NF-κB诱骗寡核苷酸对内毒素性肝损伤的保护作用和机制

目的探讨NF-κB诱骗寡脱氧核苷酸对大鼠内毒素性肝损伤的保护作用及其机制。方法60只SD大鼠随机分为对照组、内毒素(LPS)组、诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)处理组。取各组大鼠肝组织检测NF-κB蛋白结合活性(EMSA),观察组织病理学改变(光镜)及肝细胞凋亡(TUNEL)。取静脉血检测AST(自动生化仪)以及TNF-α,IL-6的表达水平(ELISA)。结果与对照组相比,内毒素组NF-κB活性明显升高,诱发大量肝细胞凋亡,肝脏损伤明显;同时血清AST,TNF-α及IL-6明显升高(P0.01)。与内毒素组相比,NF-κB诱骗寡核苷酸处理组NF-κB活性受抑制(P0.01)、肝脏组织病理学改变和肝细胞凋亡明显减轻,血清中TNF-α和AST表达水平降低(P0.01),但IL-6表达与内毒素组差异无统计学意义(P0.05)。结论NF-κB诱骗策略能高效抑制NF-κB的活性,抑制其下游有害细胞因子的产生,从而减轻内毒素性肝损伤。     

大鼠原位肝移植制作过程中常见失败原因分析及处理策略

目的：分析大鼠位肝移植制作过程中常见失败原因及总结相应的处理策略。
方法：历时10个月,采用改良Kamada二袖套法制作大鼠原位肝移植模型150例。将每完成50例作为1个实验阶段,分早、中、后期3个阶段对失败原因进行分析,总结经验。
结果：大鼠原位肝移植常见失败原因在早期阶段主要以气胸（5.8%）,术中出血（10.6%）,无肝期过长（50.4%）为主;中、后期主要以肝上下腔静脉吻合失败（21.0%）,无肝期过长（20.6%）,门静脉及肝下下腔静脉袖套吻合失败（17.6%）,胆管重建失败（5.6%）为主。
结论：导致大鼠原位肝移植模型制作失败的原因较多,无肝期是影响成功与否的关键,及时地对失败原因进行分析总结并寻找合理的解决办法,有助于初学者熟练地掌握该技术。     

P-gp、MRP1、LRP和GST-π在卵黄囊瘤不同组织结构中的表达及临床意义

目的　探讨四种耐药基因蛋白P gp、MRP1、LRP和GST π在卵黄囊瘤组织的表达与卵黄囊瘤临床病理学特征的关系。方法　采用免疫组化SP法检测 32例卵黄囊瘤组织不同结构的P gp、MRP1、LRP和GST π的表达情况。 结果　① 32例卵黄囊瘤均可见疏松网状结构及嗜酸性透明小体 (10 0 % ) ,S D小体 2 6例 (2 6 /32 ,81.3% ) ,腺体、腺样结构 2 2例 (6 8.8% ,2 6 /32 ) ,乳头状结构 13例 (4 0 .6 % ,13/32 ) ,富于细胞的实性结构 15例 (4 6 .9% ,15 /32 ) ;②P gp、MRP1、LRP和GST π在不同的结构中表达不同 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论　P gp、MRP1、LRP和GST π在卵黄囊瘤组织不同结构表达的差异 ,有助于临床的个体化治疗和化疗效果的预测 ,有助于临床个体化疗方案的制定和预后。     

巧用乳胶手套接烟卷引流对预防切口感染和节约经济成本的作用分析

目的 阐明乳胶手套接烟卷引流条对预防切口感染的作用,同时也是有效节约经济成本的小方法 .方法 随机选取腹腔化脓性感染的患者121例,分为乳胶手套组(64例)和普通敷料组(57例),对比研究2组患者的切口感染率和经济成本.结果 乳胶手套组切口感染率为10.94%(7/64),普通敷料组切口感染率为31.58%(18,57),乳胶手套组每位患者平均比普通敷料组节约敷料成本约15.70元.换药次数少5.3次.结论 乳胶手套接烟卷引流条是一项经济而且减少切口感染机会的临床小改进,值得推广应用.     

