膀胱癌组织Kringle5基因的克隆、表达、纯化及活性鉴定

Kringle5(K5)是纤溶酶原裂解片段,生物活性高于内皮抑素和血管抑素,其相对分子质量小、穿透力强,是更有研究前途的内源性血管生成抑制因子.本研究旨在对膀胱癌组织Kringle5基因的克隆、表达、纯化及活性鉴定.     

Kringle5基因的克隆、原核表达载体构建和蛋白表达

目的寻求一条高效且快速获得kingle5蛋白的途径．方法从人膀胱癌组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增出kringle5基因,构建出原核表达载体pGEX-5X-1／kringle5,运用工程菌表达蛋白．结果测序表明kringle5基因与GenBank上报道的基因序列相同,并成功表达出kringle5融合蛋白．结论成功构建了人原核表达载体（pGEX-5X-1／kringle5）,为获得抗肿瘤药物kringle5提供了一种切实可行的途径,为实体瘤的抗血管生成治疗研究奠定了初步基础．     

金匮肾气片联合坦索罗辛治疗膀胱过度活动症的疗效观察

目的观察金匮肾气片联合盐酸坦索罗辛治疗膀胱过度活动症的临床疗效。方法选取2016年7月—2017年6月在大连大学附属新华医院就诊的膀胱过度活动症患者106例,随机分为对照组和治疗组,每组各53例。对照组饭后口服盐酸坦索罗辛缓释胶囊,0.2 mg/次,1次/d;治疗组在对照组基础上口服金匮肾气片,4片/次,2次/d。两组患者均治疗4周。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者尿失禁生活质量评估量表(I-QOL)、膀胱过度活动症评分(OABSS)和排尿相关指标改善情况。结果治疗后,对照组临床总有效率为75.47%,显著低于治疗组的92.45%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组I-QOL均显著升高,OABSS显著降低,同组比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组患者I-QOL和OABSS水平明显优于对照组患者,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组24 h排尿次数、24 h夜尿次数和24 h急迫性尿失禁次数显著减少,最大尿流率(Q_(max))、平均尿流率(Q_(ave))和平均尿量(V_V)水平显著升高,同组比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组患者上述排尿指标改善程度明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论金匮肾气片联合盐酸坦索罗辛治疗膀胱过度活动症临床疗效确切,症状改善明显,具有一定的临床推广应用价值。     

抗焦虑药物、甲磺酸倍他司汀片结合前庭康复治疗对良性阵发性位置性眩晕患者的影响

目的：探讨抗焦虑药物、甲磺酸倍他司汀片联合前庭康复治疗良性阵发性位置眩晕(BPPV)患者的效果。方法：选取武警安徽省总队医院于2018年1月-2021年1月收治并经筛查后符合研究条件的BPPV患者92例为对象,将其按照随机分组方式,分为对照组、研究组,各46例。其中对照组采用前庭康复治疗,研究组在前庭康复治疗基础上,联合抗焦虑药物与甲磺酸倍他司汀片治疗。评估并比较两组治疗效果,同时于治疗前后检测患者脑部血流情况,并采用Berg平衡量表(BBS)、前庭症状指数(VSI)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评价治疗前后两组平衡、前庭症状及焦虑症状。结果：经4周治疗后,研究组治疗总有效率(89.13%)高于对照组(71.74%),差异有统计学意义(χ²=4.420,P=0.036);研究组大脑中动脉(MCA)、大脑前动脉(ACA)、大脑后动脉(PCA)、椎动脉(VA)与基底动脉(BA)血流水平高于对照组(t=2.154、2.120、2.063、2.078、2.250,P=0.032、0.032、0.034、0.034、0.031);研究组BBS评分高于对照组(t=5.455,...     

一起加油站漏油引起的死亡事故

目前,沿公路两旁加油站星罗棋布,一些加油站未经安全卫生有关部门审查许可就擅自使用,其中有相当一部分不符合劳动安全卫生标准,职工不懂得安全卫生知识,给安全卫生管理工作带来很大困难,使     

