石蜡包埋组织DNA的快速提取技术

传统方法提取石蜡包埋组织ＤＮＡ ,步骤繁琐耗时。本实验室以ＰＣＲ方法检测结核菌为例 ,摸索出一种不经过脱蜡及酚—氯仿抽提 ,直接提取石蜡包埋组织ＤＮＡ简捷而快速的方法。1　材料与方法1.1　主要仪器 :全电脑基因扩增仪ＮＴ116 9型 (北京新技术应用研究所 ) ;低温高速离心机ＵＮＩＶＥＲＡＬ - 16Ｒ(德国 ) ;多功能紫外透射仪 (温洲市孚华分析仪器厂 )。1.2　试剂1.2 .1　裂解液 10ｍｍｏｌ ＬＴｒｉｓＨＣＬ(ｐＨ8.0 ) ;2ｍｍｏｌ ＬＥＤＴＡ(ｐＨ8 0 ) ;0 5 %Ｔｗｅｅｎ - 2 0 (ｖ ｖ) ;0 5 %ＮＰ - 40 (ｖ ｖ)。1.2 .2　 2 0ｍｇ …     

图片桥接软件在荧光法检测自身抗体中的应用效能评价

目的比较人工镜检、人工图检与图片桥接软件图检在检测抗核抗体(ANA)时将结果传入实验室信息系统(LIS)上的差异,为评价软件图检代替传统的方法的可能性提供实验依据。方法同时采用人工镜检、人工图检、软件图检对ANA生物载片进行阅片并报告结果,采用Kappa一致性检验比较3种方法在结果上的差异;将图片桥接软件与LIS进行连接,达到实时传入LIS的目的,并以10分制调查操作人员的总体感受,分值越高表明操作越便捷,工作越轻松。结果 150例ANA样本检测试验中,软件图检比人工镜检节省30min,比人工图检节省18min;人工镜检的重复性为90.7%(136/150),Kappa=0.852,软件图检的重复性为96.7%(145/150),Kappa=0.947;人工镜检和软件图检两种方法符合率为98.7%(148/150),Kappa=0.957。软件图检较人工镜检和人工图检具有自动校验,实时查看患者历史结果,对特殊核型进行标注,完成滴度确认,判读结果实时传入LIS,形成滴度汇总报表,拓展学习等功能;8位实验室操作人员对3种操作方法的体验评分均值分别为4.56、7.52、9.65。结论图片桥接软件图检较传统的人工镜检及人工图检在操作上更加简便,快捷,可显著缩短实验工作时间,提高工作效率,减少错报漏报,避免医疗纠纷,荧光桥接软件对ANA进行判读更为高效可靠,值得推广使用。     

妇科腹腔镜手术在有腹部手术史患者中的应用

目的探讨有腹部手术史患者行妇科腹腔镜手术的可行性、安全性及其优点。方法回顾性分析有腹部手术史行妇科腹腔镜手术的120例患者的临床资料,选择同期同病种无腹部手术史行腹腔镜手术的120例和有腹部手术史行妇科开腹手术的80例患者进行比较研究。结果有手术史组与无手术史组行妇科腹腔镜手术的比较,有手术史组盆腔粘连严重（P〈0．01）,有显著差异,而中转开腹、并发症、手术时间和出院时间经统计学处理,无显著差异（P〉0．05）;有手术史妇科腹腔镜组与有手术史妇科开腹手术组比较,腹腔镜组手术时间、下床活动时间和出院时间有显著差异（P〈0．01）,而出血量和术后病率无显著差异（P〉0．05）。结论有腹部手术史行妇科腹腔镜是安全可行的且优于开腹手术。     

改良中性粒细胞CD64指数鉴别诊断感染的临床应用效能

目的 探讨改良中性粒细胞CD64(nCD64)指数与传统nCD64指数鉴别诊断感染的临床应用效能差异.方法 纳入自身免疫性疾病(AID)患者32例、血液肿瘤患者32例、急诊发热患者59例及健康体检者41例.所有患者中确诊感染者76例,非感染者47例.采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞的CD64荧光强...     

