附睾蛋白酶抑制剂对前列腺特异性抗原活性的抑制作用

目的 观察附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)是否抑制前列腺特异性抗原(PSA)酶活性.方法 利用分子克隆技术体外构建、表达、纯化重组Eppin和PSA.利用PSA水解变色底物S-2586的颜色变化,于分光光度计下测定其吸光度值,代表PSA酶反应速度,反应体系是在缓冲液0.1 mol/LTris-HCl,pH8.3,1.0 mol/L NaCl中进行,观察不同浓度Eppin的加入对PSA酶反应速度的影响.结果通过体外重组技术获得较高纯度和生理活性的Eppin和PSA,通过PSA水解变色底物S-2586的检测,重组PSA具有酶活性,0.3 μmol/L PSA与底物S-2586反应的饱和曲线分析显示Km(反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度)值是0.5 μmol,底物饱和浓度0.2 mmol/L,分别加入4中不同浓度的重组Eppin 0、0.56、1.16、2.32 μmol/L,随着Eppin浓度的增加,PSA水解其变色底物S-2586速度明显减慢,PSA活性越来越受到抑制.结论 附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)是前列腺特异性抗原(PSA)一种新的特异性抑制剂.

Abstract：

Objective To investigate the inhibitory effects of the epididymal protease inhibitor (Eppin) on the activity of prostate specific antigen (PSA).Methods Recombinant Eppin and recombinant PSA were produced by molecular cloning technique in vitro.The enzymatical analysis of Eppin inhibiting PSA was done in the reaction buffer 0.1 mol/L Tris-HC1,pH 8.3,1.0 mol/L NaCl.The hydrolysis of velocity of PSA to the chromogenic substrate S-2586 was detected by spectrometer.Results Recombinant Eppin and PSA with high purity were produced by molecular cloning technique.The recombinant PSA had the enzymatical activity by hydrolyzing its substrate S-2586.0.3μmol/L PSA and the substate S-2586 reaction to the saturation curve analysis showed that Km( response rate of half the maximum reaction rate when the substrate concentration) value was 0.5μmol,and substrate saturated concentration was 0.2 mmol/L.With the increases of Eppin (0,0.56,1.16,2.32μmol/L),the hydrolysis velocity of PSA to S-2586 was slowed down.Conclusion Eppin,as a new inhibitor,specifically inhibits the activity of PSA.     

自拟排石汤联合针刺减轻上尿路结石术后炎性反应的临床研究

目的观察自拟排石汤联合针刺缓解上尿路结石术后炎性反应的临床疗效。方法 120例接受上尿路结石手术患者随机分为治疗组与对照组各60例,治疗组采用自拟排石汤联合针刺治疗,对照组采用盐酸坦洛新缓释片口服治疗,术后4周评价2组临床治疗效果,完成输尿管支架症状问卷调查整体生活质量(USSQ)评分并检测2组血清炎症因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及尿草酸、尿钙、尿葡胺聚糖、尿柠檬酸水平。结果术后4周治疗组中医症状积分明显低于对照组(P0.05~0.01);治疗组USSQ评分、hs-CRP、IL-6、TNF-α、尿草酸、尿钙水平均明显低于对照组(P0.01),尿柠檬酸水平高于对照组(P0.01);术后3月治疗组58例、对照组52例完全排出残留结石(P0.05)。结论自拟排石汤联合针刺能有效改善上尿路结石术后炎性反应,排石治疗效果显著,值得临床进一步应用。     

附睾蛋白酶抑制剂Eppin与精囊Fibronectin相互作用

Eppin(SPINLW1;基因号:57119)基因是定位于人类染色体20q12-13.2的单拷贝基因[1-2],仅在睾丸和附睾中表达.以重组Eppin制作的疫苗可造成猴子的不育,既往研究认为Eppin调控精液的凝固和液化过程,影响精子的获能和运动,其详细的机制尚不清楚.     

长链非编码RNA BX357664对肾透明细胞癌细胞上皮间质转化过程的影响

目的：探讨长链非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）BX357664在肾癌组织中的表达并研究其对Caki?1和Caki?2细胞上皮间质转化过程的影响。方法：以前期芯片检测结果经标准化分析确认在肾癌组织中表达明显低于癌旁正常组织的lncRNA BX357664为目标,采用逆转录-聚合酶链反应（qRT?PCR）检测其在24对肾癌组织和Caki?1以及Caki?2细胞中的表达情况;lncRNA BX357664慢病毒载体感染Caki?1和Caki?2细胞后,Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞迁移和侵袭能力的改变;Western blot检测Caki?1和Caki?2细胞处理组和对照组中上皮间质转化相关蛋白的表达情况。结果：lncRNA BX357664在24对肾癌组织和Caki?1、Caki?2细胞中表达水平降低（P < 0.05）;lncRNA BX357664慢病毒过表达载体感染Caki?1和Caki?2细胞后能够显著抑制细胞迁移（P < 0.01）和侵袭能力（P < 0.01）,显著改变上皮间质转化相关蛋白的表达,抑制上皮间质转化的进程（P < 0.05）。结论：lncRNA BX357664在肾癌中显著低表达,在Caki?1和Caki?2细胞中上调lncRNA BX357664能够通过抑制上皮间质转化过程,从而抑制肿瘤细胞的转移和侵袭。     

人类附睾分泌蛋白的研究进展

附睾管腔中约含200余种分泌蛋白。目前认为精子与附睾分泌蛋白相互作用后才能发育成熟和功能完善。本文综述了近年来在人类附睾中发现的一系列新的分泌蛋白的结构和功能特点,对进一步研究附睾生殖和避孕机制有一定意义。     

精囊凝胶蛋白Semenogelin Ⅰ的研究进展

精液的凝固和液化过程亦是精子获能的过程,是精子取得前向运动所必需的。射精后的人类精液最初呈凝固状态,主要是由于精囊特异性分泌的精液凝胶蛋白SemenogelinⅠ(SgⅠ)的作用,在随后精液液化过程中被前列腺分泌的前列腺特异性抗原(PSA)水解,产生许多相对分子质量较小的具有各种生物学活性的肽段,这些肽段被发现存在于精子的表面或被精子利用,调控精子获能和向前运动的能力。文中对SgⅠ的生理功能研究进展进行了综述。