新生大鼠海马神经元的原代培养与鉴定

目的:探讨建立简便高效的大鼠海马神经元原代培养的纯化方法。方法:(1)离体培养新生24 h内SD乳鼠海马神经元,每天在倒置相差显微镜下进行神经元的形态学观察;(2)MTT法检测培养不同时间段神经元的活力变化,并绘制生长曲线;(3)纯化培养9 d神经元利用免疫荧光染色法检测β-微管蛋白Ⅲ(β-tublinⅢ)的表达率。结果:(1)倒置相差显微镜下观察原代培养的海马神经元,刚分离种植时可见神经细胞为圆形,24 h大多数细胞贴壁,3 d细胞突起增大、增粗,培养5~7 d神经元胞体丰满,突起交织成的网络更密集,培养14~16 d后,神经元开始退化;(2)生长曲线结果发现海马神经元体外培养经历了4个时期,即生长潜伏期、对数生长期、平台期、生长停滞期;(3)经β-tublinⅢ鉴定海马神经元纯度为(93.0%±2.5%)。结论:本实验方法步骤简便,可获得纯度较高的海马神经元,为研究与海马神经元相关的疾病提供了实验基础。     

慢性砷中毒对成年小鼠心肌细胞超微结构的影响

目的：观察慢性砷中毒对小鼠心肌细胞超微结构的改变,为探讨砷对心脏毒性作用提供实验依据。方法：选取健康成年昆明小鼠40只,雌雄各半,分为对照组、慢性砷中毒染毒组（15mg／L含砷水）,自由饮水3个月。建立慢性砷中毒动物模型后,测定各组小鼠心脏中砷含量,采用HE染色观察心肌组织的病理变化,透射电镜观察小鼠心肌细胞超微结构的变化。结果：1．染毒组小鼠心脏中砷含量明显高于对照组（P〈0．05）;2．HE染色观察染毒组心肌细胞肿胀,形态不规则,排列紊乱;3．电镜下观察染毒组心肌细胞肌原纤维排列紊乱,结构不清,线粒体嵴断裂,存在线粒体空泡化。结论：砷中毒可致心肌细胞病理及超微结构改变。     

应用计算机Maya技术制作人眼球解剖学教学课件

人体解剖学是研究人体正常形态结构及其发展规律的科学,是医学科学中一门重要的基础课程,其内容繁多,加上人体空间体结构复杂,传统教学模式对教师教学有较大的难度.     

球旁细胞光学显微镜下4种染色法结果观察

目的 探讨显示小鼠球旁细胞的适宜染色方法,更好地为教学和科研服务。 方法 取 20 只小鼠肾组织做石蜡切片,随机分为 4 组,分别用HE染色、高碘酸-Schiff 氏反应染色、改良结晶紫染色和免疫组织化学染色。 结果 HE染色和高碘酸-Schiff 氏反应染色不能显示肾球旁细胞;改良结晶紫染色和免疫组织化学均能较好地显示肾球旁细胞（胞质内有特征性的被染色的分泌颗粒）。 结论 改良结晶紫染色和免疫组织化学染色对球旁细胞有较好的染色效果,但改良的结晶紫染色更为简便、经济、稳定。     

细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrin β4水解的影响

目的:研究细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrinβ4水解机制。方法:常规培养高密度和低密度MCF7乳腺癌细胞,分别给予钙离子螯合剂和肝素处理,用Western blot检测不同培养密度MCF7细胞integrinβ4的水解情况;用Fluo-3 AM作为钙离子荧光探针,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内钙离子的分布。结果:Western blot检测结果显示,在低密度和高密度培养的MCF7细胞中,integrinβ4的水解模式不同;在高浓度培养的细胞中,200 k D integrinβ4片段产生增多;激光共聚焦扫描显微镜观察发现,低密度培养MCF7细胞中,钙离子的绿色荧光主要成团或颗粒状分布,而且与红色荧光有较多的重合,部分钙离子分布于细胞核内;在高密度培养的细胞中,钙离子在细胞质膜和细胞核中的定位较少;钙离子螯合剂BAPTA-AM处理可使200 k D integrinβ4明显减少;10-6mol/L的肝素能够减少MCF7细胞200 k D水解片段的增多,随着肝素浓度的增高,抑制效果有所增强;相对于BAPTA-AM,10-4mol/L肝素的抑制效应减弱。结论:高密度培养的MCF7细胞中,钙离子从钙库中释放,细胞外内流增多,激活calpain 2,导致200 k D integrinβ4水解片段增多。     

