重组腺病毒载体介导HOSM 基因对胰腺癌细胞PC3体外增殖的抑制作用

目的构建了含人抑瘤素M（HOSM）基因的复制缺陷型重组腺病毒载体AD-HOSM,观察其对人胰腺癌细胞株PC3在体外生长抑制情况。方法通过同源重组方法构建含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD-HOSM,报告基因AD-GFP检测腺病毒的对胰腺癌细胞系的转染效率;人胰腺癌细胞株PC3转染含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD-HOSM后,用RT-PCR法检测外源HOSM基因在其中的表达;台盼兰染色、细胞计数法检测AD-HOSM对PC3的体外增殖抑制情况。结果成功构建了重组腺病毒载体AD-HOSM,AD-HOSM对胰腺癌细胞PC3有较高的转染效率,HOSM基因在转染细胞能有效的表达。体外试验示AD-HOSM明显抑制PC3的的生长。结论重组腺病毒介导HOSM表达能有效抑制PC3在体外的增殖,提示重组腺病毒介导的HOSM基因治疗可能成为胰腺癌治疗的候选方案。     

免疫检查点抑制剂治疗晚期肝细胞癌的进展

目的 总结免疫检查点抑制剂治疗晚期肝细胞癌的现状,并总结联合免疫治疗的新进展.方法 复习近年来关于免疫检查点抑制剂治疗晚期肝细胞癌的文献,并进行综述.结果 免疫检查点抑制剂干预是一种新型的有潜能的晚期肝细胞癌治疗方式,它可以延缓侵袭性肿瘤的进展并抑制肿瘤的复发和转移,免疫检查点抑制剂联合常规治疗可以提高晚期肝细胞癌的疗...     

重组腺病毒载体介导人抑瘤素M基因对胰腺癌细胞体外增殖的抑制作用

目的构建了含人抑瘤素M（HOSM）基因的复制缺陷型重组腺病毒载体AD—HOSM，观察其对人胰腺癌细胞株Capan－2在体外生长抑制情况，为胰腺癌的基因治疗提供参考。方法通过同源重组方法构建含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD—HOSM，报告基因AD—GFP检测腺病毒的对胰腺癌细胞系的转染效率；人胰腺癌细胞株Capan－2转染含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD—HOSM后，用RT—PCR法检测外源HOSM基因在其中的表达；苔盘兰染色、细胞计数法检测AD—HOSM对Capan－2的体外增殖抑制情况。结果成功构建了重组腺病毒载体AD—HOSM，AD—HOSM对胰腺癌细胞Capan－2有较高的转染效率，HOSM基因在转染细胞能有效的表达。休外试验示AD—HOSM明显抑制CAPAN－2的的生长。结论重组腺病毒介导HOSM表达能有效抑制Capan－2在体外的增殖，提示重组腺病毒介导的HOSM基因治疗可能成为胰腺癌治疗的侯选方案。     

重组腺病毒载体含人抑瘤素的扩增及纯化

目的：构建含人抑瘤素(HOSM)基因的重组腺病毒载体，观察其对肿瘤细胞生长的影响。方法：用脂质体介导质粒DNA同源重组方法构建HOSM基因的重组缺陷型腺病毒载体，用聚合酶链反应(PCR)法鉴定所构建的ad-HOSM载体，在人胚肾细胞(293细胞)中扩增病毒。CsCl梯度超速离心纯化病毒，噬斑法测定病毒的滴度。结果：获得了高纯度、高滴度的重组腺病毒载体。结论：细胞内质粒DNA同源重组法能有效构建重组腺病毒载体，293细胞能有效扩增病毒。CsCl梯度超速离心法能制备高纯度的病毒，为进一步研究重组腺病毒介导HOSM基因对肿瘤细胞的生物学活性的影响打下基础。     

重组腺病毒介导HOSM基因在胰腺癌细胞中的表达

目的 重组腺病毒介导HOSM基因转染胰腺癌细胞后，用RT-PCR方法检测外源性HOSM基因的表达情况。方法 构建了含人抑瘤素M(OSM，oncostatin M)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体ad-HSOM，以ad-HOSM转染胰腺癌细胞株后，提取细胞的总RNA，用RT-PCR法检测HOSM基因在胰腺癌中的表达。结果 HOSM基因在转染细胞中有效的表达。结论 RT-PCR法能有效的检测外源性HOSM基因在胰腺癌中的表达，为重组腺病毒介导HOSM基因用于胰腺癌治疗的实验研究奠定了基础。     

