TNF-α诱导宫颈癌细胞增殖、转移和耐药相关基因表达的时效分析

目的探讨肿瘤坏死因子（TNF-α）对宫颈癌Hela细胞增殖、转移和化疗耐药相关基因表达的影响。方法以外源性TNF-α作用于宫颈癌Hela细胞。作用不同时间点（0—24h）取样分析细胞周期蛋白cyclinD1,锌指蛋白A20,钙调神经磷酸酶CaN,基质金属蛋白酶（MMP-1,MMP-9）,金属硫蛋白（MT-1,MT-2）等表达的时间一效应。结果TNF-α作用宫颈癌Hela细胞不同时间段（20min,1h,6h,24h）,cvclinD1、A20、CaN、MMP-1、MMP-9、MT-1、MT-2 mRNA的表达都有不同程度改变。RT—PCR检测宫颈癌Hela细胞经TNF-α作用后cyclinD1、MMP-1、MT-2 mRNA的表达6小时达高峰24小时回落,A20、CaN、MMP-9、MT-1 mRNA表达1小时达高峰24小时回落。结论TNF-α诱导宫颈癌Hela细胞cyclin D1、A20、CaN、MMP-1、MMP-9、MT-1、MT-2 mRNA的表达具有时效性。TNF-α可能促进宫颈癌Hela细胞增殖、转移及耐药。     

氯化镧阻断LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及TNF-α释放

目的探讨氯化镧（LaCl3）对脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导巨噬细胞钙信号通路激活及肿瘤坏死因子α（TNF-α）释放的影响。方法将巨噬细胞RAW 264.7随机分成四组：LPS组（培养液中含1μg/ml LPS）,LaCl3＋LPS组（以含2.5μmol/ml LaCl3的培养基孵育细胞一定时间后,再予以1μg/ml LPS刺激）,LaCl3组（培养液中含2.5μmol/ml LaCl3）及对照组（培养液中不含LaCl3和LPS）。于不同时间点分别收集各组细胞及其培养上清待测。以Fluo-3/Am加载细胞,经上述不同分组处理一定时间后,流式细胞术观察细胞内Ca2＋浓度（[Ca^2＋]i）的变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上清中TNF-α水平。结果流式细胞术测定结果显示：LPS组细胞内[Ca^2＋]i为（336.67±26.16nmol/L）,与对照组比较差异显著（P〈0.01）;LaCl3＋LPS组（162.67±26.41nmol/L）显著低于LPS组（P〈0.01）;LaCl3组（29.84±6.42nmol/L）与对照组相比略低但无统计学意义（P〉0.05）。LPS组细胞培养上清TNF-α含量（152.19±15.68pg/ml）与对照组相比,显著升高（P〈0.01）;而LaCl3＋LPS组细胞培养上清中TNF-α含量为43.95±6.55 pg/ml,与LPS组相比显著下降（P〈0.01）且与对照组相比无差异;LaCl3组细胞培养上清中TNF-α含量（27.84±3.73pg/ml）与LPS组相比显著下调（P〈0.01）,并且与对照组相比亦显著下调（P〈0.05）。结论一定浓度的LaCl3可阻断LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及抑制TNF-α的释放。     

TNF-α诱导宫颈癌细胞增殖、转移和耐药相关基因表达的时效分析

目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)对宫颈癌Hela细胞增殖、转移和化疗耐药相关基因表达的影响.方法 以外源性TNF-α作用于宫颈癌Hela细胞,作用不同时间点(0-24h)取样分析细胞周期蛋白cyclinD1,锌指蛋白A20,钙调神经磷酸酶CaN,基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-9),金属硫蛋白(MT-1,MT-2)等表达的时间-效应.结果 TNF-α作用宫颈癌Hela细胞不同时间段(20min,1h,6h,24h),cyclinD1、A20、CaN、MMP-1、MMP-9、MT-1、MT-2 mRNA的表达都有不同程度改变.RT-PCR检测宫颈癌Hela细胞经TNF-α作用后cyclinD1、MMP-1、MT-2 mRNA的表达6小时达高峰24小时回落,A20、CaN、MMP-9、MT-1mRNA表达1小时达高峰24小时回落.结论 TNF-α诱导官颈癌Hela细胞cyclinD1、A20、CaN、MMP-1、MMP-9、MT-1、MT-2 mRNA的表达具有时效性.TNF-α可能促进宫颈癌Hela细胞增殖、转移及耐药.     

