基于网络药理学探讨麻杏苡甘汤加味抗新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的:探讨麻杏苡甘汤加味治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的分子靶标及可能的机制.方法:从TCMSP以及BATMAN-TCM数据库中按照一定规定方法挑选出麻杏苡甘汤加味的活性成分及主要分子靶标.从OMIM及GeneCards中获得COVID-19的靶点.利用Bioinformatics&Evolutionary Genomics平台获得麻杏苡甘汤加味-COVID-19的共同靶点,然后将共同目标靶点导入STRING数据库,获得蛋白质网络模型,构建"有效成分-靶标"网络,并对共同目标靶点进行GO富集分析和KEGG富集分析.结果:麻杏苡甘汤加味中有118个活性成分可能通过46个靶点发挥抗COVID-19作用,GO富集分析及KEGG富集分析显示麻杏苡甘汤加味在治疗COVID-19的过程中,主要是通过影响脂多糖、细菌源分子、金属离子作用于氧化应激、凋亡信号通路等生物过程.方中的有效活性物质主要通过AGE-RAGE、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)-17等信号通路,影响细胞因子与配体的有效结合、磷酸酶的生成、血红素集合等有关.结论:麻杏苡甘汤加味中有118种成分具有抗COVID-19的作用,这些分子可能的作用机制为影响血管通透性及凝血组织因子基因的表达、抗病毒、抗炎,从而缓解新冠病毒所致的肺损伤以及凝血功能障碍、微小血栓形成等.     

基于网络药理学与分子对接技术探讨固脾消积饮对肝癌HepG2.2.15细胞焦亡的影响

目的 以半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）介导的细胞焦亡为基础，采用网络药理学及分子对接技术筛选中药复方固脾消积饮中抗肿瘤的活性成分，通过体外实验探讨该方干预肝癌HepG2.2.15细胞焦亡的分子机制。方法 利用中药系统药理学分析平台（TCMSP）筛选中药复方固脾消积饮的化合物及靶点，并获取对应的基因Symbol；从GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传（OMIM）数据库、PharmGKB数据库、TTD数据库搜集Caspase-1的靶点，运用Cytoscape构建化合物-基因靶点调控网络；采用STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络分析，采用基因本体（GO）功能富集和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析预测该方有效成分对Caspase-1的作用机制，应用AutoDock Vina进行分子对接验证。制备固脾消积饮含药血浆，体外培养肝癌HepG2.2.15细胞；将HepG2.2.15细胞分为空白血浆组、VX-765组、VX-765+含药血浆组、含药血浆组，使用15%含药血浆干预48 h后，免疫荧光染色法检测细胞膜表面GSDMD-N的表达及分布情况，检测HepG2.2.15细胞上清乳酸脱氢酶（LDH）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）的释放情况，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中特征蛋白Caspase-1、消皮素D-N端（GSDMD-N）的表达水平。结果 网络药理学筛选得到丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）、丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）、蛋白激酶B1（Akt1）、丝裂原活化蛋白激酶8（MAPK8）、V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物（JUN）、TP53为主要作用靶点，化合物7-hydroxy-5，8-dimethoxy-2-phenyl-chromone、黄芩素、鼠李素、荠苎黄酮、异鼠李黄素、7-O-methylisomucronulatol、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮、木犀草素、槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、黄芩苷为主要活性成分，GO富集分析涉及氧化应激反应、对金属离子的反应、与泛素-类蛋白连接酶结合、磷酸酶结合等多个生物过程，KEGG通路富集分析涉及MAPK、核转录因子（NF）-κB、p53、低氧诱导因子-1（HIF-1）等信号通路，分子对接表明靶点与成分具有较好结合性。体外实验表明，与空白血浆组相比，VX-765组的GSDMD-N荧光信号减少减弱，LDH、IL-1β、IL-18的释放量均减少，Caspase-1、GSDMD-N的表达显著下调（P<0.01）；固脾消积饮含药血浆组的GSDMD-N荧光信号增加增强，LDH、IL-1β、IL-18的释放量显著增加，Caspase-1、GSDMD-N的表达显著增高（P<0.01）。结论 固脾消积饮通过多靶点多通路调控Caspase-1以诱导肝癌HepG2.2.15细胞发生焦亡。     

