呼吸道真菌感染病原学诊断标准的探讨

真菌感染逐年增多 ,且以呼吸道 ,尤其是以肺部为主。其临床表现缺乏特异性 ,诊断困难。北京协和医院报道 ,1953～19 93年 ,尸检 3 4 4 7具 ,发现深部真菌感染 85例 ,生前明确诊断者仅 5例 ,占 5 9% ,漏诊 94 1%。为此 ,我们针对呼吸道真菌感染病原学诊断标准作一探讨。一、材料和方法1.细菌 (含真菌 )半定量培养和直接涂片检查 :半定量培养“11级法” :将自然咳取的痰液或咽拭子 ,接种血平板、巧克力平板和TTC沙保罗平板 ,分区划线。巧克力平板置烛缸 ,3 5℃孵育 48h ;分别挑取各种菌落涂片 ,并于第一区混合取材涂片 ,革兰染色、镜检 ;常…     

呼吸道真菌感染的诊断与真菌首次检出数量之间的关系探讨

目的　明确真菌首次检出数量与感染诊断间的内在联系 ,寻觅早期诊断呼吸道真菌感染的病原学诊断标准。方法　实施呼吸道分泌物的半定量细菌 (含真菌 )培养和直接涂片检查 ;分析住院病人中呼吸道真菌检查阳性者的病历资料。结果　呼吸道真菌感染的出院确诊、疑诊、否诊例数为 5 3 1、115、174,比率为 64 76%、14 0 2 %、2 1 2 2 % ;出院确诊者半定量培养检出真菌少量、0 1、≥ 0 2组为 2 0 1、118、12 0例 ,占各自总量的 5 4 62 %、66 67%、77 42 % ,直接涂片检出真菌少量 ,≥ (1+ )组为 19、72例 ,占各自总量的 5 5 88%、84 71% ;同时进行半定量培养和直接涂片检查者 60例 ,其出院确诊、疑诊、否诊例数为 5 3、4、3 ,比率为 88 3 3 %、6 67%、5 0 0 % ;5例培养阳性而涂片阴性患者被确诊 ,其比率为9 43 %。结论　真菌检出数量与真菌感染确诊之间呈正相关关系 ,rs=1 0 0 0 ,P <0 0 5 ;半定量培养检出真菌量≥ 0 1或 /和直接涂片检出真菌量≥少量 ,有助于确诊 ;半定量培养和直接涂片检查宜同时进行     

健康人群322例口咽部非厌氧菌半定量调查报告

目的：把握口咽部非厌氧正常菌群的携带率和量，为准确识别呼吸道感染菌奠定基础。方法：随机采取不同年龄段健康人群口咽试予，分别划线于血、巧克力、TTC沙保罗平板；巧克力平板置烛红，其余置空气环境，35℃孵育48小时，分别挑取各种菌落并于第1区混合取材涂片，革兰染色镜检，必要者加作触酶、凝固酶等相关试验；TTC沙保罗平板培养1周；于血和巧克力平板计数100个菌落，用十分法记录各种细菌的数量。结果：口咽部非厌氧正常菌群以非β－溶血链（肠）球菌和革兰氏阴性球菌居主，携带率均100％，平均携带量前者0．45，后者0．35; 微球菌和棒状杆菌居次，携带率分别为74％和67％，平均携带量均＜0．1、革兰阴性杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌和深部真菌较少，其携带率分别为33％、28％、7．5％和4．7％，平均携带量均＜0．1。结论：若某种细菌数量明显增多，则有成为感染菌的可能。     

痰液标本细菌学检验若干问题的探讨

目的 促进痰液细菌学检验技术规范的建立.方法 对痰液标本细菌学检验全过程的主要环节进行实验探索和认真观察.结果 痰液标本"前处理"问题值得商讨,"认真选取病理成分"较为适用.一般细菌培养,宜同时选用血平板和巧克力平板.细菌培养和直接涂片革兰染色镜检宜同时进行.倡导常规化半定量培养方式,试用"12级法".对于"自然咯痰"法采集的标本,其感染菌的实验室判定,应当依据临床痰液标本细菌学检验结果和当地各年龄段"健康人群"口咽部分泌物的细菌半定量调查结果的相互比较:如果"正常菌群"的数量大于上述调查结果的平均携带量而小于2倍平均携带量,可视为增多,有可能是"感染菌",但可能性较小;若数量大于上述调查结果的2倍平均携带量,可视为明显增多,更有可能是"感染菌",而且可能性较大.感染的最终诊断,只能由临床医生综合各方面信息之后作出.结论 痰液标本质量具有决定性作用,应规定由医务人员当面指导和监督取送.微生物学检验工作者应密切联系患者和医护人员;微生物学检验报告应常规化设置"检验咨询"栏目.     

