MicroRNA-141靶向Keap1调控Nrf2/ARE信号通路对乳腺癌T47D细胞活力的影响

目的:探讨微小RNA-141(miRNA-141)靶向Keap1调控Nrf2/ARE信号通路对乳腺癌T47D细胞活力的影响。方法:乳腺癌T47D细胞分别转染miRNA-141模拟物(mimic)和阴性对照序列(NC),作为miRNA-141组和NC组,并设立未转染空白对照组,采用real-time PCR法检测细胞中miRNA-141的含量;MTT法与荧光探针2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法分别检测细胞活力和活性氧簇(ROS)水平;Western blot法检测胞质接头蛋白Keap1、核因子E2相关因子2(Nrf2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)和谷胱甘肽过氧化酶1(GPx1)的表达;双萤光素酶实验检测miRNA-141与Keap1的关系。结果:转染miRNA-141 mimic后,miRNA-141组的miRNA-141表达量明显增高,细胞活力、ROS水平和Keap1蛋白表达均下降,而细胞核Nrf2蛋白SOD2和GPx1表达升高(P0.05);双萤光素酶实验结果显示Keap1为miRNA-141的靶基因。结论:miRNA-141可能通过靶向负调控Keap1激活Nrf2/ARE信号通路,诱导抗氧化酶的表达,以降低细胞氧化应激水平,从而抑制乳腺癌细胞的活力。     

联合检测血清CA125、CA199、CA153和CA724对卵巢癌的诊断价值

目的:探讨肿瘤标志物CA125、CA199、CA153和CA724联合检测对卵巢癌的诊断价值。方法:采用电化学发光法测定45例卵巢癌患者、38例卵巢良性肿瘤患者和41例健康妇女血清中的CA125、CA199、CA153和CA724水平。结果:卵巢癌患者血清CA125、CA199和CA153水平显著高于正常对照组(P<0.05);卵巢癌患者血清CA125、CA199和CA153阳性率分别为66.6%、31.1%和42.2%,均显著高于正常对照组(P<0.05);联合检测CA125、CA199、CA153和CA724诊断卵巢癌的阳性率为86.6%,诊断卵巢良性肿瘤的阳性率为34.2%,均显著高于正常对照组(P<0.05),且显著高于单一肿瘤标志物检测的阳性率;联合检测的敏感性(86.6%)和准确性(91.5%)均高于单项检测结果。结论:联合检测CA125、CA199、CA153和CA724对卵巢恶性肿瘤的诊断和鉴别具有重要意义。     

白皮杉醇对糖尿病肾病大鼠ERK1/2通路及CTGF蛋白表达的影响

目的：探究白皮杉醇（PIC）对糖尿病肾病（DN）大鼠细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）通路及其调控的结缔组织生长因子（CTGF）蛋白表达的影响。方法：取健康雄性SD大鼠,采用高脂高糖喂养+腹腔注射链脲霉素建立大鼠DN模型,并将造模成功的50只SD大鼠随机分为模型组（DN组）、PIC低（50 mg·kg^-1）、中（100 mg·kg^-1）、高（200 mg·kg^-1）剂量组,阳性对照组（厄贝沙坦25 mg·kg^-1）,每组10只;另取10只大鼠,正常饲养,作为正常对照组。各组均于造模成功后开始给药,PIC低、中、高剂量组及阳性对照组分别灌胃给予相应剂量的PIC及厄贝沙坦溶液,正常对照组和DN组灌胃给予10 mL·kg^-1生理盐水,各组大鼠连续给药4周,每天1次。给药期间观察大鼠饮食状况,于末次给药12 h后,称重、收集大鼠尿液,麻醉处死大鼠,取腹主动脉血和肾脏组织;用酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒检测血液肾功能指标血清肌酐（Scr）、血清尿素氮（BUN）、空腹血糖及尿液中24 h尿蛋白量及空腹血糖（FBG）含量;取肾脏组织,称重,并用苏木精-伊红染色法检测大鼠肾脏组织病理形态;用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸缩合法检测肾组织氧化指标超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量;用蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测肾脏组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血红素加氧酶-1（HO-1）、ERK1/2、CTGF蛋白相对表达水平。结果：与正常对照组相比,DN组大鼠精神萎靡、形体消瘦及肾小球基底膜增厚、肾小管扩张、肾间质炎性浸润等病理损伤严重,肾脏/体质指数、FBG、血清Scr和BUN、尿液中24 h尿蛋白量、肾脏组织中MDA含量、HIF-1α、HO-1、p-ERK1/2、CTGF蛋白表达升高（P<0.05）,SOD活性明显降低（P<0.05）;与DN组相比,PIC低、中、高剂量组及阳性对照组大鼠精神萎靡、形体消瘦及肾小球基底膜增厚、肾小管扩张、肾间质炎性浸润等病理损伤现象缓解,肾脏/体质指数、FBG、血清Scr和BUN、尿液中24 h尿蛋白量、肾脏组织中MDA含量、HIF-1α、p-ERK1/2、CTGF蛋白表达降低（P<0.05）,HO-1、SOD活性明显升高（P<0.05）,且PIC各剂量组上述指标呈剂量依赖性。阳性对照组上述指标变化与PIC组相比差异无统计学意义。结论：PIC可抑制ERK1/2-CTGF信号通路激活,升高HO-1表达、降低HIF-1α表达,抑制肾脏氧化应激损伤,改善DN大鼠肾脏损伤     