曾普华教授从"肺脾同病"救治重型新型冠状病毒肺炎的经验

新型冠状病毒肺炎(以下简称新冠肺炎)归属于中医学"疫病"范畴。曾普华教授认为重型新冠肺炎的主要病机为疫毒闭肺、湿困中焦、痰湿内蕴,肺脾同病,宜从肺脾论治,治以宣肺、祛湿、排毒、健脾、益气。临床治疗期予麻杏苡甘汤、射干麻黄汤、达原饮合四君子汤加减,以宣肺排毒、健脾祛湿、泻肺平喘、止咳化痰、开达膜原;恢复期予六君子汤合沙参麦冬汤加减,以补肺健脾、益气养阴。提高了重型新冠肺炎患者救治成功率。     

瘾停胶囊安神镇痛作用的实验研究

目的:观察瘾停胶囊的安神镇痛作用。方法:利用戊巴比妥钠催眠小鼠,观察药物是否延长其睡眠时间;利用醋酸、高热导致小鼠疼痛,观察药物是否有抑制疼痛的作用。结果:瘾停胶囊能延长戊巴比妥钠催眠小鼠的睡眠时间,减少由醋酸引起的小鼠扭体反应次数,提高小鼠的耐热能力。结论:瘾停胶囊具有较好的安神镇痛作用。     

184例新型冠状病毒肺炎患者药证规律分析

目的：分析新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的药证规律,为COVID-19的中医论治提供参考。方法：以湖北黄冈大别山医院184例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)确诊患者为研究对象,收集其中医证候、处方用药,运用SPSS 21.0统计软件进行频次统计、聚类分析,运用IBM SPSS Modeler 18对药物、症状进行关联规则分析。结果：共纳入265个处方,涉及中药129味。药物主要功效依次为化湿、健脾、化痰、清热解毒、止咳平喘等;主要归肺、脾、胃经等;常见的药物-药物之间的关联规则分析表明,黄芪-党参等为常用药对,鸡内金+黄芪→党参等为常用三味药物组合,薏苡仁+鸡内金+黄芪→党参等为常用四味药物组合;常见的药物-症状组合规律为：益气-苔腻、健脾-苔腻、化湿-苔腻等。结论：COVID-19患者多肺脾同病,主要病机为疫毒闭肺、湿困中焦、痰湿内蕴,宜从肺脾论治,以化湿、健脾、宣肺平喘、清热等为基本治法。     

从肝脾肾相关探讨原发性肝癌之癌毒传变

肝脾肾三脏紧密相关,在癌毒传变过程中起到关键作用。肝癌早期,癌毒形成,毒瘀互结,肝郁脾虚;肝癌中期,瘀毒胶结,致肝脾肾失调;肝癌晚期,癌毒弥漫,脾气败坏,肝肾亏虚,五脏受累,脏腑功能紊乱,预后极差。从肝脾肾相关探讨原发性肝癌发生发展中癌毒传变理论,并结合中医药对原发性肝癌的防治经验,立足于癌毒致虚的核心病机,探寻阻断与延缓肝癌癌毒传变的方法。     

基于网络药理学和生物信息学探讨并验证槲皮素治疗肝癌的靶点和机制

目的 采用网络药理学方法分析槲皮素治疗肝癌的相关分子生物学机制。方法 TCMSP数据库和Pubchem数据库筛选出槲皮素作用靶点,GeneCards、OMIM和TTD数据库筛选出肝癌疾病作用靶点。利用Ri386 4.0.5软件、STRING数据库和Cytoscape 3.6.2进行蛋白互作分析,利用R语言程序、GlueGO和DAVID 6.8进行GO和KEGG信号通路富集分析,利用iGEMDOCK软件和Systemsdock数据库进行分子对接来预测槲皮素对肝癌的结合作用。采用CCK8检测槲皮素对HepG2、Hep3B、Huh-7三种肝癌细胞增殖影响,ELISA法检测槲皮素干预HepG2细胞后肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β水平,Western blot和高内涵细胞成像分析系统分别检测槲皮素干预HepG2细胞前后醛糖还原酶(aldoketo reductase family 1 member B1,AKR1B1)的表达。结果 筛选出槲皮素的自身靶点299个,筛选出槲皮素作用于肝癌的靶点70个...