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目的 探讨miR-145-5p对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法 80只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术+尾静脉注射agomir-NC组(sham+ago-NC)、假手术+尾静脉注射agomir-miR-145-5p组(sham+ago-miR)、脓毒症+尾静脉注射agomir-NC组(CLP+ago-NC)和脓毒症+尾静脉注射agomir-miR-145-5p组(CLP+ago-miR),每组20只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。绘制小鼠生存曲线，ELISA法检测血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平以及促炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达，HE染色观察心肌组织微观结构，超声仪检测心脏收缩功能(LVEF、LVFS),免疫荧光染色检测CD68、Ly6G、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达情况，碘化丙啶染色评估心肌细胞焦亡，qRT-PCR检测miR-145-5p表达，Western blot检测NLRP3、AS... 相似文献
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目的 探讨全球急性冠脉事件登记(GRACE)评分、应激高血糖和N末端脑钠肽前体(NT-pro-BNP)对急诊经皮冠脉介入(PCI)治疗的急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者发生主要心血管不良事件(MACEs)的预测价值,为STEMI患者临床诊疗中早期风险分层和预后判断寻找更好的方法,为患者制定最佳个体化治疗策略提... 相似文献
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目的 探讨构建与新生儿呼吸窘迫综合征相关的ABCA3 基因突变体c.875A>T(p.E292V)和c.2169G>A(p.M723I)及其绿色荧光表达载体的方法,并观察其在人肺腺癌(A549)细胞株中的表达。方法 应用重叠延伸PCR 法构建ABCA3 基因的两个突变体E292V 和M723I,运用限制性酶切连接等技术构建两个突变体的绿色荧光表达载体,使用脂质体Lipofectamine 2000 将构建的载体瞬时转染到A549 细胞株,使其在体外表达,在荧光显微镜下观察转染效率,利用激光共聚焦显微镜观察重组子的表达情况。结果 构建的两个突变体E292V 和M723I 经测序分别证实ABCA3 基因cDNA 第875 位碱基A 变为T 和第2169 位碱基G 变为A,重组子转染A549 细胞后,野生型和突变型基因的蛋白质都在细胞内成功表达。结论 成功构建了ABCA3 基因野生型及突变型的绿色荧光表达载体,并使其在A549 细胞表达,为后续实验提供了条件。 相似文献
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