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1.
2.
艾滋病的致病因子为人免疫缺陷病毒。该病毒的蛋白酶在病毒复制和成熟中具有决定性的意义。由于目前国内外尚未获得艾滋病病毒蛋白酶高效表达的重组子及简便的活性检测系统,限制了它的研究与应用。本文将用PCR技术修饰的HIVPr基因克隆入原核高效表达载体pTTQ18的EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点之间,并用豆芽核酸酶将EcoRⅠ的粘端削平,构建了读框正确的表达载体,IPTG诱导表明,该重组子在大肠杆菌中获得了高表达,激光扫描结果表明:重组的HIVPr占细菌总蛋白8.9%以上。 相似文献
3.
将合成的含有随机序列 (NNK) 1 0 的寡核苷酸片段 ,克隆入噬菌体呈现载体噬菌粒 p CANTAB5 E的 Sfi ,N ot 位点 ,即 cp 蛋白信号肽与成熟肽之间 ,电转化 E.coli TG1,构建了噬菌体表面呈现的十肽库 ,实际库容为 3.5 3× 10 7,插入率为 6 6 .7% .经辅助噬菌体 M13KO7超感染后 ,获得滴度为 4.8× 10 1 1 pfu/ m l的噬菌体上清 .经过两轮 panning筛选和富集 ,从构建的随机十肽库中筛选到 2 6个具有血管形成素结合活性的重组噬菌体克隆 ,对其中 12个阳性噬菌体克隆的短肽序列进行了分析 ,EL ISA检测结果显示 12个阳性噬菌体克隆都能够… 相似文献
4.
[范彬,张英起,赵宁,颜真,药立波,苏成芝.细胞与分子免疫学杂志,2001;17(1):29-31]]目的 在原核细胞中表达融合蛋白hTNFα-hPgnK5并鉴定其活性.方法 构建hTNFα-hPgnK5基因的表达载体,并在大肠杆菌DH5α中进行表达.以MTT法测定该融合蛋白体外抑制肿瘤细胞或血管内皮细胞增殖的活性.结果 成功地构建了hTNFα-hPgnK5表达载体并获得表达.免疫印迹分析表明,该融合蛋白具有hPgnK5的免疫活性.体外实验表明,该融合蛋白具有抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞增殖的活性.结论 hPgnK5蛋白可与hTNFα共同表达,表达产物可抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞增殖. 相似文献
5.
冷应激大鼠垂体差异表达基因的克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
0 引言 冷暴露机体变化机制及其预防措施的研究一直是特殊环境医学研究的重要课题 [1 ] .在冷应激条件下 ,机体变化非常广泛、复杂 ,研究结果也很凌乱 ,无法整理出一个系统性结论 .任何机体酶和蛋白质的差异 ,其根本是基因表达的差异 .研究表明 ,冷应激时 ,机体变化的基础就是基因表达的变化 ,但是有关的研究报道至今尚未见到 .如果能成功分离出冷应激时机体的特异表达基因 ,对于提高冷环境作业能力、防治冷损伤都具有十分重要的意义 .我们采用 m RNA差异展示技术 ,分离正常生存环境和低温环境下的大鼠垂体差异表达基因 ,从而为从分子水… 相似文献
6.
人纤溶酶原饼环区5基因的化学合成与原核载体的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
0 引言 抑制肿瘤新生血管生长可以抑制肿瘤生长 ,这是目前肿瘤治疗中新发展的治疗途径 .血管生长抑制因子是由纤溶酶原中的前四个饼环区构成的 ,具有抑制肿瘤新生血管进而达到抑制肿瘤的作用 [1 ] .研究表明 ,纤溶酶原饼环区 5 (简称 K5 ,下同 ) ,具有比血管生长抑制因子更佳的抑制肿瘤新生血管生长的作用 [2 ] .我们将人工合成的人纤溶酶原 K5 基因的 8段核酸片段组成为一个完整的 K5 基因 ,并连入原核载体中获得成功 .1 材料和方法1 .1 材料 p GEM3zf(- )质粒 ,JM1 0 9菌种由本室保存 ,T4多核苷酸激酶为 MBI公司产品 ,Bam HI,… 相似文献
7.
我们采用RP-HPLC方法研究了SD纯系雄性大鼠冷适应期间脑垂体(P)、下丘脑(HT)和血浆(BP)生物活性肽变化。冷适应期间P、HT和BP肽类(MW≤30000)RP-HPLC图谱均出现一些新的肽洗脱峰。而且,所有这些肽类都能增强淋巴细胞(LC)转化活性。在P和HT肽类刺激下,脾LC[~3H]-TdR参入分别增加725 cpm(P<0.01)和1274 cpm(P<0.001)。将这些肽类进一步经Sep-Pack C_(18)柱纯化后仍分别增加[~3H]-TdR参入cpm值597(P<0.05)和333。这些结果表明了免疫系统(ImS)与神经内分泌系统(NES)双向调节环路的一个方面:NES作用于ImS。 相似文献
8.
9.
用HSV-1特异的小鼠脾TF(TFHSV-1)进行小鼠脾细胞[~3H] Leu参入试验,观察到TFHSV-1明显增加HSV-1特异抗原介导的小鼠脾细胞[~3H] Leu参入。如加热处理TFHSV-1,其影响[~3H]-Leu参入的抗原特异活性丧失。经紫外光吸收值测定和游离氨基酸分析,发现热处理TFHSV-1的紫外光吸收值增高,TFHSV-1中的游离氨基酸含量增加。这种变化与其特异活性的丧失可能有密切关系。结果表明,TFHSV-1具有增加体外小鼠脾细胞蛋白质合成的抗原特异活性的特征。其特异性成分可能是某种肽类。 相似文献
10.