In vitro lipofectamine mediated NF-κB decoy oligodeoxynucleotides transfection of Kupffer cells

Objective To study the transfection effects of nuclear factor-KappaB(NF-κB)decoy oligodeoxynucleotides(ODN) to Kupffer cells (KCs) mediated by lipofectamine,and investigate it's suppression effects on KCs activation. Methods Twenty-four Wistar rats were divided into three groups (n=8).(1)Control group,in which the normal KCs were isolated.(2)LPS group,in which 1 ms/L LPs was added to the culture system.(3)NF-κB decoy ODN group,in which KCs were transduced with NF-κB decoy ODN (4μg×105KCs)prior to LPS stimulation.The transfection efficiency Was assayed,and the phagocytosis function,NF-κB(P65) translocation,CD40 mRNA expression of KCs were also detected respectively. Results Kupffer cells were obviously activated after LPS stimulation.the phagocytosis function was reinforced.the activity of NF-κB transloeated from cytoplasm into nucleus was obviosly increaced.The co-stimulatory molecules expression(CD40 mRNA)significantly increased compared with control group(t=4.01,P<0.01).NF-κB decoy oligodeoxynucleotides can efficiently transfected into KCs mediated by lipofectamine,which can obviously suppress KCs activation,and downregulate the expression of downstream gene(compared with LPS group,t=4.89,P<0.01). Condusion NF-κB decoy ODN can efficiently transfect into KCs and inhibit it's activation.     

三种不同种属大鼠原位肝移植模型建立的外科技术

目的探讨建立不同种属大鼠原位肝移植模型的外科技术。方法通过改良的Kamada"二袖套法"分别对Wistar、SD、Buffalo三种不同种属大鼠实施了同系原位肝移植手术,并观察大鼠术后的存活率。结果总计实施了360例大鼠原位肝移植手术,手术成功率是88·3%,其中104例Wistar大鼠同系移植1周存活率为91·3%,1个月存活率为83·7%,127例SD大鼠同系移植1周存活率为90·6%,1个月存活率为82·7%,129例Buffalo大鼠同系移植1周存活率为83·7%,1个月存活率为72·9%。结论纯系大鼠(Buffalo)的肝脏解剖结构变异较大,纯系大鼠与杂种大鼠对肝移植手术耐受有较大差异,但娴熟的显微外科技术和耐心细致的手术操作可以克服,这是大鼠原位肝移植手术成败的关键。     

年轻直肠癌5年死亡风险预测模型——Nomogram

目的 基于大样本数据,研究年轻直肠癌病人(20～49岁)5年死亡风险因素及5年死亡预测模型.方法 从美国国立癌症研究所的SEER临床数据库中筛选出6817例年轻直肠癌病人,运用单因素与多因素回归分析筛选相关风险因素,构建5年死亡风险Nomogram预测模型并检验模型的准确性.结果 单因素及多因素回归分析后显示,性别、婚...     

CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞在大鼠肝移植天然免疫耐受模型中的作用

目的 通过采用流式细胞技术对比分析研究,大鼠肝移植免疫耐受模型中CD4+CD25+Foxp3+T+reg细胞亚群的分布变化来研究揭示CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群在移植免疫耐受过程中发挥的重要作用.方法 通过改良的Kamada"二袖套法"建立两种不同种属大鼠的免疫耐受和急性免疫排斥模型,再通过流式细胞技术检测两个模型大鼠CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群分布有无区别.主要观察指标:两组肝移植大鼠的存活率比较,应用常规HE染色法观察移植肝组织病理学变化,检测CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群在两组大鼠,肝脏、外周血、胸腺和脾脏总单核细胞数中所占的百分比.RT-PCR检测移植肝脏Foxp3 mRNA的表达水平.结果 耐受组大鼠可以不服用任何免疫抑制药物而长期存活(>2个月),且排斥组大鼠最多只能存活7～10d,免疫耐受组在肝脏、外周血、脾脏和胸腺单核细胞中CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群所占的比例明显高于排斥组(P<0.05),且在移植肝脏中,免疫耐受组的Foxp3 mRNA表达含量明显高于排斥组.结论 在LEW→DA的大鼠免疫耐受模型中,CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群细胞数量和比例明显升高,提示CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群在移植免疫耐受过程中发挥着重要作用,从而为我们临床诱导免疫耐受提供一条新的思路.我们可以通过体外扩增抗原特异性的天然存在的调节性T细胞来抑制效应T细胞的激活和扩增,从而帮助诱导移植免疫耐受和抑制移植物排斥.     

小分子单链RNA与胃癌的研究进展

肿瘤的预防、早期诊断和治疗一直是人类难以攻克的难题。胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,据估计每年有超过90万的新确诊病例和大约70万的胃癌患者死亡,居肿瘤死亡病因的第二位[1],死亡的肿瘤患者中有90%已发生了转移[2]。且我国多数胃癌患者就诊时已到中晚期,即使给予理论上标准的根治性手术和放、化疗,许多患者也会发生复发及转移,并死于胃癌。究其原因无非包括早期诊断率低、缺乏既特异又敏感的肿瘤早期诊断手段、手术和放、化疗的有限性等。近