2型糖尿病患者外周血管家基因表达水平比较

目的 观察管家基因β-肌动蛋白(β-actin)、信号识别颗粒14(SRP14)和18S-rRNA在2型糖尿病(T2DM)患者和健康对照人群外周血中的表达差异.方法 提取外周血白细胞RNA,经逆转录和聚合酶链反应,应用荧光标记技术及GenomeLab GeXP基因表达分析系统检测3个管家基因的表达水平.结果 3个管家基因在T2DM组和健康对照组中SRP14表达的差异最小,β-actin次之,18S-rRNA的表达差异较大.结论 管家基因SRP14和β-actin可作为检测T2DM相关基因表达水平的内部参考基因.     

冠心病患者L-选择素基因多态性分析

目的观察中国汉族人群L-选择素（L-selectin,SELL）基因4个单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism,SNP）与冠心病（coronaryarterydisease,CAD）的相关性。方法应用荧光标记单碱基延伸及寡核苷酸微阵列芯片杂交技术检测SELL基因rs964555,rs2205848,rs4987318和rs2298900的基因型。结果对照组和CAD组间4个SNP的基因型频率和等位基因频率无统计学差异（P〉0．05）,由rs964555,rs2205848和rs2298900构成的单倍型以CAT型为主,各单倍型频率在两组间无统计学差异（P〉0．05）。结论本研究中SELL基因的4个SNP与CAD的易感性无关。     

2型糖尿病患者rs4987318基因多态性和生化指标分析

目的观察L-选择素（L-sellectin,SELL）基因rs4987318单核苷酸多态性（single nucleotide polymor-phism,SNP）与2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）的相关性和生化指标的变化。方法应用荧光标记单碱基延伸及寡核苷酸微阵列芯片杂交技术检测SELL基因rs4987318多态性;采用全自动生化分析仪检测血脂及C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）水平。结果 T2DM组CC基因型频率明显高于健康对照组（P〈0.05）。T2DM组的甘油三酯（triglyceride,TG）、载脂蛋白B（apolipoprotein B,Apo B）和CRP水平显著高于对照组（P〈0.05）,高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）和载脂蛋白A1（apolipoprotein A1,Apo A1）水平显著低于对照组（P〈0.05）。T2DM组TG的AA、CA、CC型,Apo B的CC型和CRP的CA、CC型的水平显著高于对照组的相同基因型（P〈0.05）;HDL-C的AA、CA、CC型和Apo A1的AA、CA型水平显著低于对照组的相同基因型（P〈0.05）。结论 SELL基因rs4987318多态性可能与T2DM的易患性、患者血脂代谢紊乱和血管炎症的发生有关。     

表达丙型肝炎病毒核心蛋白的人肝癌稳定转染细胞株的建立与鉴定

目的建立能表达丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV core)的人肝癌细胞SMMC-7721的稳定转染细胞株。方法构建含目的基因HCV core的重组质粒,转染HEK293T细胞,包装获得含ZsGreen和HCV core基因的慢病毒后,感染SMMC-7721人肝癌细胞,采用实时荧光定量PCR检测HCV core mRNA表达,采用免疫荧光细胞化学染色和Western blot法检测HCV core蛋白表达,筛选稳定表达HCV core的细胞株。结果质粒酶切和序列测定证实重组载体构建正确;慢病毒包装48 h后可见清晰ZsGreen表达,感染SMMC-7721细胞后筛选获得稳定转染的细胞株,实时荧光定量PCR检测到HCV core mRNA,免疫荧光细胞化学染色和Western blot法均检测出HCV core蛋白表达。结论成功构建了表达HCV core蛋白的SMMC-7721人肝癌细胞的稳定转染细胞株。     

中国汉族人群亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的观察中国汉族人群亚甲基四氢叶酸还原酶基因的单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性。方法提取受检者外周血有核细胞DNA,应用荧光标记单碱基延伸分型技术及寡核苷酸微阵列芯片杂交技术检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因的3个标签单核苷酸多态性rs6541003,rs1801133和rs9651118。结果2型糖尿病组rs6541003的AG基因型频率（0．202VS0．309）和G等住基因频率（0．135VS0．211）明显低于健康对照组（P〈0．05）。两组rs1801133和rs9651118的基因型频率及等位基因频率差异无统计学意义（P〉0．05）。由3个标签单核苷酸多态性构建的单倍型频率在两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论中国汉族人群亚甲基四氢叶酸还原酶基因rs6541003多态性与2型糖尿病具有相关性。     

两种匀相法检测低密度脂蛋白胆固醇的结果比较

目的:比较两种匀相法检测低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的结果并分析甘油三酯(TC)的干扰作用.方法:分别用A、B两种匀相法试剂对40例患者的血清LDL-C以及不同TG水平下LDL-C的回收率和线性进行分析.结果:TG低于1.7 mmoL/L时A试剂LDL-C结果(2.47±0.57)mmol/L与B试剂结果(2.45±0.62)mmoL/L无统计学差异(P<0.05);TG高于1.7 mmoL/L时A试剂LDL-C结果[2.66(1.82～3.42)mmoL/L]显著高于B试剂结果(1.97±0.69)mmol/L,JP<0.01,两者差值与TG浓度显著相关(r=0.937,P<0.01);两种试荆LDL-C回收率和线性无显著差异.结论:TG浓度对其中至少一种试剂LDL-C检测有严重干扰作用,而且这种干扰作用不能通过室内质控或稀释样品的方法得到纠正.     

中国汉族人群2型糖尿病患者亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与同型半胱氨酸水平的研究

目的 观察2型糖尿病患者亚甲基四氢叶酸还原酶基因单核苷酸多态性不同基因型间同型半胱氨酸水平的变化.方法 应用荧光标记单碱基延伸分型技术及寡核苷酸微阵列芯片杂交技术检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因的3个标签单核苷酸多态性;应用酶循环法检测血清同型半胱氨酸水平.结果 2型糖尿病组同型半胱氨酸水平（13.37&#177;9.37 μmol/L）明显高于健康对照组（11.56&#177;4.01 μmol/L）（P〈0.05）.rs6541003多态性AA基因型中2型糖尿病组血清同型半胱氨酸水平（13.80&#177;10.35 μmol/L）显著高于对照组（11.45&#177;4.11 μmol/L） （P〈0.05）.2型糖尿病组rs1801133（11.64&#177;5.21 μmol/L vs 15.83&#177;13.08 μmol/L）和rs9651118（9.47&#177;5.22 μmol/L vs 14.31&#177;11.09 μmol/L）多态性CC基因型患者血清同型半胱氨酸水平均显著低于同组TT型（P〈0.05）.结论 我国汉族人群2型糖尿病患者的3个标签单核苷酸多态性的基因型可能与亚甲基四氢叶酸还原酶酶活性及同型半胱氨酸代谢有关.