Kringle5基因的表达、纯化及其抗膀胱肿瘤作用的初步研究

目的获得高纯度并且有活性的K5蛋白.方法继构建了重组质粒pGEX-5X-1-K5的基础上,转化感受态细胞BL-21、DH-5α、Top10,并优化了表达条件,经过裂解、洗涤、溶解包涵体后,用带GST标签的谷胱甘肽琼脂糖4B亲和柱进行纯化,Bradford法测蛋白浓度,分别用ECV304细胞和裸鼠皮下移植瘤模型对蛋白进行了活性测定.结果获得了表达量最高的条件：BL21感受态细胞,诱导时间：6 h,纯化后的K5蛋白纯度达到95%以上,K5浓度为5μg/mL时抑制率最高.裸鼠模型上,K5组肿瘤的生长速度明显慢于PBS对照.结论含有GST的融合蛋白表达载体,表达量多、易于纯化、成本低、蛋白纯度高,并能有效的抑制ECV304细胞,抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,为K5的工业化大规模生产奠定了基础.     

人膀胱癌组织Kringle 5基因的克隆、优化表达、纯化及活性鉴定

目的 构建能够表达分泌性人纤溶酶原krinle 5(K5)的大肠杆菌工程菌,优化表达并鉴定其抗人血管内皮细胞(ECV)304的生物活性. 方法 从人膀胱癌组织中提取总RNA,RT-PCR扩增K5基因,构建原核表达载体pGEX-5X-1/K5,运用工程菌表达蛋白.带谷胱甘肽(GST)标签琼脂糖4B亲和柱层析、纯化蛋白,CellTiter 96 AQueous细胞增殖检测法(MTS)检测K5对ECV304增殖影响.结果 PCR扩增得到282 bp片段,并成功插入pGEX-5X-1质粒,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下工程菌表达了特异性融合蛋白,经凝血酶酶切后得到分子量约为12 kD的K5蛋白;K5蛋白能特异性抑制ECV304增殖,抑制率最高蛋白浓度为5 ng/L. 结论 含重组质粒pGEX-5X-1/K5大肠杆菌表达产物量多且易纯化,为包括肿瘤在内的病理性血管增生疾病抗血管生成药物开发做了积极的尝试.     

分组教学法在护理学基础教学中的优势

目的 探讨分组教学法在中职护理学基础教学中的应用效果.方法 将我校2009级英语护理专业的80名学生随机分为实验组和对照组,学号为单号的是实验组,采取分组教学法授课;学号为双号的是对照组,采用传统教学法授课.通过理论、技能考核和问卷调查的方式比较两组的教学效果.结果 采用分组教学法授课的实验组学生,其理论与技能考核的成绩均优于对照组,实验组学生对分组教学法评价较好.结论 分组教学法能够激发学生的学习兴趣,培养学生的自学能力、创新能力、管理能力和集体协作精神,提高其学习效率和学习成绩,使学生更符合未来的岗位需求.     

妊娠中期输尿管结石合并上尿路感染的治疗分析

目的探讨妊娠期中期输尿管结石合并上尿路感染的治疗方法与疗效。方法回顾性分析2010年1月~2016年12月间收治的13例妊娠中期输尿管结石合并上尿路感染患者的治疗方法。结果保守治疗成功5例,输尿管留置双J管引流6例,输尿管镜碎石术2例,上述孕妇均顺利度过围生期。结论输尿管留置双J管引流或联合输尿管镜碎石术是治疗妊娠中期输尿管结石合并上尿路感染的有效方法。     

机器人辅助腹腔镜手术在泌尿系统肿瘤治疗中的应用进展

机器人操作系统能将盆腔内精细的高难度操作变得相对简单,在尿流改道的操作中具有明显优势.机器人辅助腹腔镜下前列腺切除术,术中出血更少,术后在勃起功能和排尿功能恢复方面更有优势,正在取代传统开放手术和腹腔镜手术,成为治疗局限性前列腺癌的金标准.机器人辅助膀胱根治性切除术与标准腹腔镜手术相比,具有学习曲线更短,并发症发生率更低和胃肠功能恢复更快等优势.机器人手术相对于传统腹腔镜手术,在肾部分切除手术方面有明显优势,能轻松实现肾脏深层髓质和浅层皮质的双层关闭,缩短安全热缺血时间,能最大限度保护肾功能.此外,对于肾门部的肿瘤行保留肾单位的手术时更有优势,对于血管的暴露更加清晰,提高了手术的安全性,被认为是首选的微创保留肾单位的手术方式.机器人辅助腹腔镜肾肿瘤根治术主要应用于复杂肾根治术,如肾癌伴下腔静脉瘤栓的手术治疗.本文就机器人手术系统在泌尿系统肿瘤治疗中的现状作一综述.