骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞免疫表型特点分析

目的:探讨流式细胞术(FCM)检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓细胞免疫表型在MDS诊断及预后中的价值。方法:用FCM分析44例初诊MDS患者骨髓细胞免疫表型,分析MDS患者免疫表型的表达及分布情况;建立流式积分系统(FCSS)分析其与WHO分型及国际预后积分系统(IPSS)、WHO分型预后积分系统(WPSS)积分的相关性。结果:MDS患者骨髓细胞免疫表型存在多种异常:①骨髓原始细胞表达成熟抗原CD11b、CD15,及淋巴细胞相关抗原CD2、CD5、CD7、CD19或CD56,原始、幼稚细胞比例增高。②成熟粒细胞CD13/CD16、CD11b/CD16关系模式异常,表达CD56,中性粒细胞颗粒性减低。③单核细胞有CD56和CD34异常表达,单核细胞比例增高等。④红系Gly表达减弱,CD71表达减少,有核红细胞比例增高。⑤MDS患者骨髓细胞FCSS积分与WHO分型、IPSS积分、WPSS积分呈正相关。结论:MDS患者骨髓细胞存在多种免疫表型异常,FCM分析MDS患者骨髓细胞免疫表型异常可以为MDS的诊断和预后提供参考。     

Wnt、Notch信号参与造血微环境调控造血机制的研究

目的 探讨造血发育过程中Wnt和Notch信号通路参与造血微环境调控造血的机制.方法 磁珠分选法分离小鼠骨髓c-kit~+造血干/祖细胞(HSPC).贴壁培养法分离小鼠孕10.5 d主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区,孕12.5 d、14.5 d、16.5 d胎肝以及骨髓来源的基质细胞.通过Transwell共培养以及流式细胞术计数,比较不同来源基质细胞支持HSPC增殖的能力.通过实时定量PCR和免疫荧光动态检测各发育阶段基质细胞中Wnt、Notch Mrna和蛋白的表达.结果 体外培养7 d,AGM区和胎肝基质细胞培养体系中c-kit~+细胞数由0.4×10~5/孔分别扩增为(19.2±3.2)×10~5/孔和(26.8±5.4)×10~5/孔,明显高于骨髓基质细胞培养体系的(9.6 ± 2.9)×10~5/孔(P＜0.05);其中,AGM区和骨髓基质细胞培养体系中c-kit~+细胞比例分别为(75.2 ± 7.1)%和(74.1 ± 6.2)%,明显高于胎肝基质细胞培养体系的(63.4±5.3)%(P＜0.05).Wnt、Notch在各阶段基质细胞均有表达,Wnt在AGM区和胎肝基质细胞表达水平较高,Notch在AGM区及骨髓基质细胞表达水平较高(P＜0.05).结论 造血发育过程中,造血微环境通过Wnt与Notch信号通路协作、交替、整合,精密调控HSPC的发育.     

Fabry病一例报道并文献复习

目的：探讨Fabry 病的临床表现、诊断及鉴别诊断，提高临床医师对Fabry病的认识，降低漏诊率。方法：报道1例罕见的Fabry病肾损害，结合文献对该病的临床表现、诊断、鉴别诊断及治疗和预后进行探讨。结果：患者为中年男性，发病年龄为30岁，临床表现主要为肾脏损伤及周围神经病变，伴有尿毒症家族史，中性粒细胞测α-半乳糖苷酶示酶活性：0nmol/mg/hr，基因突变：p.H125T（c.373C>T），最终确诊Fabry病。患者曾至多家医院就诊，均未明确病因，漏诊率高。结论：Fabry病属于遗传性肾脏疾病，为临床罕见性疾病，容易漏诊，确诊需仔细的询问病史、肾脏病理检查、测定血清α-半乳糖苷酶水平及基因诊断。     

外源性shh蛋白对c-kit+造血祖细胞增殖分化作用研究

目的 探讨sonic hedgehog(Shh)信号对小鼠造血祖细胞的扩增分化调控作用.方法 取孕14.5天Balb/C小鼠,分离培养小鼠胎肝基质细胞作饲养层.免疫磁珠法分选小鼠骨髓来源c-kit+造血祖细胞,将分选的造血祖细胞在不同实验组培养条件下培养7d(a.对照组;b.Shh组;c.以胎肝基质细胞为饲养层的Transwefi共培养组;d.Shh+Transvcell共培养组).通过绘制细胞生长曲线,免疫表型鉴定及功能分析,观察胎肝基质细胞饲养层以及Shh活性肽对细胞增殖、分化、集落形成的调控作用.结果 和对照组相比,胎肝基质细胞可以明显促进造血祖细胞增殖(P<0.05);单纯的外源性Shh蛋白可以同时促进造血祖细胞的增殖和分化(P<0.05);在与胎肝基质细胞共培养体系中,外源性Shh蛋白可以明显地促进细胞增殖,经过体外培养7 d后,细胞数迭80×105,其中c-kit+细胞占(84±9.44)%,集落形成能力亦明显增强.结论 Shh蛋白参与调控造血祖细胞的增殖与分化,在胎肝基质细胞的支持下,Shh蛋白对小鼠c-kit+造血祖细胞的扩增有明显的促进作用,表明Shh蛋白与胎肝基质细胞存在着某种整合作用,这种作用在一定程度上调控着造血祖细胞的增殖与分化.