Box-Behnken设计-响应面法优化经典名方四妙勇安汤煎煮工艺研究

目的 遵循中医药传承创新发展的基本准则——“遵古原则”,考察经典名方四妙勇安汤（Simiao Yong’an Decoction,SYD）的煎煮工艺,确保原汤剂原汁原味的传统功效,并进行质量综合评价,为经典名方SYD进一步制剂开发提供参考。方法 采用Box-Behnken设计-响应面法对加水量、浸泡时间、煎煮时间进行考察,通过指纹图谱结合多元统计分析进行定性半定量评价,通过含量测定分析和干膏率进行定量评价,综合以上评价方法优选煎煮工艺并验证。结果 通过Box-Behnken设计-响应面法制备17批煎煮样品,建立了17批样品HPLC指纹图谱,标定了14个共有峰,利用多元统计分析对指纹图谱共有峰数据进行主成分分析（principal component analysis,PCA）与正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）并计算得分,结果显示9号工艺为最佳煎煮工艺,即煎煮2次,第1次加16倍量水,浸泡30 min,煎煮30 min;第2次加16倍量水,煎煮30 min。同时采用H...     

美洲大蠊的有效成分及相关药理学研究进展

美洲大蠊是传统动物类中药“蜚蠊”的重要基源药材之一,传统功效主要包括通利血脉、敛疮生肌、利水消肿、健脾消疳等。由于其疗效确切,以其为主要原料的中成药在临床上广泛使用,尤其在各种创面的修复上,疗效显著。该药物目前尚未被《中华人民共和国药典》收录,地方标准也仅是以总氨基酸中的丙氨酸含量为质控标准,具有生理活性的小分子肽类、核苷、蛋白质等物质均没有得到相应的定性或定量控制。近年来从美洲大蠊分离出的多肽类单体如抗菌肽、神经肽、利尿肽,具有抗菌、抗肿瘤、肌神经营养等强大的药理活性;二氢异香豆素类化合物还具有刺激人真皮成纤维细胞产生胶原蛋白的作用。基于此,本文使用Pubmed,CNKI,万方数据库检索美洲大蠊1984―2019年相关研究性文献,从化学成分-药理作用-临床应用3个方面对美洲大蠊目前的研究进行系统分析阐释,为该药物的进一步开发及以其为主要原料药的中成药制定更具专属性、稳定性的质控标准提供参考。     

康复新液缓解乙酸诱导大鼠急性溃疡性结肠炎及机制研究

目的 研究康复新液对乙酸诱导大鼠急性溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）细胞因子的影响,并初步探讨其作用机制。方法 采用乙酸灌肠建立急性UC大鼠模型,除正常对照组及模型对照组外,其余各组分别灌肠给予结肠宁、康复新液2.50,1.25,0.625 g·kg^-1,测定疾病活动指数（disease activity index,DAI）、结肠黏膜损伤指数（colon mucosa damage index,CMDI）及病理组织学评分（histopathological score,HS）,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中白介素-6（interleukin-6,IL-6）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,iNOS）以及结肠组织中表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、iNOS的含量。结果 与模型对照组相比,结肠宁及康复新液高剂量能显著降低UC大鼠IL-6、CRP、iNOS、COX-2、MPO表达,升高EGF的表达水平（P<0.01）,改善组织病变情况。结论 康复新液对乙酸诱导的UC有治疗作用,作用机制可能与下调大鼠体内炎症因子的表达量,上调EGF的表达量有关。     

美洲大蠊的含氮成分及其促创面愈合相关活性研究

目的:探索美洲大蠊促创面愈合相关活性物质。方法:采用多种色谱法分离纯化其非肽类小分子化合物,并借助谱学法鉴定其化学结构。结果:从中分离得到16个化合物,分别为2-(1,2,3-三羟基丙基)吡嗪(1)、2-甲基-6-(2,3,4-三羟基丁基)吡嗪(2)、3-甲基-6-(2,3,4-三羟基丁基)吡嗪(3)、3-羟基吡啶(4)、1-(2-羟乙基)-5-羟甲基-1H-吡咯-2-醛(5)、N-(5-乙酰吡咯-3-基)乙酰胺(6)、8-羟基-2,3-二氢-4(1H)-喹诺酮(7)、戊内酰胺(8)、N-乙酰多巴胺(9)、aspongopusin(10)、deoxyhyrtiosine A(11)、光色素(12)、6-羟甲基-3-羟基吡啶(13)、3,4-二羟基苯基甘油(14)、2-异戊基苯酚(15)和5-羟甲基呋喃-2-醛(16)。结论:化合物1、3、5和6为新的天然产物,化合物2、4、7、10~16为首次从美洲大蠊中分离得到;生物活性研究表明化合物12~14能促进人皮肤成纤维细胞迁移,尤以化合物13作用最为显著,而化合物3可促进人脐静脉内皮细胞血管生成。     

美洲大蠊提取物对大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化诱导作用

目的 测定4种美洲大蠊提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)的成骨分化诱导作用。方法 用4种提取物分别对bMSCs进行诱导培养。14 d后,用qPCR测定I型胶原α1和碱性磷酸酶的基因转录水平,比色法测定碱性磷酸酶的活性,免疫细胞化学法检测骨钙素、骨桥蛋白的水平。21 d后,用茜素红染色观察钙化结节的形成情况。结果 与对照组比较,4种美洲大蠊提取物各处理组检测出的成骨分化指标均有不同程度升高,某些浓度下差异显著。其中,XD02的诱导效果最好,且细胞毒性最小。结论 4种美洲大蠊提取物均具诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的作用。美洲大蠊提取物有望成为干预骨质疏松的营养添加剂或药物。     

