隐孢子虫病的若干进展

近年来发现引起免疫缺陷性疾病 ,特别是艾滋病患者机会性感染的病原体约有十几种 ,其中原虫主要有隐孢子虫 ,卡氏肺孢子虫 ,弓形体 ,孢子球虫等 ,而在胃肠型的艾滋病机会性感染中 ,以隐孢子虫(cryptosporidium)为最常见。有人统计 5 7例艾滋病患者感染者中有 4 2例死于本病 ,故国外对艾滋患者检查隐孢子虫已列为常规项目[1] 。因其常以并发感染且易造成临床误诊增加了死亡率 ,本文对隐孢子虫的病原生物学特性及临床流行等研究的若干进展予以介绍。1　病原生物学特性隐孢子虫最初于 190 7年被Tyzer发现并描述。对人类致病的报道始见于 1976…     

幽门螺杆菌黏附素A有效T和B联合抗原表位噬菌体展示和抗原性测定

目的 分析并确定幽门螺杆菌黏附素A(HpaA)分子中有效T细胞和B细胞联合(T/B)抗原表位.方法 重组表达HpaA(rHpaA)并免疫家兔制备抗血清.采用生物信息学技术预测和分析HpaA分子中T细胞和B细胞表位,PCB扩增T/B联合表位肽片段并构建其噬菌体展示系统.采用PEG/NaCl沉淀法提纯展示了T/B联合表位的重组噬菌体PⅢ蛋白(rPⅢ).分别以商品化幽门螺杆菌全菌IgG抗体和rHpaA抗血清为一抗,采用Western blot和ELISA对rPⅢ蛋白中展示的T/B联合表位进行筛选和鉴定.采用MTT检测rHpaA免疫小鼠脾细胞在不同重组噬菌体蛋白刺激下的增殖情况.结果 HpaA分子中共有5个T/B联合表位:HpaA10、HpaA37、HpaA79、HpaA116和HpaA143.所有T/B联合表位均成功地展示于M13噬菌体PⅢ蛋白表面.Western blot、ELISA和淋巴细胞增殖试验结果 均显示,HpaA116是优势抗原表位,HpaA37和HpaA79为有效抗原表位,HpaA10和HpaA143为无效抗原表位.结论 本研究成功地构建了幽门螺杆菌HpaA的T/B联合表位肽噬菌体展示系统.HpaA37和HpaA79,尤其是HpaA116是HpaA有效T/B联合抗原表位.     

荔枝核总皂甙提取物对糖尿病小鼠的降糖疗效观察

目的 观察荔枝核总皂甙提取物对糖尿病小鼠降血糖作用。方法 采用四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型。从荔枝核中提取总皂甙混合物。以荔枝核总皂甙提取物为试验药、优降糖和黄连素为对照药，糖尿病小鼠经灌胃连续给药3周后测定小鼠空腹血糖值，比较不同药物降血糖效果。结果 荔枝核总皂甙提取物、优降糖和黄连素均能有效地降低糖尿病小鼠的血糖浓度（均P〈0．05），其降糖率分别为59．57％、43．64％和43．93％。荔枝核总皂甙提取物用药组糖尿病小鼠的血糖浓度明显低于糖尿病对照小鼠（P〈0．01）。荔枝核总皂甙提取物降血糖效果明显优于优降糖和黄连素（P〈0．01）。结论 荔枝核总皂甙提取物具有较强的降低糖尿病小鼠血糖功能，且其降血糖效果优于优降糖与黄连素。     

蔷薇科植物果核油性提取物的体内外抗幽门螺杆菌作用

目的观察蔷薇科植物果核油性提取物初提液和提纯液体内外抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的作用。方法从胃炎和消化性溃疡患者胃黏膜活检标本中分离Hp临床菌株。分别采用二倍平皿稀释法和试管法测定油性提取物初提液和提纯液对96株Hp的M IC和MBC。建立Hp小鼠感染模型,检测油性提取物初提液和提纯液体内抗Hp的效果。结果从患者胃黏膜活检标本中分离获得96株Hp。油性提取物初提液和提纯液对上述Hp菌株的M IC90分别为体积分数0.16%和0.32%。体积分数为0.16%油性提取物初提液作用5 m in及体积分数为0.16%的提纯液作用15 m in即可杀灭HpNCTC11637株、临床菌株75b和81 a株。所有感染小鼠胃窦部组织Hp SS1株分离培养结果均阳性,体积分数为0.5%的油性提取物初提液和提纯液灌小鼠Hp分离培养结果均阴性。结论较低浓度的蔷薇科植物果核油性提取物初提液和提纯液即有体内抗Hp的作用,具有进一步开发抗Hp口服液的价值。     

家用微波炉在微波辐射ELISA检测中的应用

探索敏感性高、特异性及重现性好的快速血吸虫病免疫血清学诊断方法是血吸虫病研究领域急需解决的课题[1].     