氯化镧阻断LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及TNF-α释放

目的探讨氯化镧(LaCl3)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞钙信号通路激活及肿瘤坏死因子α(TNF-α)释放的影响。方法将巨噬细胞RAW 264.7随机分成四组:LPS组(培养液中含1μg/ml LPS),LaCl3+LPS组(以含2.5μmol/ml LaCl3的培养基孵育细胞一定时间后,再予以1μg/ml LPS刺激),LaCl3组(培养液中含2.5μmol/ml LaCl3)及对照组(培养液中不含LaCl3和LPS)。于不同时间点分别收集各组细胞及其培养上清待测。以Fluo-3/Am加载细胞,经上述不同分组处理一定时间后,流式细胞术观察细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中TNF-α水平。结果流式细胞术测定结果显示:LPS组细胞内[Ca2+]i为(336.67±26.16nmol/L),与对照组比较差异显著(P0.01);LaCl3+LPS组(162.67±26.41nmol/L)显著低于LPS组(P0.01);LaCl3组(29.84±6.42nmol/L)与对照组相比略低但无统计学意义(P0.05)。LPS组细胞培养上清TNF-α含量(152.19±15.68pg/ml)与对照组相比,显著升高(P0.01);而LaCl3+LPS组细胞培养上清中TNF-α含量为43.95±6.55 pg/ml,与LPS组相比显著下降(P0.01)且与对照组相比无差异;LaCl3组细胞培养上清中TNF-α含量(27.84±3.73pg/ml)与LPS组相比显著下调(P0.01),并且与对照组相比亦显著下调(P0.05)。结论一定浓度的LaCl3可阻断LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及抑制TNF-α的释放。     

经会阴超声对产后妇女压力性尿失禁潜在风险的评估

目的探讨经会阴超声检查对产后妇女压力性尿失禁(SUI)的诊断价值。方法将102例产后妇女以经产及初产为标准设为产后Ⅰ组(n=52)、产后Ⅱ组(n=50),另外选取30例健康未育妇女作为对照组。均采用经会阴超声,检测其在静息和最大Valsalva动作两种状态下的超声图像,并对3组尿道内口形态、膀胱后角有无开放、尿道倾斜角及膀胱颈移动度进行比较。结果静息状态下,3组患者尿道内口及膀胱后角均无开放,膀胱颈均位于参考线以上,但是位置有所不同,各测量指标差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,Valsalva动作时产后组尿道内口漏斗形成率较高、尿道倾斜角和膀胱颈移动度明显增大(P<0.05)。结论多产妇女存在SUI的风险。经会阴盆底超声可以对是否存在SUI风险进行评估。 更多还原     

氯化镧经Caspase-3途径诱导子宫颈癌细胞凋亡

目的探讨氯化镧体外诱导人子宫颈癌细胞凋亡的作用和分子机制,为探索稀土化合物的药用价值提供理论依据。方法采用形态学观察、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定氯化镧对HeLa细胞的抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率,蛋白质印迹技术分析Caspase-3蛋白表达的改变,并以分光光度法测定其活性。结果形态学分析和MTT法显示氯化镧能够抑制HeLa细胞生长并诱导其凋亡(P<0.05),其作用呈明显的量效关系。细胞周期实验结果说明,氯化镧可令细胞大多阻滞于G1期,并呈一定的浓度依赖性;氯化镧诱导细胞凋亡亦有剂量依赖性,在5μmol/L剂量下,细胞开始凋亡,随着药物浓度的增加,凋亡率不断增高,各浓度与对照组相比差异都具有统计学意义(P<0.01)。蛋白质印迹实验显示氯化镧亦可上调活化的Caspase-3蛋白表达水平及活性且呈浓度依赖性。结论一定浓度的氯化镧可抑制人子宫颈癌HeLa细胞的增殖并通过激活Caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。