呼吸道分泌物真菌半定量培养和直接涂片检查同时进行的临床准确性探讨

目的把握呼吸道分泌物真菌半定量培养和直接涂片检查同时进行的临床准确性。方法建立呼吸道分泌物真菌半定量培养“12级法”和直接涂片检查“7级法”;同时应用上述2种方法,对不同年龄段非呼吸道感染人群口咽部真菌的阳性率和数量进行调查(对照组),并对临床呼吸道分泌物(痰液/口咽拭子)标本进行常规化真菌检验;统计分析出院时确诊为真菌感染者(依据临床表现、真菌培阳或/和涂阳、住院期间的观察、鉴别和治疗验证等作出,并有明确的文字记录)的病历资料(病例组);列出四格表,计算其临床准确性指标。结果非呼吸道感染人群322例口咽部真菌培养和直接涂片的阳性率分别为0.047(15/322)、0.003(1/322),其中≥50岁组分别为0.123(10/81)、0.012(1/81);出院时确诊真菌感染者的病原学检验阳性(培阳和/或涂阳)率1.0(505/505),其中真菌培阳率0.976(493/505),涂阳率0.4(202/505),培阴涂阳率0.024(12/505),涂阴培阳率0.6(303/505),≥50岁组培阳率0.980(445/454),涂阳率0.407(185/454),培阴涂阳率0.020(9/454),涂阴培阳率0.59(269/454);同时进行呼吸道分泌物真菌半定量培养和直接涂片检查的临床准确性指标———灵敏度(真阳性率)、特异度(真阴性率)、阳性预测值(阳性人中的患者率)、阴性预测值(阴性人中的非患者率)、准确度(真阳真阴之和所占的百分率)、尤登指数(灵敏度和特异度的综合)、阳性似然比(真阳性率与假阳性率之比)、阴性似然比(假阴性率与真阴性率之比),分别为1.000、0.953、0.971、1.000、0.982、0.953、21.28、0.000,其中≥50岁组分别为1.000、0.877、0.978、1.000、0.981、0.877、8.130、0.000。结论呼吸道分泌物真菌培阳和/或涂阳,排除误判,宜视为临床感染或亚临床隐性感染,不宜视为正常携带;其临床准确性两法同时进行>半定量培养>直接涂片检查,宜提倡两法同时进行;鉴于真菌感染患者中≥50岁组超过4/5,相关指标以≥50岁组者更具临床实用价值。     

呼吸道真菌感染诊疗控制的科研前后比较分析

目的把握相关科研对于呼吸道真菌感染诊疗控制实际的客观作用，发现存在的问题，提出持续改进建议。方法将研究结论基本上尚未通报全院之前的1996～2001年定为“研前”时段，将研究结论陆续通报全院之后的2002～2006年定为“研后”时段，并对2个时段中出院时确诊有呼吸道真菌感染的全部住院患者的病历资料进行统计和分析。结果科研前、后的呼吸道真菌感染患病率分别为0．737％和0．687％，下降6．78％，x^2=1．39，P〉0．2；病死率分别为23．92％和17．39％，下降27．30％，x^2=7．81，P〈0．01。抗生素（不含抗真菌药物）使用率分别为100％和99．7％，其中单联分别为22．2％和12．9％，双联分别为63．6％和76．9％，三联或超过三联分别为14．3％和9．9％；皮质激素或／和免疫抑制药物使用率分别为29．7％和24．3％。其升降交错，总体差别不大。入院前真菌感染患者分别占36．91％和44．31％，上升20．05％，x^2=6．38，P〈0．02。结论呼吸道真菌感染病原学诊断标准和易患因素研究促进了医院真菌感染诊疗控制水平的明显提高。降低真菌感染患病率，必须进一步切实规范抗生素（包括抗真菌药物）或／和免疫抑制药物的合理使用。     

健康人群和非呼吸道炎症患者口咽部真菌半定量调查分析

目的 了解健康人群和非呼吸道炎症患者口咽部真菌携带概率及其数量。方法 同时采用半定量培养“12级法”和涂片“7级法”，对健康人群和非呼吸道炎症患者的口咽部真菌携带状况进行调查。结果 健康人群真菌培养、涂片的阳性率分别为4．7％、0．3％，非呼吸道炎症患者真菌培养、涂片的阳性率分别为0．137％、0．013％，非呼吸道炎症人群（包括健康人群和非呼吸道炎症患者）真菌培养、涂片的阳性率分别为9．0％、0．8％，三者比较，培养P〈0．001，涂片P〉0．05。检出的真菌均为念珠菌。数量均≤少量。非呼吸道炎症人群的≤1个月、10～29岁、30～49岁、≥50岁组的念殊菌培养阳性率递增，分别为2．9％、2．5％、5．8％、17．5％，≥50岁组与≤49岁组比较，P〈0．001。结论 健康人群和非呼吸道炎症患者口咽部的念珠菌培养阳性率差别明显，只宜综合而不宜单独用作病例对照；若从自然咳出的痰液标本中检出念珠菌以外的其它真菌，宜作可疑感染菌对待；口咽部携带的念殊菌，视为正常菌群还是带菌状态，尚待讨论；临床痰液标本中的念珠菌数量如果大于少量，提示数量增加，有感染的可能；真菌感染的危险性有随年龄增大而增加的趋势，尤以≥50岁组人群为甚；真菌半定量培养的灵敏度高于涂片，而特异度低于涂片。     