高敏C反应蛋白对糖尿病患者动脉粥样硬化的预测价值

目的探讨血清高敏C反应蛋白（highsensitivityC-reactiveprotein,hs-CRP）预测2型糖尿病患者发生动脉粥样硬化事件的价值。方法测定96例2型糖尿病患者（糖尿病组）及llO例同期体检健康者（对照组）颈动脉内膜一中层厚度（intima-mediathickness,IMT）和血清hs-CRP水平,并进行比较。结果糖尿病组血清hs-CRP及IMT高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论血清hs-CRP可用于2型糖尿病患者发生动脉粥样硬化的早期预测。     

雷公藤多苷降低糖尿病肾病大鼠炎性细胞因子的表达

目的观察雷公藤多苷(TWP)对糖尿病肾病(DN)大鼠核因子κB(NF-κB)、C-C型趋化因子配体5(CCL5)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)等炎性细胞因子表达的影响。方法链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立DN大鼠模型。动物随机分为正常组、模型组、1.8 g/kg/d TWP治疗组。用药8周末,计算肾脏指数(KI)、全自动生化分析仪检测大鼠血糖(BG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)等生化指标。ELISA检测大鼠血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)和肾匀浆IL-6、TNF-α和CCL5的含量;HE染色观察大鼠肾脏病理学改变;免疫组织化学染色检测大鼠肾组织NF-κB的表达。结果与模型组相比,TWP可改善DN大鼠一般状况;明显降低DN大鼠空腹BG、HbA1c、KI、BUN及Scr水平,增加DN大鼠体质量(P0.01);与模型组比较,TWP明显降低DN大鼠血清hs-CRP水平及肾匀浆中IL-6、TNF-α和CCL5的水平,明显下调DN大鼠肾组织NF-κB的表达(P0.01),经TWP治疗后DN大鼠肾脏病理变化减轻。结论 TWP可降低糖尿病大鼠血清及肾脏炎性细胞因子表达,减轻肾脏病变。     

小檗碱抑制糖尿病大鼠心肌纤维化北大核心CSCD

目的观察小檗碱对糖尿病大鼠血清转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、心肌组织1型胶原蛋白(Col1)和Col3的表达,探讨其对糖尿病心肌纤维化的影响。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法复制糖尿病大鼠模型,将造模成功的43只大鼠随机分为模型组、(50、100、150)mg/(kg·d)小檗碱组,灌胃给药12周;另设正常对照组和140 mg/(kg·d)二甲双胍组。用药结束后,检测大鼠空腹血糖、左心室收缩压(LVSP)和左心室舒张末压(LVEDP)水平,取大鼠心脏,计算心脏质量指数;ELISA测定血清TGF-β1、CTGF的含量;心肌组织Masson染色观察心肌的纤维化程度;Western blot法检测心肌组织Col1、Col3的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠空腹血糖水平、心脏质量指数、LVSP水平、LVEDP绝对值、TGF-β1、CTGF、心肌纤维化程度以及Col1、Col3的水平均明显升高;与模型组相比,(100、150)mg/(kg·d)小檗碱组和二甲双胍组大鼠空腹血糖水平、心脏质量指数、LVSP水平、LVEDP绝对值、TGF-β1、CTGF、心肌纤维化程度以及Col1、Col3的水平均明显降低。结论小檗碱可降低糖尿病大鼠TGF-β1、CTGF的含量,减少Col1、Col3在心肌间质沉积,对糖尿病大鼠的心肌纤维化有一定的抑制作用。     

叶黄素对乳腺癌细胞活力的影响

目的:探究叶黄素对人乳腺癌T47D细胞活力的影响及其可能的作用机制。方法:将人乳腺癌T47D细胞随机分为对照组和叶黄素(浓度分别为6.25、12.5、25和50 mg/L)干预组,采用MTT法检测叶黄素对T47D细胞活力的影响;RT-qPCR检测核因子E2相关因子2(Nrf2),谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx1)及超氧化物歧化酶2(SOD2)的mRNA水平;荧光探针DCFH-DA法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;Western blot检测Nrf2和p65的蛋白表达。结果:MTT结果显示叶黄素抑制人乳腺癌T47D细胞的活力,且呈时间和剂量依赖关系。RT-q PCR结果显示各浓度叶黄素干预组细胞中Nrf2,GPx1及SOD2的mRNA水平均较对照组升高(P0.05);且叶黄素干预组细胞内ROS水平显著下降(P0.01)。Western blot结果显示,叶黄素干预48 h后,Nrf2蛋白表达增加(P0.05),p65蛋白表达降低(P0.05),呈剂量依赖关系。结论 :叶黄素对乳腺癌细胞活力的抑制作用可能与上调Nrf2的表达、诱导抗氧化酶GPx1及SOD2 mRNA表达和降低氧化应激水平,进而阻断NF-κB信号通路有关。     

