多重荧光PCR-熔解曲线法同时检测常见病原真菌方法学的建立及诊断价值

目的建立多重荧光PCR-熔解曲线法，并评价其同时检测假丝酵母菌、曲霉菌及新型隐球菌的诊断价值。 方法建立多重荧光PCR-熔解曲线法并对其检测体系进行优化。收集临床高度怀疑为侵袭性真菌感染（IFI）的各类临床样本179例，其中血液65例、深部痰液35例、尿液30例、脑脊液18例、胸腹水12例、肺泡灌洗液10例、新鲜肺组织9例。通过敏感性、特异性、重复性实验验证多重荧光PCR-熔解曲线法的检测性能，并应用受试者工作特征（ROC）曲线评价该方法的诊断效能。 结果建立的多重荧光PCR-熔解曲线法可同时检测8种常见病原真菌，包括4种假丝酵母菌（白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌）、3种曲霉菌（烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉）和新型隐球菌。其最低检测限为1 × 10⁴ cfu/mL，且常见细菌无扩增反应，重复性实验解链温度波动小于0.5 ℃。179例临床样本中，以培养法、镜检法、病理诊断等"金标准"方法诊断IFI阳性为112例，多重荧光PCR-熔解曲线法检测阳性为96例。多重荧光PCR-熔解曲线法同时检测假丝酵母菌、曲霉菌及新型隐球菌的敏感度为0.857，特异度为0.970，阳性预测值为0.980，阴性预测值为0.802，ROC曲线下面积为0.914，95%置信区间为0.868 ~ 0.959，P < 0.001。 结论本研究建立的多重荧光PCR-熔解曲线法可快速、准确、高通量同时检测假丝酵母菌、曲霉菌及新型隐球菌，对于IFI的早期诊断具有重要意义。     

多重荧光PCR-熔解曲线法检测福尔马林固定石蜡包埋肺组织样本中病原真菌的价值

目的比较多重荧光PCR-熔解曲线法与病理诊断法检测福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)肺组织样本中病原真菌的价值。方法选择2014—2019年本院病理科病原真菌阳性患者的42份肺组织样本(念珠菌8份、曲霉菌23份、隐球菌11份)作为阳性组,病原真菌阴性的肺组织样本50份作为阴性组,均进行多重荧光PCR-熔解曲线法检测,并应用配对χ2检验和Kappa值对两种方法的检测结果进行比较。结果阳性组42份样本多重荧光PCR-熔解曲线法检出23份阳性,并可分辨至种水平,其中念珠菌4份(白色念珠菌2份、热带念珠菌1份、克柔念珠菌1份)、曲霉菌13份(烟曲霉11份、黄曲霉2份)、新型隐球菌6份。阴性组50份样本多重荧光PCR-熔解曲线法检测均阴性。Kappa值0.568,以病理诊断法为"金标准",多重荧光PCR-熔解曲线法检测病原真菌的灵敏度为54.8%(23/42)、特异性为100.0%(50/50)。结论多重荧光PCR-熔解曲线法检测FFPE样本中病原真菌的灵敏度不高,但可以将病原真菌鉴定至种,是病理诊断法的补充。     

华法令应用初期对心脏瓣膜置换术患者血小板计数及国际标准化比值的变化

心脏瓣膜置换术后需终身服用抗凝剂华法令，以预防血栓栓塞性疾病的发生。华法令合适用量应当是患者PT值为正常对照的1．5～2．5倍，过量服用则会导致出血。临床上用国际标准化比值（INR）作为监测抗凝强度指标指导治疗，但单靠监测INR的抗凝治疗存在局限性。血小板直接参与止血和凝血的过程，并在血栓形成中起着重要作用。     

新生儿不明原因高胆红素血症与SLCO1B1基因多态性的相关分析

目的探讨SLCO1B1基因多态性与新生儿不明原因高胆红素血症发病风险的关系。方法收集金华地区新生儿不明原因高胆红素血症患儿66例为疾病组,同时选取健康新生儿42例作为对照组。提取外周血DNA,采用PCR和Sanger测序法对基因多态性的情况进行分析。观察基因变异频率及基因型分布、基因多态性与新生儿不明原因高胆红素血症的相关性及对患儿血清胆红素水平的影响。结果金华地区新生儿SLCO1B1基因c.388A>G、c.521T>C、c.571T>C和c.597C>T的变异率分别为93.5%、25.9%、37.0%和63.9%,这些位点在疾病组和对照组中分布差异无统计学意义(P>0.05)。在c.388A>G、c.571T>C和c.597C>T 3个位点的不同基因型中,疾病组患儿总胆红素、未结合胆红素、结合胆红素水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);c.521T>C位点纯合变异型血清总胆红素水平与杂合变异型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SLCO1B1基因的4个SNPs位点与金华地区新生儿不明原因高胆红素血症的发病风险没有显著相关性,但c.521T>C位点纯合变异型可能对血清总胆红素水平有一定的影响。     