重组腺病毒载体介导HOSM基因对肝癌细胞体外增殖的抑制作用

目的:构建含人抑瘤素M(human oncostatin M,HOSM)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体AD-HOSM,观察其对人肝癌细胞株HepG2在体外生长抑制情况.方法:通过同源重组方法构建含HOSM基因的缺陷型重组腺病毒载体AD-HOSM,用报告基因AD-GFP检测腺病毒的对人肝癌细胞系的转染效率:人肝癌细胞株HepG2转染含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD-HOSM后,用RT-PCR法检测外源HOSM基因在其中的表达;台盼蓝染色、细胞计数法检测AD-HOSM对HepG2的体外增殖抑制情况.结果:成功构建了重组腺病毒载体AD-HOSM,AD-HOSM对肝癌细胞HepG2有较高的转染效率,并且转染效率与病毒的剂量呈正相关.AD-HOSM感染HepG2细胞48h,HOSM基因在转染细胞能有效的表达.体外试验示,AD-HOSM转染的细胞的增殖却受到明显的抑制.结论:重组腺病毒介导HOSM表达能有效抑制HepG2在体外的增殖,提示重组腺病毒介导的HOSM基因治疗可能成为肝癌治疗的候选方案.     

胰腺癌围手术期管理

胰腺癌是一种起病隐秘,早期就有淋巴神经转移,发展迅速的恶性肿瘤。发现时往往就已经到中晚期,具有较高的致死率和极差的预后。手术是胰腺癌患者获得长期生存和治愈可能的唯一方式。而手术能否顺利准确地进行依赖赖于肿瘤的早期诊断,准确分期,术后良好的护理和术后并发症的处理。本综述就胰腺癌围手术期管理及相关前沿研究提出讨论。     

基于TNF家族基因的肝癌分型及预后模型的建立

目的 为了能够识别获益于免疫治疗的肝癌患者及评估预后,亟需建立肝癌新分型与预后模型。方法 应用无监督聚类方法对TCGA-LIHC数据集中的肝癌样本进行分型,ssGSEA算法评估免疫细胞浸润能力,TIDE评分评估免疫治疗反应能力,应用COX与LASSO回归分析方法构建基于TCGA-LIHC数据集的风险评分模型,并在ICGC-LIRI-JP数据集中验证模型的准确性。结果 基于TNF家族基因的表达水平可以将肝癌患者分为TNF-A型与TNF-B型,分析发现TNF-A型预后好,免疫细胞浸润程度高,肿瘤突变负荷小,免疫逃逸能力弱以及对免疫治疗反应较好。利用两型的差异基因笔者构建了风险评分模型,其中模型的1年、3年和4年总生存期的曲线下面积(area under the curve, AUC)分别为0.758、0.789和0.768,验证集分别为0.674、0.713和0.710,证明预后模型具有较高的准确度,且高风险组患者预后差,具有较高的T分期及TNM分期。结论基于TNF家族基因建立的肝癌新分型用来评估患者对免疫治疗的反应,并构建风险评分模型以预测肝癌患者的预后。     

质粒DNA同源重组法构建腺病毒载体hosm

目的 构建含hosm基因的重组腺病毒载体,观察其对肿瘤细胞生长的影响。方法 用脂质体介导的粒DNA同源重组方法构建含人osm基因的重组缺陷型腺病毒载体,用PCR法鉴定所构建的ad—hosm载体。结果 成功构建了含hosm基因的重组腺病毒载体。结论 脂质体介导的质粒DNA同源重组法能有效构建重组腺病毒栽体;PCR法简化了阳性重组腺病毒的鉴定程序,为进一步研究重组腺病毒介导人osm基因对肿瘤细胞的生物学活性的影响提供了条件。     

重组腺病毒载体介导人OSM 基因对胰腺癌细胞增殖的抑制作用及对裸鼠致瘤性的影响

目的　构建了含人抑瘤素M (humanoncostatinM ,hosm)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体 ,观察其对胰腺癌细胞株BxPC3 在体外生长抑制情况及在裸鼠致瘤性改变的作用 ,为胰腺癌的基因治疗提供参考。方法　用含hosm基因的缺陷型腺病毒载体转染人胰腺癌细胞株 ,用RT PCR法检测外源hosm基因在其中的表达 ;苔盘蓝染色、细胞计数法检测ad hosm对BxPC3 的体外增殖抑制情况 ;裸鼠皮下接种转染ad hosm的BxPC3 ,观察其对肿瘤形成率的影响。结果　hosm基因在转染细胞能有效的表达。体外试验示ad hosm能明显抑制BxPC3 的生长 ,ad hosm能抑制BxPC3 在裸鼠中的成瘤作用。结论　重组腺病毒介导hosm基因表达能有效抑制BxPC3 在体外、体内的增殖 ,提示重组腺病毒介导的hosm基因治疗可能成为胰腺癌治疗的侯选方案。