基于STM32芯片的肿瘤细胞荧光检测系统设计

为了实现肿瘤细胞早期筛查以达到早期防治,本研究开发了一种基于微流控芯片的肿瘤细胞荧光检测系统。光路采用反射式共焦距光路结构;硬件电路基于光电探测器模块、STM32F103C8T6、A/D转换芯片与串口芯片对激发荧光信号实时采集,并向上位机传输。同时设计了一套基于荧光检测的软件系统,实现检测动态可视化与报告生成及打印功能。采用FITC荧光素标记的乳腺癌细胞MDA-MB-453进行试验。结果表明,该系统在6 mL/h最佳进样速度下,对肿瘤细胞的平均检测率达到85.36%,为临床的应用提供可靠的诊断方法。     

重症急性胰腺炎并发肺损伤促/抗炎症因子的变化及大黄附子汤的干预研究

目的观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎并肺损伤（SAP-ALI）时血清促/抗炎症因子的影响。方法健康长白猪,体重25～30kg,13头,随机分成三组：对照组（n=4）、重症急性胰腺炎肺损伤组（模型组,n=4）、大黄附子汤治疗组（治疗组,n=5）。其中模型组采用主胰管内逆行注入4%牛磺胆酸钠（1ml/kg）诱导SAP-ALI模型。三组均于术后即刻、术后6h、12h、24h、48h、72h取血,ELISA法动态检测血清中促炎因子（TNF-α和IL-1β）、抗炎因子（IL-4）浓度变化,同时动态比浊法测定血清内毒素（LPS）含量。术后72h处死动物,计算肺组织湿/干重比,观察胰腺与肺病理形态学变化。结果模型组6～72h血清淀粉酶、内毒素、TNF-α、IL-1β浓度及肺病理组织学评分均较对照组明显升高（P〈0.05）,IL-4浓度在术后24h开始较对照组逐渐升高（P〈0.05）。治疗组各时间点血清淀粉酶、内毒素、TNF-α、IL-1β浓度均较模型组明显下降（P〈0.05）,但血清IL-4浓度于术后12h出现明显升高,48h达到峰值。结论促炎因子（TNF-α、IL-1β）、抗炎因子（IL-4）及内毒素等共同参与了SAP-ALI的发病过程。大黄附子汤通过降低血清LPS水平,进而下调血清TNF-α及IL-1β表达,上调IL-4表达,减轻SAP-ALI的程度。     

腹腔复苏对失血性休克大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨腹腔复苏对失血性休克大鼠肺损伤的保护作用。方法健康雄性SD大鼠40只,随机分成假手术组(Ⅰ组)、失血性休克组(Ⅱ组)、静脉复苏组(Ⅲ组)、PD-2液腹腔复苏加静脉复苏组(Ⅳ组)。Ⅰ组依次行右颈总动脉、右股静脉、左股动脉插管及全身肝素化;Ⅱ组在Ⅰ组基础上制备失血性休克大鼠模型;Ⅲ组在Ⅱ组基础上于造模后经右股静脉补入放出的血量及2倍量林格氏液进行静脉复苏;Ⅳ组在Ⅲ组基础上同时腹腔内注入30 mL2.5%PD-2液。各组分别于T0、T1、T2进行PaO2/FiO2值血气分析;T2时测定肺组织W/D比值,TNF-α、IL-1β、IL-10的含量,观察肺组织病理学结果。结果与Ⅰ组比较,Ⅱ组PaO2/FiO2值明显降低,Ⅲ组于T0、T2时下降明显,Ⅳ组T0时下降明显;与Ⅰ组比较,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组肺组织TNF-α、IL-1β、IL-10的含量和W/D比值均升高(P<0.01),与Ⅱ组比较,Ⅲ组和Ⅳ组降低,Ⅳ组肺组织IL-10含量升高(P<0.05或P<0.01)。与Ⅳ组比较Ⅲ组肺组织IL-10含量降低;肺组织病理学比较,Ⅱ组较Ⅰ组有明显损伤,Ⅳ组病理损伤最轻。结论 PD-2液腹腔复苏能够减轻失血性休克大鼠肺组织损害的程度,降低炎症反应,对肺损伤具有保护作用。     