肿瘤标志物检测鉴别良恶性胸腔积液价值评价

目的探讨肿瘤标志物检测鉴别良性胸腔积液(BPE)和恶性胸腔积液(MPE)的诊断价值。方法 MPE患者60例(恶性组),BPE患者60例(良性组),利用化学发光法测定两组胸腔积液肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)125、CA199和CA153,比较两组上述指标水平及阳性率。结果恶性组CEA、CA125、CA199和CA153水平明显高于良性组(均P<0.05),恶性组CEA、CA125、CA199和CA153阳性率均高于良性组(均P<0.05)。结论胸腔积液CEA、CA125、CA199和CA153水平检测对BPE和MPE的鉴别具有重要的诊断价值。     

急性心肌梗死标志物应用分析及新进展

急性心肌梗死(acute myocardial infaretion,AMI)一直是临床关注的重症疾患之一,它的死亡率很高,是威胁人类生命的主要疾病之一.根椐WHO诊断标准,典型病例不难诊断,但遇到一些不典型病例时,心肌损伤标志物的检测就显得尤为重要,在其早期诊断至关重要.血清生化标志物凭借其特异性及敏感性,在AMI的早期诊断中具有重要的地位,随着心脏介入技术和溶栓技术的应用,早期诊断AMI变得至关重要,而早期诊断的关键是心肌生化标志物的检测.在临床研究和应用发展的同时,除了肌红蛋白、肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白等已应用于临床的标志物外,出现了许多新的生化标志物,对AMI的诊断具有重要价值,现就国内外有关方面的实验研究报道作一综述.     

华法令应用初期对心脏瓣膜置换术患者血小板计数及国际标准化比值的变化

心脏瓣膜置换术后需终身服用抗凝剂华法令,以预防血栓栓塞性疾病的发生。华法令合适用量应当是患者PT值为正常对照的1.5~2.5倍,过量服用则会导致出血。临床上用国际标准化比值(INR)作为监测抗凝强度指标指导治疗,但单靠监测INR的抗凝治疗存在局限性[1]。血小板直接参与止血和凝血的过程,并在血栓形成中起着重要作用。笔者对33例心脏瓣膜置换术患者在华法令应用前后及不同时间段的INR、Plt变化作简要分析,并探讨它们之间的关系。1临床资料1·1一般资料本院2005年7月—2006年10月收治心脏瓣膜置换术患者33例,年龄35~64岁;男12例,女21例;…     

血流变学检验在心血管疾病诊断中的临床价值

目的 分析血流变学检验在心血管疾病诊断中的应用价值,探讨血流变学指标与心血管疾病发生与发展的相关性。 方法 选取金华市中心医院2019年6月—2020年6月收治的62例心血管疾病患者纳入研究组,同时选取同时期行常规体检的62例健康志愿者纳入对照组,2组均应用全自动血液流变分析仪进行全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、红细胞变形指数、红细胞压积、血沉、血浆纤维蛋白原等血流变学指标检验,比较2组受试者的检验结果,应用Pearson相关性分析法分析血流变学指标与心血管疾病的相关性。 结果 研究组治疗前的全血高切黏度、全血低切黏度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、红细胞变形指数、红细胞压积、血浆纤维蛋白原检验水平均高于对照组(均P<0.05),血沉检验水平低于对照组(P<0.05);研究组治疗前的血浆黏度与对照组比较无差异(P>0.05)。研究组治疗后的上述指标与对照组相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。研究组治疗后的全血高切黏度、全血低切黏度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、红细胞变形指数、红细胞压积、血浆纤维蛋白原检验水平均低于治疗前,血沉检验水平高于治疗前(均P<0.05);血浆黏度与治疗前比较无差异(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,心血管疾病与全血高切黏度、全血低切黏度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、红细胞变形指数、红细胞压积、血浆纤维蛋白均呈正相关,与血沉呈负相关,与血浆黏度无相关性。 结论 血流变学指标在心血管疾病中呈异常状态,血流变学检验可作为临床诊断心血管疾病的辅助参考依据,对提高诊断结果的准确率具有重要意义。      

浙江省金华地区人群PTPN22-1123GC多态性在类风湿关节炎易感性中的意义

目的：探讨浙江省金华地区类风湿关节炎(RA)群体PTPN22-1123GC多态性特点以及临床检测意义。方法：自浙江大学医学院附属金华医院2020年1—5月接诊的RA患者中选取50例作为病例组，同期健康体检人群中选取20例健康人员作为对照组，对两组对象行血样采集，并行基因多态性位点检测了解两组对象PTPN22-1123GC位点基因分布情况，并进行单因素与多因素分析。结果：病例组与对照组GC基因型频率分布存在统计学差异(P<0.05);对两组三种基因型进行双尾χ²检验，结果显示有统计学差异(P=0.036);其中杂合子GC型会导致患者RA发病风险增加1.966倍，携带C等位基因会导致RA的发病风险增加1.584倍。结论：PTPN22-1123的SNPs与RA易感染之间存在密切相关性，其中CG基因型是导致浙江省金华地区RA易感染的关键基因型，具有较高临床检测意义。