康复新液促进小鼠压疮创面愈合机制的研究

目的 探讨康复新液对小鼠压疮创面促进愈合的作用及机制.方法 根据缺血-再灌注损伤机制,通过体外磁片加压法制备小鼠早期压疮模型,观察康复新液对小鼠压疮愈合的影响和组织病理学改变,通过免疫组织化学法从碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子(TGF-β)、表皮细胞生长因子(EGF)的蛋白表达方面研究康复新液的作用机理.结果 康复新液对小鼠压疮具有一定的促愈作用,可促进肉芽组织生长、血管新生、坏死组织、炎性物质的清除,较高剂量的康复新液可上调bFGF、TGF-β、EGF的蛋白表达,较低剂量的康复新液亦可促进bFGF的蛋白表达.结论 康复新液对模型小鼠早期压疮创面促愈和修复的作用机制可能与促进bFGF蛋白的表达相关,对TGF-β及EGF蛋白表达的上调可能也发挥了协同作用.     

康复馨牙膏主要药效学研究

目的:研究康复馨牙膏的抗炎、镇痛、止血、促进溃疡愈合等主要药效。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足肿胀两种动物模型,考察康复馨牙膏的抗炎作用;采用醋酸致小鼠扭体反应模型考察其镇痛的效果;采用对小鼠手术致肝脏创面出血的模型,考察其止血的效果;采用苯酚致大鼠口腔黏膜溃疡的模型,考察不同浓度的康复馨牙膏促进溃疡愈合的作用。结果:康复馨牙膏可抑制小鼠耳廓肿、大鼠足肿胀,有减少醋酸引起的小鼠扭体次数的趋势,缩短小鼠手术致肝脏创面出血的时间,有促进大鼠实验性口腔溃疡愈合的作用。结论:初步证明康复馨牙膏具有抗炎、消肿、止血和促进溃疡愈合的作用。     

基于响应面法优选美洲大蠊口腔原位温敏凝胶的制备研究

目的制备美洲大蠊Periplaneta americana口腔原位温敏凝胶。方法采用自由基聚合法首次以N-异丙基丙烯酰胺(NNIPAM)和甲基丙烯酸羟丙酯(HPMA)合成聚(N-异丙基丙烯酰胺-甲基丙烯酸羟丙酯)[P(NNIPAM-HPMA)]作为温敏材料;通过冷溶法制备美洲大蠊口腔原位温敏凝胶,采用Box-Behnken设计响应面法,以溶蚀时间、胶凝时间为评价指标,在固定美洲大蠊提取物用量基础上,对羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)、P(NNIPAM-HPMA)的用量进行优选。结果通过原位聚合法合成了P(NNIPAM-HPMA)温敏材料;并用响应面法优选了可用于口腔的美洲大蠊原位温敏凝胶的处方,优选的处方为美洲大蠊提取物10%、HPMC 3.0%、PVP K30 9.5%、P(NNIPAM-HPMA) 10.0%,其溶蚀时间为2 h,胶凝时间8～9 s。结论优选得到美洲大蠊口腔原位温敏凝胶,为美洲大蠊提取物的口腔原位局部的临床应用奠定了科学依据。     

美洲大蠊温敏凝胶的制备及其促糖尿病大鼠创面修复作用考察

目的:制备美洲大蠊温敏凝胶并考察其促糖尿病大鼠创面修复作用。方法:以N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)与丙烯酸(AAc)为单体,在水相中通过自由基聚合法制得具有温度响应的共聚物P(NIPAM-co-AAc),然后将其接枝透明质酸(HA)以合成P(NIPAM-co-AAc)-g-HA温敏材料,采用核磁共振氢谱(1H-NMR)和紫外分光光度法(UV)对该材料的化学组成、低临界相转变温度(LCST)进行表征;采用透析法制备美洲大蠊温敏凝胶,利用扫描电子显微镜、旋转流变仪和热重分析仪表征其断面结构、流变学性质和热稳定性;采用差示扫描量热法,X-射线衍射法和傅里叶红外光谱法共同鉴定P(NIPAM-coAAc)-g-HA温敏材料对美洲大蠊提取物的包合作用,并考察美洲大蠊温敏凝胶促糖尿病大鼠创面修复的作用,采用ImagePro Plus 6. 0软件计算创面愈合率,运用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察各组大鼠创面组织病理学变化。结果:成功合成了P(NIPAM-co-AAc)-g-HA温敏材料,其LCST处于29～31℃,具有密集、均匀的多孔结构,且能将美洲大蠊提取物均匀包合。药效学结果表明,美洲大蠊温敏凝胶组促创面愈合效果最佳,其炎细胞浸润程度明显降低,胶原蛋白、成纤维细胞排列整齐、致密,新生血管密度较模型组显著增加。结论:美洲大蠊温敏凝胶可有效促进糖尿病大鼠创面愈合,可克服美洲大蠊市面液体制剂用于皮肤创面治疗的不足,可为美洲大蠊提取物促糖尿病患者创面愈合制剂的开发提供参考。