非小细胞肺癌中TRIM25和PKM2蛋白表达

目的检测临床非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）病人组织中TRIM25、PKM2蛋白的表达情况,探讨它
们的关联性及意义。方法应用组织免疫荧光法,检测TRIM25、PKM2 蛋白在60 例NSCLC组织和20 例癌旁边正常肺组织
（>5 cm）表达情况,同时运用Western blotting方法检测TRIM25、PKM2在10例新鲜NSCLC组织中表达情况,并结合标本的临
床病理特征进行分析。结果TRIM25在60例非小细胞肺癌组织中的阳性表达率45%,而20例癌旁正常肺组织中仅为10%（P=
0.005）。TRIM25在腺癌中阳性表达率为28.6%,而在鳞癌中为59.4%（P=0.017）。TRIM25被发现与TNM分期、淋巴结转移之
间呈正相关性（P<0.05）。PKM2在60例非小细胞肺癌组织中表达率为73.3%,而在20例癌旁正常肺组织中为30%（P=0.001）。
PKM2 在腺癌的表达为57.1%,而在鳞癌中为87.5%（P=0.008）。通过关联性分析TRIM25 和PKM2 存在相关性（P=0.026）。
Western blot结果表明当TRIM25表达升高时PKM2表达增长放缓。结论TRIM25、PKM2蛋白可能同时参与到NSCLC发生发
展过程中,存在负相关性。
     

三基序蛋白25过表达对肺癌细胞H1299顺铂敏感性的影响

目的：初步探讨三基序蛋白25（tripartite motif containing 25,TRIM25）过表达对人肺癌细胞株H1299顺铂敏感性的影响及其分子作用机制。方法：应用基因克隆技术构建TRIM25高表达质粒载体,瞬时转染人肺癌细胞株H1299,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot法检测TRIM25蛋白表达水平及其过表达时丙酮酸激酶M2（pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2）蛋白水平的变化。用顺铂分别处理转染前后的H1299细胞24 h,MTT法检测细胞耐药性,Annexin V/PI双染法流式细胞仪（flow cytometry,ＦＣＭ）检测细胞凋亡。结果：同H1299空白组和转染pGCMV/neo空载体组比较,pGCMV-trim25转染组细胞中TRIM25蛋白的表达水平明显增加（P=0.003,P=0.005）;且TRIM25过表达时,细胞中PKM2蛋白的表达水平降低（P=0.001,P=0.003）。用顺铂处理后,pGCMV-trim25转染组细胞的药物敏感性显著下降（P<0.001）,转染组细胞凋亡率亦明显降低（P<0.001）。结论：TRIM25在肺癌细胞H1299中高表达时,可能通过下调PKM2而降低对顺铂的敏感性。     

沉默三联基序蛋白25基因对A549/DDP细胞株顺铂耐药性及凋亡的影响

目的：三联基序蛋白２５（tripartite motif containing 25,TRIM25）为泛素化E3连接酶,通过抑制TRIM25表达,研究其对肺癌顺铂（cis-dichlorodiamine platinum,DDP）耐药细胞株A549/DDP耐药性及凋亡的影响。方法：针对TRIM25基因设计4条不同序列shRNA,分别构建重组质粒载体pt1、pt2、pt3、pt4。利用脂质体将质粒转染至A549/DDP细胞,采用real-time PCR、Western blot检测抑制效果,MTT实验和流式细胞仪（flow cytometry,FCM）实验分别检测在DDP作用下细胞耐药性改变和凋亡情况。结果：干扰质粒pt1在mRNA和蛋白质水平上均能特异性地抑制TRIM25的表达;MTT法结果显示,抑制TRIM25表达后,干扰组pt1细胞IC50值低于pNC组（P=0.001）及对照组（P=0.000）;FCM结果显示,干扰组pt1的细胞凋亡率明显低于pNC组（P=0.005）、对照组（P=0.004）。结论：抑制 TRIM25表达后,能有效地降低 A549/DDP细胞株的DDP耐药性并促进其凋亡。     

人肺腺癌耐药细胞株A549/CDDP中相关泛素化蛋白质研究

目的研究肺腺癌中与耐药相关的泛素化或类泛素化蛋白质及其与耐药的关系。方法从经顺铂处理和未处理的A549细胞及其耐顺铂细胞株中分离泛素化、类泛素化蛋白质,通过1D SDS-PAGE和Chip HPLC-MS/MS分析鉴别蛋白,Western blot法验证质谱结果;MTT法检测细胞对顺铂的耐药性。结果鉴定出发生类泛素化修饰蛋白质-PKM2,并发现其在耐药细胞株中低表达;以蛋白酶体抑制剂MG132干预细胞后,PKM2表达上调;CDDP和MG132联合作用细胞后,细胞耐药性下降。结论细胞中PKM2表达水平与肿瘤细胞耐药程度呈负相关,PKM2受蛋白质类泛素化修饰-SUMO化修饰调节,提示PKM2可能与肿瘤耐药的发生密切相关。     

活血降脂汤治疗高脂血症68例疗效观察

目的:观察活血降脂汤治疗高脂血症的临床疗效。方法:将患者随机分为2组,治疗组68例,予以活血降脂汤,对照组35例,给予脂必妥片,30天为1疗程,观察疗效及血脂参数变化。结果:治疗组总有效率为88.23%,对照组总有效率为65.71%,2组疗效比较,差异有显著性。治疗组能降低甘油三酯(TG)、升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),较对照组差异有显著性(P<0.01)。结论:活血降脂汤治疗高脂血症有较好疗效。     

麻精药品空安瓿和废贴回收信息化登记工具开发及应用

目的 提高麻醉药品和精神药品（简称麻精药品）空安瓿和废贴回收管理的质量和效率。方法 基于Excel软件和Excel VBA编程构建登记工具（含登记界面及完整的架构和流程）并在医院药房试用，对医院10个需要回收空安瓿或废贴的麻精药品进行模拟回收登记，分别记录采用手工和工具登记单个药品所用时间，并统计总时间。汇总当月登记内容，分别统计采用手工和工具登记所用时间。调查住院药房10名具有麻精药品发放权限的员工对采用工具登记的满意度。结果 该登记工具集成了登记操作、数据储存、报表生成、权限管理、参数维护及数据备份等功能，具有便捷性、安全性、规范化等优势，并在管理流程上实现了临床和药房之间空安瓿/废贴的管理闭环，以及药房空安瓿/废贴登记-统计-回收储存同步闭环。在相同模拟工作量下，工具登记耗时（14.36±0.58）s，明显短于手工登记的（43.31±3.73）s(P<0.01)。月汇总时间由手工登记的近1 h缩短至工具登记的约1 s。调查对象对登记工具均“非常满意”。结论 该登记工具以简易的方案，为麻精药品空安瓿及废贴回收登记的规范化、高效及信息化管理提供了一种便捷化思路。