经腹部与经阴道彩色多普勒超声对妇科疾病诊断的对照分析

本文对 60 2例已婚女性均采用经腹部彩色多普勒超声transvaginalcolorDopplerSonography (TACDS)及经阴道彩色多普勒超声transabdominalcolorDopplerSonography (TVCDS)方法进行对比检查 ,其中 30 1例为患者 ,有手术纪录、腹腔镜、宫腔镜等结果 ,进行两种方法的超声图像、超声诊断法的回顾性对比分析 ,旨在探讨两种方法对妇科疾病的优劣。1　对象与方法1 1　病例来源 :30 1例患者均为我院收治住院的已婚病人 ,对照组为 30 1例正常已婚体检组 ,年龄 19-71岁 ,平均年龄 4 5岁。其中子宫肌瘤 10 8例 ,盆腔炎性包块 2 0例 ,宫外孕 33例 ,…     

阴道成形术3例报告

阴道闭锁是较少见先天性阴道发育畸形 ,特征是青春期原发闭经 ,周期性下腹痛 ,检查发现子宫附件正常发育 ,宫腔阴道积血。从 2 0 0 1年 - 2 0 0 3年我院收治阴道闭锁 3例。现报告如下 :1　对象与方法1.1　一般资料 :患者年龄 13- 14岁 ,无月经 ,因周期性下腹痛 6月 - 12月而就诊。检查发现 :乳房外阴均正常 ,有少许阴毛及处女膜 ,未见阴道口。肛诊 :直肠前方可触及质软、欠活动、条索状块物 ,距处女膜缘约 2 - 5cm不等。B超提示子宫附件正常发育 ,宫腔、宫颈管腔积血 ,宫颈下方可见阴道回声。1.2　术前准备 :术前 3天无渣饮食 ,并口服抑制…     

IL-17、IL-23、TGF-β和IL-10在乙型肝炎病毒感染中的表达分析

目的探讨乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染患者外周血中几种细胞因子在疾病慢性化及疾病进展中的作用。方法分离HBV慢性感染者及健康人外周血,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测IL-17、IL-23、TGF-β和IL-10的表达及其与乙肝患者肝功能指标及血清中病毒载量的关系。结果乙肝患者血清中IL-17、IL-23和TGF-β与健康对照比较无明显差异,但IL-10显著增加,IL-17、IL-10与转氨酶水平正相关,TGF-β与转氨酶水平负相关,而IL-10与乙肝病毒DNA载量正相关。结论IL-17、IL-10及TGF-β与HBV感染者肝细胞的炎性损伤有关,对于乙肝患者肝纤维化及疾病进展程度具有提示意义,而IL-10具有促炎和耐受的双重作用,可以预测乙肝感染慢性化及病毒持续感染。     

腹腔镜辅助的阴式子宫切除术70例临床分析

目的探讨腹腔镜辅助的阴式子宫切除手术优势及临床应用价值。方法回顾分析70例腹腔镜辅助的阴式子宫切除术和配对的70例经腹子宫切除术的术中及术后情况。结果腹腔镜辅助的阴式子宫切除术的手术切口小，术中腹腔探查良好，术后肠道功能恢复时间、离床活动时间、住院时间明显短于经腹子宫切除术，术后3d体温超过38℃的患者比例明显低于经腹子宫切除术，两种手术方式的手术时间及术中出血量相似。结论腹腔镜辅助的阴式子官切除术的术中术后情况优于传统的开腹子宫切除。     

聚合酶链反应法检测结核菌及小RNA病毒阳性对照物的选择

应用聚合酶链反应(ＰＣＲ)法对病原体进行检测时,往往需要病原体菌株或含有病原体的标本作为阳性对照物。过去我们曾使用结核菌株和开放性肺结核患者的痰液作为检测结核菌的阳性对照物;使用脊髓灰质炎病毒株作为检测小ＲＮＡ病毒的阳性对照物。这几种对照物存在着一些缺点,因此,经过探索,我们分别以卡介苗和脊髓灰质炎疫苗代替上述对照物,取得了较好的效果。一、方法将冻干卡介苗一支以1ｍｌ蒸馏水溶解,移至2ｍｌ的塑料离心管内,放入沸水中加热10ｍｉｎ灭活,可按1∶50～1∶100稀释,-18℃保存。扩增时向反应体系内加入3μｌ即可。同时提取并…