海洛因对大鼠额叶、海马区泛素蛋白酶体功能的影响

目的:观察海洛因对大鼠额叶和海马区脑组织形态学改变及Ub、UbE1在脑组织中的表达,探讨海洛因对中枢神经系统功能和形态的影响及其发生机制。方法:选择SD大鼠,分为3组(短时组2w、长时组4w及正常对照组),首日每次皮下注射海洛因3mg/kg,每天2次,逐日按3mg/kg递增海洛因注射量,连续9天(第9天每次剂量达27mg/kg),第10天用5.0mg/kg纳洛酮腹腔注射,诱发戒断症状,对海洛因成瘾大鼠模型戒断症状进行评分;对照组按同样方式注射等量生理盐水。采用免疫组织化学方法分别检测Ub、UbE1在神经元中的表达变化。结果:Ub和UbE1主要表达在神经元细胞核、细胞质内,细胞外未见表达。图像分析显示Ub、UbE1的表达量均为海洛因长时依赖组(4w)海洛因短时依赖组(2w)非海洛因依赖组,差别具有统计学意义(P0.05)。结论:海洛因中毒可引起脑组织形态学改变,表现为神经元数量减少、神经元变性等,其机制可能与泛素蛋白酶体功能障碍有关。     

水族抗痹证药酒抗类风湿性关节炎的实验研究

目的：观察水族抗痹证药酒对类风湿性关节炎大鼠的影响。方法：将 50只 SD雌性大鼠随机分组,分为空白组,模型组,抗痹证药酒高、中、低剂量组 （5mL/kg,2.5mL/kg,1.25mL/kg）,每组 10只。除空白组外,其余各组大鼠于踝关节注射弗氏佐剂建立关节炎模型,建模成功后给予相应剂量的药物灌胃,每天 1次,持续 2周。测定各组大鼠血清中白介素 1－β、白介素 6、肿瘤坏死因子 －α的含量,镜下观察各组大鼠踝关节组织病理变化。结果：与空白组比较,模型组大鼠血清中白介素 1－β、白介素 6、肿瘤坏死因子 －α含量均明显升高 （P＜0.05）。与模型组比较,抗痹证药酒不同剂量组大鼠血清中白介素1－β、白介素 6、肿瘤坏死因子 －α含量均有不同程度下降,其中高剂量组血清白介素 1－β含量,中剂量组和高剂量组血清白介素 6含量,低剂量组、中剂量组、高剂量组血清肿瘤坏死因子 －α含量比较具有显著性差异 （P＜0.05）。与模型组相比,水药抗痹证药酒不同剂量组大鼠关节滑膜充血、水肿情况有不同程度减轻,淋巴细胞、浆细胞等炎细胞浸润相对较轻。结论：水药抗痹证药酒可降低佐剂性关节炎大鼠血清中白介素 1－β、白介素 6、肿瘤坏死因子 －α含量,从而减轻关节滑膜炎症以及关节软骨、骨质破坏,起到抗类风湿性关节炎作用。     

慢性铝中毒对大鼠海马CA3区ChAT阳性神经元的影响

目的：从慢性铝中毒大鼠海马CA3区胆碱乙酰转移酶（Choline Acetytransferase,ChAT）变化的角度,探讨铝的神经毒性作用机制。方法：40只4～5月龄SD大鼠,随机分为铝中毒组和正常对照组,采用尼氏染色及ChAT免疫组化染色,计数阳性细胞,用细胞形态学计量方法测量ChAT阳性产物的平均光密度。结果：铝中毒组大鼠海马CA3区ChAT阳性神经元减少,合成的乙酰胆碱（Acetychdine,Ach）也减少。结论：铝可对大鼠海马CA3区ChAT阳性神经元产生神经毒性作用。