深部真菌感染的人群易感因素探讨

目的：研究真菌感染的人群易感性，以便对可控因素进行控制。方法：阅录1996年～2003年间出院诊断明确呼吸道真菌感染者832例病历资料和同期住院病人统计报表，针对不同状况计算其患病率，并作统计学处理。结果：呼吸道真菌感染患病率（‰）男：女=11．2：4．5，X^2=138．9，P〈0．005，统计学上有显著性差异，男性较女性易患真菌感染；年龄增大，真菌感染率亦随之增大，特别是≥61岁组患病率高达33．5‰，占全部病例的78．6％，P〈0、005，统计学上有显著性差异，提示老年人有较大易感性；汉族：彝族：其他民族=8、4：5．7：7．5，P〈0．05，民族之间也有差异，汉族略高；干部：工人：农民：其他=21.8：6．0：2．3：2．4，P〈0．005，统计学上有显著性差异，易感性干部〉工人〉农民和其他职业；城市：农村=10，7：2．5，城市明显高于农村，P〈0.005。结论：男性、老龄、汉族、干部职业、城市居住等，是深部真菌感染的人群易感因素。对高危人群，尤其是疑似患者，应尽早做呼吸道分泌物涂片和培养，一旦真菌检查阳性，务必高度重视。     

呼吸道分泌物真菌直接涂片检查的临床准确性探讨

目的了解呼吸道分泌物真菌直接涂片检查的临床准确性。方法建立真菌直接涂片检查“7级法”;对不同年龄段“无呼吸道炎症人群”（对照组）口咽部真菌的阳性概率及其数量进行调查;对临床呼吸道炎症患者痰液标本进行常规化真菌涂片检查;统计分析出院时确诊呼吸道真菌感染患者（病例组）的病历资料;列出四格表,计算其临床准确性。结果“无呼吸道炎症人群”口咽部真菌直接涂片的阳性概率为0．008（5／622）,其中≥50岁组为0．013（3／234）均为念珠菌,数量均为“少量”。出院时确诊呼吸道真菌感染患者的“涂阳”率为0．418（301／720）,其中≥50岁组为0．424（277／654）。其临床准确性指标——灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度、尤登指数、阳性似然比、阴性似然比分别为0．418、0．992、0．984、0．596、0．684、0．410、52．25、0．587,≥50岁组分别为0．424、0．987、0．989、0．380、0．572、0.411、33．13、0．584;总体在≥50岁组的灵敏度和特异度之间,均P〉0．50。结论痰液真菌直接涂片检查的灵敏度低而特异度高。排除误判的“涂阳”,宜视为临床感染或亚临床隐性感染,不宜视为正常携带;若其数量大于“少量”,则诊断意义更大;“涂阴”无否定意义。鉴于真菌感染患者中≥50岁组高达0．91（654／720）,相关指标以≥50岁组者更具临床实用价值。     

自然咳出痰标本真菌半定量培养的临床准确性探讨

目的把握自然咳出痰液真菌半定量培养的临床准确性。方法建立相对准确适用的呼吸道分泌物真菌半定量培养12级法,对不同年龄段无呼吸道炎症患者咽拭子和临床呼吸道炎症患者自然咳出的痰液标本进行真菌半定量培养;统计分析出院时确诊为呼吸道真菌感染患者的病历资料,列出四格表,计算其临床准确性。结果无呼吸道炎症人群口咽部真菌半定量培养的阳性概率为0．090（56／622）,其中≥50岁组为0．175（41／234）;均为念珠菌;数量均为少量。出院时确诊呼吸道真菌感染患者的培阳率为0．972（700／720）,其中≥50岁组为0．976（638／654）。其临床准确性指标：灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度、尤登指数、阳性似然比、阴性似然比分别为0．972、0．910、0．926、0.996、0.943、0．882、10．8、0．031,≥50岁组分别为0.976、0．825、0.940、0.923、0．936、0．801、5．577、0．029;总体与≥50岁组比较,其灵敏度χ^2为0．149,P〉0．5;特异度χ^2为10．314,P〈0．01。结论痰液真菌半定量培养的灵敏度高而特异度略低,若同时进行特异度高的其它检验（譬如直接涂片检查等）,将更有价值;若从自然咳出的痰液中栓出非念球菌真菌,则有感染菌的可能;若数量大于少量,则意义更大;≥50岁组存在较高的真茼感染风险性;鉴于真菌感染患者中≥50岁组高达0．91（654／720）,相关指标以≥50岁组者更具临床实用价值。