大黄附子汤对急性坏死性胰腺炎大鼠小肠黏膜屏障功能的保护作用

目的 探讨大黄附子汤对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠小肠黏膜屏障功能的影响及意义.方法 将60只SD大鼠按数字表法随机分为假手术组(19只)、ANP组(21只)和大黄附子汤治疗组(20只).经胰胆管逆行注入4%牛磺且酸钠1 ml/kg体重建立ANP模型,同时行空肠造瘘.治疗组于制模后0.5 h经空肠造瘘管注入大黄附子汤2 ml,隔4、8 h再注入2 ml;其他两组注入等容积生理盐水.术后24 h经腹主动脉取血,测定血淀粉酶、内毒素、D-乳酸含量及二胺氧化酶(DAO)活性.取胰腺、小肠组织行病理学检查,测定肠上皮损伤指数,观察小肠黏膜超微结构改变.结果 假手术组大鼠血淀粉酶、内毒素、D-乳酸含量及DAO活性分别为(152±32)U/L、(6.95±2.10)pg/L、(3.96±1.08)μg/ml和(14.26±2.67)μg/ml,ANP组分别为(1549±93)U/L、(40.48±3.41)pg/L、(12.34±1.23)μg/ml和(80.28±3.54)μg/ml,治疗组分别为(655±49)U/L、(19.55±2.50)pg/L、(6.75±1.36)μg/ml和(20.69±7.53)μg/ml,ANP组较假手术组明显升高,而治疗组较ANP组显著降低,但仍高于假手术组(P＜0.05或＜0.01).ANP组小肠黏膜厚度、绒毛高度分别为(389.44±29.87)μm、(16.52±3.73)μm,显著低于治疗组的(501.95±45.38)μm、(27.82±5.17)μm,更显著低于假手术组的(658.72±57.49)μm和(35.49±6.43)μm;而肠上皮损伤指数为3.72±0.65,显著高于治疗组的2.12±0.37和假手术组的0.85±0.24.同时,大黄附子汤治疗后小肠黏膜组织学和超微结构改变亦均较ANP组明显减轻.结论 大黄附子汤可明显减轻ANP大鼠小肠黏膜屏障功能损害的程度.     

经皮肝穿胆管引流治疗急性梗阻性化脓性胆管炎的效果评估

目的探讨采用经皮肝穿刺胆管引流(PTCD)能否有效治疗急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC).方法 选取我院2008年至2012年收治的急性梗阻性化脓性胆管炎患者25例.在DSA引导下行经皮肝穿置入引流管至扩张胆总管内引流,术中行甲硝唑冲洗.结果 2例患者无好转,中转开腹手术行胆总管切开T管引流术.1例患者术后因心脏功能衰竭死亡.其余22例患者体温恢复正常,血压平稳,黄疸逐步消退好转,胆管引流管通畅引出胆汁.结论 急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC)患者采用经皮肝穿刺胆管引流(PTCD)是一种简便、创伤小、有效的治疗方法.     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺泡上皮屏障功能的影响

目的 探讨大黄附子汤对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺上皮屏障功能的影响及意义.方法 96只SD大鼠随机分为假手术组、重症急性胰腺炎肺损伤组(SAP-ALI组)及大黄附子汤组三组,每组32只.各组再按3,6,12,24 h时间点分为四个亚组,每个亚组各8只.假手术组开腹后行空肠造瘘,翻动胰腺数次后关腹;SAP-ALI组在假手术组基础上经胰胆管逆行注入4%牛磺胆酸钠(1mL/kg),建立重症急性胰腺炎急性肺损伤模型;大黄附子汤组在SAP-ALI组基础上经空肠造瘘管注入大黄附子汤10 mL.各组按时间点分别于伤后3,6,12,24 h测定肺泡上皮通透性(AEP)、肺泡内液体清除率(ALCR)、总肺水量(TLW)和肺血管外肺水量(EVLW),同时测定血浆内毒素(ET)、血清淀粉酶含量,光镜下观察肺脏病理组织学变化.结果 与假手术组比较,SAP-ALI组大鼠术后3,6,12,24 h ALCR显著降低,TLW,EVLW及AEP呈明显升高趋势(P＜0.05或P＜0.01).与SAP-ALI组比较,大黄附子汤组对大鼠术后3,6,12,24 h ALCR均显著升高,TLW,EVLW及AEP呈明显降低趋势(P＜0.05或P＜0.01),且肺组织的水肿、出血、炎症程度及肺损伤学评分和肺湿/干重比均明显好转.结论 重症急性胰腺炎并急性肺损伤大鼠存在严重的肺泡上皮屏障功能障碍;大黄附子汤通过抑制内毒素过度释放,可降低炎症反应,改善肺泡上皮功能障碍,减轻肺损伤程度.

