快速检测肺炎链球菌recA、ply及16SrRNA基因的多重降落PCR方法建立及应用

目的：建立快速检测肺炎链球菌recA,ply及16SrRNA基因的多重降落PCR方法并应用。方法：设计肺炎链球菌的特异基因recA,ply及其菌属保守序列16SrRNA基因的引物,建立多重降落PCR的反应体系及条件,通过该方法检测13株标准菌株的基因以判定recA、ply、16SrRNA基因的检测特异性;并通过对不同稀释度肺炎链球菌DNA的检测判定该方法的灵敏度。最后,应用多重降落PCR方法检测98份痰标本的肺炎链球菌,并与细胞培养法进行比较。结果：建立的多重降落PCR方法检测肺炎链球菌的特异性达100％,灵敏度达5pg／μL,该方法对98份痰标本中肺炎链球菌的检测结果与细胞培养法一致。结论：成功建立检测肺炎链球菌的多重降落PCR方法,灵敏度高,特异性强,可用于临床标本肺炎链球菌的快速检测。     

修回日期2014-10-30)

目的：分析医院临床ICU与非ICU肺炎克雷伯菌分布及耐药性,了解ICU与非ICU肺炎克雷伯菌的耐药性差异,为临床提供合理的用药依据。方法对我院2013年1月至2014年7月分离到的肺炎克雷伯菌211株进行比较分析。结果头孢呋辛、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、阿米卡星、头孢哌酮、庆大霉素、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、氨曲南在ICU与非ICU耐药率差异有统计学意义(P＜0.05)。对亚胺培南、替加环素的耐药率均较低。结论 ICU与非ICU各种药物耐药率不同,临床应根据药物敏感性合理用药。     

Beckman Coulter LH750与Sysmex XS-1000i血液分析仪检验结果的可比性验证

目的评价Beckman Coulter LH750和Sysmex XS-1000i血液分析仪检测结果的可比性。方法参照《医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南》选择与正常值、低值高值室内质控品水平接近的临床样本,对两种血液分析仪所测RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、WBC和PLT项目结果进行比对。结果以《临床血液学检验常规项目分析质量要求》中规定的允许偏差作为可接受标准,两种血液分析仪的检测结果具有可比性。结论 Beckman Coulter LH750和Sysmex XS-1000i血液分析仪检测RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、WBC、PLT的结果具有可比性,可为临床提供一致可靠的检测结果。     

多重降落PCR检测痰标本肺炎链球菌与b型流感嗜血杆菌

目的:建立可同时检测痰标本中肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Sp)与b型流感嗜血杆菌(Hae-mophilus influenzae type b,Hib)的多重降落PCR。方法:以Sp cpsA基因、Hib capⅡ区为靶标设计引物,并用Primer-BLAST在线软件检测其特异性,多重降落PCR检测492份痰标本,并以标准菌株作为对照,结果与细菌培养法进行比较。结果:所建立的多重降落PCR对Sp、Hib的检测下限分别达6.3 pg、0.2 pg;与细菌培养法相比,灵敏度及总灵敏度均达100%,检测Sp、Hib特异性分别为94%、98%,总特异性达92%。结论:所建立的多重降落PCR具有高灵敏度与特异性,可作为Sp、Hib感染的快速诊断与流行病学研究的备选手段。     

桂皮醛对大鼠体内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜的清除效应

目的:研究桂皮醛对大鼠体内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物膜的清除作用.方法:采用皮下羧甲基纤维素钠(CMC)-囊袋法制备MRSA在SD大鼠体内的生物膜模型,并给模型大鼠连续4天腹腔注射桂皮醛(cinnamaldehyde,...     

