PI3Kδ 抑制剂idelalisib 对人髓系白血病细胞增殖的抑制作用及对阿霉素耐药性的逆转作用

目的： 观察阿霉素(adriamycin,ADM)单药、艾德拉尼(idelalisib)单药以及ADM联合idelalisib 对人髓系 白血病细胞株K562 和K562/ADM的增殖以及细胞内ADM相对浓度的影响,探讨idelalisib 对K562 和K562/ADM两种 细胞株ADM耐药的逆转作用及其机制。方法： 以K562 及K562/ADM细胞株为观察对象,分别以不同浓度ADM及 idelalisib 进行干预,计算ADM对两种细胞株的半抑制浓度(50% inhibitory concentration,IC50)及耐药指数(resistance index,RI);计算idelalisib 对于两种细胞株的无细胞毒性作用浓度(细胞抑制率<5%)。后续将K562 和K562/ADM细胞 株分别分为ADM组和ADM+idelalisib 组。分别用MTT法、生物发光法和流式细胞术检测各组细胞存活率、细胞株 内ATP 和ADM水平的变化。结果： 随着ADM浓度的增加,K562 及K562/ADM细胞存活率相应降低,呈剂量依赖 性;ADM在K562 与K562/ADM 细胞株中的IC50 分别为0.2 mg/L 和1.0 mg/L,RI 为5。随着idelalisib 浓度的增加, K562 及K562/ADM细胞存活率也相应降低,呈剂量依赖性;idelalisib 对K562 和K562/ADM细胞株的无细胞毒性体 积浓度(抑制率<5%)分别约为25 μmol/L 和15 μmol/L。MTT法结果显示：在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib 组 的细胞存活率低于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05);在K562 细胞株中,ADM+idelalisib 组的细胞存活率与 ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05)。生物发光法结果显示：K562 细胞株内ATP 水平为(91.502±0.479) mmol/L, K562/ADM 细胞株内ATP 水平为(24.311±0.349) mmol/L。在K562/ADM 细胞株中,ADM+idelalisib 组ATP 水平低于 ADM组,差异有统计学意义(P<0.05);在K562 细胞株中,ADM+idelalisib 组ATP 水平与ADM组相比差异无统计学 意义(P>0.05)。流式细胞术检测结果显示：在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib 组ADM吸收率高于ADM组,差 异有统计学意义(P<0.05);在K562 细胞株中,ADM+idelalisib 组ADM吸收率与ADM组相比差异无统计学意义(P> 0.05)。在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib 组ADM排除率低于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05 或P<0.01); 在K562 细胞株中,ADM+idelalisib 组ADM排除率与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论：Idelalisib 对体 外髓系白血病细胞株K562 及K562/ADM均有细胞毒性作用,并能部分逆转K562/ADM细胞株对ADM的耐药。其逆 转机制可能是通过增加细胞内ADM蓄积和诱导细胞凋亡而实现的。