Abstract：

Objective To investigate effect of Dahuang Fuzi decoction on alveolaur epithelial barrier in rats with lung injury with severe acute pancreatitis. Method Ninty-six health SD rats were randomly divided into three groups: sham operation group, SAP-ALI group, Dahuang Fuzi decoction group, and then according to the time point of sacrifice after operation, each group was subdivided into 3,6,12,24 hour subsets ( each, n = 8). After the belly of a rat in the sham operation group was cut open, the pancreas was flipped several times,and then a stoma was made in the jejunum to form its fistula. In the SAP-ALl group,1 mL/kg sodium taurocholate was reversely injected into the pancreatobile duct to establish the model of SAP, and then the jejimum fistula was performed. The SAP-ALI model in Dahuang Fuzi decoction group was treated by injection of 10ml of Dahuang Fuzi decoctionon into the fistula respectively. Blood was collected from heart to detect serum amvlase and endotoxin (ET) levels before the rat being executed. The lung histopathologic changes, pulmonary injury scores and wet/dry weight(W/D) ratios were observed after the rats were executed. The alveolar liquid clearance rate(ALCR), total lung water content (TLW), extravascular lung water content(EVLW) and alveolar epithelial permeability (AEP) were examined in 3,6, 12,24 h after injury.Results There was continuous increase of AEP,TLW and EVLW,as well as progressive reduction of ALCR compared with sham operation group at 3,6,12,24 h after operation. Compared with SAP-ALI group, there was continuous decrease of AEP,TLW and EVLW, and elevated of ALCR at 3,6,12,24 h after operation.Conclusions Dahuang Fuzi decoction can significantly reduce alveolaur epithelial barrier and degree of lung tissue of SAP-ALI rats by inhibiting the elevation of LPS and inflammation reaction.     

血清抗磷脂酶A2受体抗体对特发性膜性肾病预后的早期评估价值

目的探讨血清磷脂酶A2受体（PLA2R）抗体对特发性膜性肾病（IMN）患者预后的评估价值。方法选取30例不需要免疫抑制剂治疗的新发IMN患者为研究对象,予ARB类药物治疗,半年后评价疗效。比较缓解患者与无效患者治疗前后24h尿蛋白及血清PLA2R抗体水平。结果经半年治疗后,缓解12例,无效18例。入院时,缓解组与无效组患者24h尿蛋白水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,而血清PLA2R抗体水平明显低于无效组（P＜0.05）;治疗半年后,缓解组24h尿蛋白及血清PLA2R抗体水平均明显低于无效组（均P＜0.05）。结论血清PLA2R抗体水平能早期预测IMN的病情变化。     

Toll样受体4/NF-κB信号转导通路在重症急性胰腺炎肺损伤中的表达及血必净的干预作用

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)和急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是重症急性胰腺炎(SAP)最常见的早期并发症,发生率高达33%,发病1周内病死的SAP患者中60%～80%与ALL/ARDS有关[1-2].     

肠内免疫微生态营养支持对重症急性胰腺炎肝损害的保护作用

目的 探讨肠内免疫微生态营养支持对重症急性胰腺炎肝损害的保护作用及其机制.方法 57例重症急性胰腺炎肝损害患者于入院48 h内随机分为两组,即肠外营养(PN)组28例和肠内免疫微生态营养(EIN)组29例,分别行PN和EIN支持14 d.检测其内毒素、炎症因子及肝功能的改变.结果 入院时EIN组内毒素、TNF-α、IL-6及肝功能与PN组比较差异无显著性.营养支持14 d后,EIN组内毒素、TNF-α和IL-6分别为(1.28±0.17)pg/mL、(30.13±8.12)pg/mL、(36.43±8.24)pg/mL.上述指标均较PN组明显下降(P<0.01).EIN组14 d后肝功能各项指标均恢复正常,与PN组比较有统计学意义.结论 肠内免疫微生态营养,可以补充肠道正常菌群,减少细菌易位,减少内毒素血症及炎症因子的发生,从而对重症急性胰腺炎肝损害起保护作用.     

中性粒细胞弹性蛋白酶在重症胰腺炎急性肺损伤中的表达及大黄附子汤的干预作用

目的 观察中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在重症急性胰腺炎并急性肺损伤(SAP-ALI)中的表达及大黄附子汤的干预作用.方法 健康SD大鼠80只,按体质量随机分成4组:假手术组(n=19)、SAP-ALI组(n=21)、NE处理组(n=20)及大黄附子汤治疗组(治疗组,n=20).假手术组开腹后行空肠造瘘,翻动胰腺数次后关腹;SAP-ALI组在假手术组基础上经胰胆管逆行注入4%牛磺胆酸钠(1 ml/kg),建立SAP-ALI模型;NE处理组造模后静脉输注NE 0.5 U/100 g,其他同SAP-ALI组;治疗组在NE处理组基础上经空肠造瘘管注入大黄附子汤10 ml.酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肺泡灌洗液和血清的NE含量及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β含量.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western b1ot法分别检测肺组织NE mRNA和蛋白表达,同时观察胰腺和肺组织湿/干重比和病理形态学变化.结果 NE处理组BALF和血清NE含量及血清TNF-α、IL-1β含量均较SAP-ALI组大鼠明显增加(P<0.05).NE处理组肺组织NE mRNA表达较SAP-ALI组显著升高.经大黄附子汤治疗后BALF和血清NE含量、血清TNF-α、IL-1β含量及肺组织中NE mRNA表达均较NE处理组明显降低(P<0.05).结论 NE的过度释放参与了SAP-ALI的发病过程,大黄附子汤可通过抑制NE的释放,降低血清TNF-α、IL-1β含量,减轻肺损伤程度.