某医院重症监护病房鲍曼不动杆菌分布及其耐药性研究

摘要 目的 了解医院重症监护病房(ICU)患者标本分离鲍曼不动杆菌分布及耐药特征。方法 采用细菌分离鉴定和药敏试验方法,对某医院ICU住院患者送检标本分离鲍曼不动杆菌分布及其耐药性进行检测,并与其他临床科室作比较分析。结果 全院共分离出鲍曼不动杆菌474株,其中ICU为221株,占检出总数的46.62%;神经外科占34.49%,仅次于ICU;各科室分离的鲍曼不动杆菌主要来源于痰标本;ICU患者标本检出的鲍曼不动杆菌中多重耐药菌株比例高于其他科室,且检出率呈现增加趋势;临床分离的鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物普遍耐药,耐药率大多超过50%,仅对替加环素较敏感,其中对阿莫西林、头孢西丁、氨苄西林、头孢唑林及呋喃妥因等抗菌药物耐药率均达100%。结论 该医院ICU患者鲍曼不动杆菌感染率居各临床科室之首,主要为呼吸道感染,多重耐药菌株比例较高,提示应严密监控和加强防范措施。     

金黄色葡萄球菌临床分离株生物膜形成能力及其相关基因的检测

目的： 检测临床分离金黄色葡萄球菌（金葡菌）的生物膜形成能力及其相关基因。方法： 用半定量微量平板法检测临床分离的92株金葡菌生物膜形成能力,并通过扫描电镜观察生物膜形态,用PCR法来检测生物膜形成的相关基因ica和sarA。结果： 92株临床分离金葡菌菌株均可形成生物膜,PCR结果显示100%的分离株均含有sarA基因,78株（84.78%）含有ica基因。结论： 临床分离的金葡菌都具有形成生物膜的能力,生物膜形成的相关基因ica和sarA的携带率较高。     

ICU来源细菌耐药性监测

目的：了解我院重症监护病房（ICU）病原菌的分布特点及耐药性,为临床抗感染治疗提供理论依据。方法：采用纸片法、MIC法进行抗菌药物敏感性试验,使用WHONET5.6软件对我院2009年1月1日至2013年4月15日ICU来源的患者首次分离菌株进行分析。结果：共检出374株病原菌,其中革兰阴性杆菌67.4%,革兰氏阳性杆菌32.6%,前3位分别为鲍曼不动杆菌104株（27.8%）、铜绿假单胞菌48株（12.8%）、金黄色葡萄球菌40株（10.7%）;耐甲氧西林西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为72.5%和52.7%,未发现耐万古霉素和耐利奈唑胺葡萄球菌;未见对万古霉素耐药的粪肠球菌和屎肠球菌;产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的比率分别为61.5％和72.2％;鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率达57.6％,检出泛耐药鲍曼不动杆菌30株。结论：ICU分离菌株对常用抗菌药物的耐药率较高,应采取积极措施加以控制。     

三种阴道分泌物念珠菌检测方法的比较及临床应用

目的：阴道分泌物念珠菌三种检测方法（盐水湿片法、五联检测法、真菌培养法）的比较及临床应用.方法：对477例疑似阴道念珠菌感染标本同时做盐水湿片、五联检测和真菌培养检测.结果：盐水湿片检测,五联检测及真菌培养检测分别显示阳性率为22.5％,34.1％,45.2％.五联检测与盐水湿片法阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）,五联检测与真菌培养阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：盐水湿片法快速方便,但阳性率较低,五联检测结果稳定快速,但易受干扰因素影响.实验室应结合二种方法,提高患者阳性率检测.真菌培养能鉴定念珠菌菌株及报告药敏试验,适用于念珠菌反复发作的患者.     

非酒精性脂肪性肝病患者血清SDC4变化及其临床意义探讨

目的 探讨血清多配体蛋白聚糖-4(SDC4)水平诊断非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者的效能。方法 2019年6月～12月无过量饮酒史的健康体检成人,使用超声检查诊断NAFLD,采用ELISA法检测血清SDC4水平,采用多元Logistic回归分析影响脂肪肝发生的危险因素,应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析诊断效能。结果 在209例体检成人中,发现NAFLD患者102例,健康人107例;NAFLD组血清SDC4水平显著高于健康人(11.7±4.2 ng/mL对5.3±2.5 ng/mL,P < 0.05),血清SDC4水平随着NAFLD患者脂肪肝程度的加重呈显著上升趋势;Logistic回归分析发现,血清SDC4增高与NAFLD发生独立相关;以血清SDC4水平为8.45 ng/mL为诊断NAFLD的截断点,AUC为0.917,其敏感度为84.3％,特异度为87.9％。结论 血清SDC4增高可能与肥胖、代谢紊乱和NAFLD的发生密切相关,检测血清SDC4水平可能有助于无创诊断NAFLD。