.NF-κB的活化是介导睾酮这一效应的分子机制之一.     

睾酮对3T3-L1脂肪细胞炎症因子生成的影响及其机制研究

目的 探讨睾酮对3T3-L1成熟脂肪细胞炎症因子生成的影响及分子机制.方法 3T3-L1前脂肪细胞诱导成熟,采用不同浓度睾酮(10-9、10-7、10-5mol/L)分别处理10～30 min及12、24及48 h后,提取上清液用ELISA法检测炎症因子白介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的浓度;RT-PCR检测细胞内IL-6、MCP-1mRNA的生成;免疫印迹检测核因子-κB(NF-κBp65)的磷酸化及表达.随后再用10-4mol/L NF-κB的抑制剂吡咯二烷二硫氨基甲酸(PDTC)预处理2 h,再加入睾酮,再观察上述结果的变化.结果 (1)与无睾酮组相比,睾酮3种浓度处理组3T3-L1脂肪细胞上清液IL-6、MCP-1的含量均明显增多(P<0.05),以10-5moL/L睾酮处理24 h时上清液两种因子含量较其他处理组明显增多(P<0.05).与无睾酮组相比,睾酮3种浓度处理组3T3-LI脂肪细胞12 h时,IL-6、MCP-1 mRNA的水平明显增加(P<0.05),以10-5moL/L睾酮处理12 h时两种因子的mRNA水平较其他组明显增加(P<0.05);(2)睾酮3种浓度短时间(10～30 min)处理3T3-L1脂肪细胞时,与无睾酮组相比,均可使NF-κBp65的磷酸化增加(P<0.05),其中以10-5mol/L的作用最明显(P<0.05);睾酮处理3T3-LI脂肪细胞12 h时,NF-κB p65的磷酸化明显增加(P<0.05),其中以10-9和10-5mol/L组较其他组作用明显(均P<0.05);(3)用NF-κB的抑制剂PDTC预处理2 h后,再用睾酮处理,上清液两种因子含量及其mRNA水平明显降低(均P<0.05).结论 睾酮可通过NF-κB途径促进成熟脂肪细胞炎症因子的分泌.     

王东梅治疗多囊卵巢综合征经验

多囊卵巢综合征是女性常见的妇科内分泌疾病，其发病率占育龄期妇女5~~---10％，且近来患病率增加，也引起了人们的重视。根据其主要临床表现当属中医学“月经后期”、“闭经”、“不孕”等范畴。山东中医药大学附属医院王东梅老师在治疗多囊卵巢综合征方面积累了丰富的临床经验，对其认识及治疗有其独到见解。现将其临床治疗经验总结如下。     

用药“我知道”,孕期更安心

很多女性在怀孕期间生病了,想得最多的问题就是“我要是吃药,会对孩子有影响吗?”“吃了药,这个孩子我还能要吗?”其实,妊娠期服药不一定会给胎儿造成不利的影响,大多数情况下没有必要终止妊娠.一般来说,判断药物是否会对胎儿造成不利影响,主要从以下几个方面入手.     

准爸爸妈妈们,你们真的准备好了吗

准爸爸妈妈们最渴望拥有一个健康聪明的宝宝,宝宝们的聪明和健康与他们的未来息息相关。所以,为人父母特别希望自己的宝宝们能赢在起跑线上。那么,望子成龙的准爸爸妈妈们在孕前需要做好哪些准备呢?身体准备夫妻双方做一次健康体检一般在备孕前的3~6个月,建议夫妇双方都做一次常规体检。体检项目包括甲状腺功能、肝肾功能、血糖、血压、心电图等。女方还需要做优生筛查、妇科检查及阴道超声,排除宫颈病变,了解有无阴道炎、盆腔炎、子宫肌瘤、子宫内膜息肉、卵巢囊肿,是否存在不利受孕的某些病原体感染或性传播性疾病(如风疹病毒、单纯疱疹、巨细胞病毒、弓形虫、梅毒等);对于35岁以上的准妈妈们,还建议检查卵巢功能,进一步评估生育力。准爸爸们还要查一下精液常规。     

“一胎多子”没那么美好

目前临床上使用的促排卵药物主要有克罗米芬、促性腺激素、促性腺激素释放激素,此类药物通过调节体内排卵相关的激素水平促进排卵。其中克罗米芬价格相对低廉、口服方便,促排卵有效率可达80％,是使用最为广泛的一种促排卵药物。但这类药物不一定能保证怀孕,且有一定的副作用。促性腺激素类药有可能造成卵巢过度刺激综合征,导致卵巢增大、腹痛和腹腔积液,严重者甚至可导致血栓形成而危及生命。值得注意的是,这类药物造成多胎妊娠的机会也很大,据统计,此类药物导致的怀孕中三胎甚至多胎妊娠的机会可达3％。