川芎嗪对大鼠胶原性关节炎及免疫功能的影响

目的:探讨川芎嗪对胶原性关节炎大鼠的影响。方法:采用Ⅱ型胶原诱导胶原性关节炎大鼠模型。随机分为正常组、模型组与川芎嗪(50 mg/kg、100mg/kg)处理组。实验过程中观察胶原性大鼠的一般情况、足爪肿胀度和关节指数的变化。给药结束后第2天,3%巴比妥那麻醉处死大鼠,取足爪组织制备切片观察病理变化;无菌取脾制备脾细胞悬液,用MTT法检测脾T细胞和B细胞增殖反应;制备10%脾组织匀浆用ELSIA法检测脾组织IL-1β、TNF-α和IL-12含量;心脏取血,制备血清用ELSIA法测定血清中抗CⅡ抗体水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节红肿,表面皮肤发亮充血,关节指数上升,脾T细胞和B细胞增殖反应、血清中抗CⅡ抗体水平和脾组织中IL-1β、TNF-α和IL-12水平明显升高,大鼠足爪皮下组织细胞排列紊乱且有大量炎性细胞浸润及血管增生。与模型组比较,川芎嗪100mg/kg可改善胶原性关节炎大鼠一般状况,明显抑制大鼠足爪肿胀;降低关节指数;抑制脾T细胞和B细胞增殖反应,在570nm的吸光度A分别为0.579±0.017 vs 0.624±0.015,0.263±0.021 vs 0.312±0.017;血清中抗CⅡ抗体水平显著降低,由模型对照组的(0.756±0.020)μg/L降低到(0.579±0.023)μg/L;脾组织中IL-1β〔(80.32±12.25)vs(160.06±20.61)ng/L〕,TNF-α〔(81.26±13.57)vs(123.51±20.34)ng/L〕和IL-12〔(181.05±19.57)vs(260.08±17.52)ng/L〕水平均明显降低;能明显改善大鼠足爪组织病理改变,炎性细胞浸润及血管明显减轻,川芎嗪50 mg/kg对上述指标无明显影响。结论:川芎嗪100 mg/kg可抑制CIA大鼠脾T和B淋巴细胞的增殖反应,降低脾组织中IL-1β、TNF-α和IL-12和血清中抗CⅡ抗体水平,改善足爪组织病理变化,对Ⅱ型胶原诱导的关节炎具有治疗作用。     

白芍总苷对胶原性关节炎大鼠作用的实验研究

目的研究白芍总苷(TGP)对大鼠胶原性关节炎(CIA)的作用及其可能机制。方法 SD大鼠随机分成6组:正常组、模型组、地塞米松(2 mg·kg-1)组及3个剂量(25,50,100 mg·kg-1)TGP组;用鸡Ⅱ型胶原建立胶原型大鼠模型;观察胶原型类风湿性关节炎(CIA)大鼠关节指数(AI)及关节组织的病理学变化;用ELISA法检测大鼠血清白介素-1β(IL-1β)和血管内皮生长因子(VEGF)的水平。结果白芍总苷可明显降低关节指数,抑制关节组织病理学改变;白芍总苷大、中剂量组能明显降低胶原性关节炎大鼠血清中IL-1β和VEGF的含量,与模型对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论白芍总苷对大鼠胶原性关节炎有明显抑制作用,其机制可能是与降低血清白介素-1β和血管内皮生长因子的水平、诱导炎性细胞因子网络趋于平衡有关。     

白芍总苷对佐剂关节炎大鼠足爪组织病理的影响及MMP-9蛋白表达的抑制作用

目的:探讨白芍总苷(total glucosides of paeonia:TGP)对佐剂关节炎大鼠足爪组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达的抑制作用和对大鼠足爪组织病理改变的影响及血清中血管内皮生长因子(VEGF)和白介素-1β(IL-1β)含量的影响。方法:建立Ⅱ型胶原诱导的佐剂关节炎大鼠模型,用免疫组化染色法检测足爪组织中MMP-9蛋白的表达,病理切片观察不同剂量的TGP对佐剂关节炎大鼠的治疗效果,用ELISA法检测佐剂关节炎大鼠血清中VEGF和IL-1β的含量。结果:白芍总苷中(50 mg/kg)、大(100 mg/kg)剂量组的胞浆内MMP-9的阳性表达比模型对照组明显降低,TGP中、大剂量治疗组与地塞米松组能明显改变佐剂关节炎大鼠皮下组织细胞排列、炎性细胞浸润及血管增生现象,TGP 25 mg/kg组对改善佐剂关节炎大鼠足部皮肤的病理状况无明显作用。中、大剂量的TGP组和地塞米松组血清VEGF和IL-1β的含量明显降低。结论:TGP对佐剂关节炎大鼠炎症的抑制作用,可能与其下调MMP-9蛋白的表达,抑制炎性细胞浸润及血管增生,降低炎性细胞因子VEGF和IL-1β的产生有关。