大黄素对人肝癌Huh7细胞的凋亡作用及机制研究

目的 研究大黄素对人肝癌Huh7细胞的凋亡作用及分子机制。方法 培养肝癌Huh7细胞,1、3、10、30、100 μmol/L的大黄素处理24 h,5-氟尿嘧啶(5-FU)作为阳性药,MTT法检测细胞存活率;30 μmol/L大黄素处理细胞0、3、6、24 h,光学显微镜观察细胞形态变化;Annexin V-FITC/PI双染法与流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白的表达变化。结果 大黄素显著抑制Huh7细胞生长且呈浓度依赖性,其IC₅₀值为11.55 μmol/L。30 μmol/L大黄素处理细胞,随着药物作用时间的增加,细胞明显固缩和凝聚,大量细胞脱离培养皿底部;细胞凋亡明显;p-Akt、Bcl-2蛋白表达量减少,cleaved caspase-3蛋白表达量增加。结论 大黄素通过Akt信号途径诱导肝癌Huh7细胞凋亡。     

四溴苯三唑对宫颈癌HeLa细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的：探讨四溴苯三唑（TBB）对人宫颈癌HeLa细胞的促凋亡作用,阐明其对相关信号转导通路的作用机制。方法：选取处于对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞,将其分为对照组（未给予TBB）和实验组（给予TBB）。采用MTT比色法检测HeLa细胞存活率,采用倒置显微镜观察人宫颈癌HeLa细胞形态表现,采用Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法及流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率,采用Western blotting法检测细胞中凋亡相关蛋白p-Akt、Akt、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3和Pro-caspase-3表达水平。结果：MTT法检测,与对照组比较,实验组HeLa细胞存活率明显降低（P<0.01）,且呈浓度依赖性;倒置显微镜下观察,实验组HeLa细胞出现体积缩小、细胞核皱缩等细胞凋亡的形态变化;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法和流式细胞术检测,与对照组比较,实验组各时间段（3、6、12和24 h）细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）;Western blotting检测,与对照组比较,实验组HeLa细胞中抗凋亡蛋白p-Akt和Bcl-2表达水平逐渐降低,促凋亡蛋白Bax和cleaved-caspase-3表达水平逐渐升高,Pro-caspase-3表达水平逐渐降低（P<0.05或P<0.01）。结论：TBB可能通过抑制Akt信号通路的活性进而有效促进HeLa细胞凋亡。     

黄芪中有效成分对人食道癌HCE-4细胞凋亡的影响

目的 研究黄芪有效成分芒柄花素与黄芪甲苷IV对人食道癌HCE-4细胞的凋亡作用及其分子机制。方法 MTT法检测黄芪提取物(阳性对照药)、芒柄花素与黄芪甲苷IV对人食道癌HCE-4细胞的增殖抑制作用,Annexin V-FITC/PI双染法检测3种药物诱导HCE-4细胞凋亡的能力,Western blotting法检测凋亡相关蛋白的表达变化。结果 芒柄花素与黄芪甲苷IV对HCE-4细胞具有良好的生长抑制作用,其效果呈浓度依赖性;芒柄花素与黄芪甲苷IV能够诱导HCE-4细胞的凋亡且呈时间依赖性;芒柄花素与黄芪甲苷IV处理HCE-4细胞后,抗凋亡蛋白p-AKT的表达量明显减少,促凋亡蛋白cleaved-caspase-3表达量增加。结论 黄芪有效成分芒柄花素与黄芪甲苷IV通过调控AKT信号转导途径诱导人食道癌HCE-4细胞凋亡。