血清MMP-3、TIMP-1及HC gp-39在早期RA患者的表达与临床的相关性研究

目的：研究血清基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase 3,MMP-3）、金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1）及人类软骨糖蛋白-39（human cartilage glycoprotein 39,HC gp-39）在早期类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者的表达及其相关性因素,探讨其在早期RA的可能意义。方法：选取45例病程〈1年的早期RA患者和32例健康查体者,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别测定血清MMP-3、TIMP-1及HC gp-39水平,同时测定关节肿胀数（SJC）、关节压痛数（TJC）、血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）、类风湿因子（RF）等相关实验室指标。结果：早期RA患者血清MMP-3、TIMP-1及HC gp-39水平明显高于正常对照组（P〈0.01）。不同X线分期各指标差异有统计学意义（P〈0.05）。不同关节功能分级时各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。三指标与SJC（P〈0.01）、TJC（P〈0.01）、ESR（P〈0.01）、CRP（P〈0.01）呈正相关,与年龄、病程、晨僵时间、RF无明显相关（P〉0.05）。结论：MMP-3、TIMP-1及HC gp-39在早期RA患者血清中呈高水平表达,可作为反映疾病活动和早期RA患者出现骨侵蚀的有益预测指标。     

男性慢性盆腔疼痛综合征患者前列腺液中肿瘤坏死因子受体浓度测定

目的：检测肿瘤坏死因子受体（sTNF-R1和sTNF-R2）在男性慢性盆腔疼痛综合征（CPPS）患者前列腺液中的表达水平,探讨sTNF-R1和sTNF-R2在CPPS炎症过程中的可能作用机制。方法：cPPS患者均来自2008年3月-2009年1月,其中ⅢA级24例、ⅢB级20例,并与15例健康人作对照。直肠按摩取出前列腺液,EusA法检测前列腺液sTNF-R1和sTNF-R2的蛋白浓度。结果：CPPSⅢA组前列腺液sTNF-R1和sTNF．1t2的蛋白浓度显著高于ⅢB组[（46±6粥41±6）,P〈0．05;（13．0±4．8US7．9±4．1）ng／mL,P〈0．01]且ⅢB组前列腺液srINF-R1和sTNF．R2的蛋白浓度显著高于对照组[分别为（25±8）、（2．5±1．9）ng／mL,均P〈0．01]。结论：男性CPPS患者前列腺液中sTNF-R1和sTNF-R2的蛋白浓度增加,两者可能共同参与了CPPS的炎症过程。     

AD－260稀释器故障排除方法

ＡＤ－２６０稀释器故障排除方法浙江省德清县第二医院检验科（３１３２０２）王宝囡ＡＤ－２６０稀释器是Ｓｙｓｍｅｘ·Ｆ－８００血球分析仪的配套装置，利用一个动力轴同时控制标本活塞和稀释液活塞的吸与排，并利用管内稀释液产生的压力控制阀门（Ｎｏｎ－Ｒｅｔｕｒ...     

葡萄球菌肠毒素A基因原核表达系统的构建及其表达产物的鉴定

 目的：构建葡萄球菌肠毒素A（SEA）基因原核表达系统，了解重组表达产物rSEA促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长的作用。方法：采用高保真PCR从金黄色葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增全长SEA基因片段，T-A克隆后测序，构建SEA基因原核表达系统pET32a-SEA-E.coliBL21DE3。采用SDS-PAGE检测rSEA表达量，Ni-NTA亲和层析法提纯rSEA。采用TCID₅₀法测定rSEA对Vero细胞的细胞毒性并计算TCIC₅₀值。采用MTT比色法分别检测不同浓度rSEA体外对小鼠脾细胞、人外周血单个核细胞（PBMC）的促增殖作用以及对HepG2细胞（人肝癌细胞）、HeLa细胞（人宫颈癌上皮细胞）的生长抑制作用。结果: 与公布的相关序列比较，所克隆的SEA基因核苷酸序列相似性为100%。rSEA表达量约为细菌总蛋白的25%。rSEA对Vero细胞的TCIC₅₀为3.14 μg。1.0-20.0 mg/L的rSEA对小鼠脾细胞和人PBMC均有明显的促增殖作用（P<0.05）。5.0-20.0 mg/L rSEA作用的人PBMC上清均能有效地抑制HepG2细胞和HeLa细胞生长（P<0.05）。结论:成功地构建了rSEA原核表达系统。rSEA仍然具有生物学活性。所建立的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的检测方法，为以后减毒rSEA突变体的筛选奠定了基础。