耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌耐药机制的研究

目的：调查和研究南昌地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法：收集南昌大学第二附属医院2012年间临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌（CRAB）非重复株。Vitek-32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定,K-B法进行药敏试验,三维试验检测AmpC酶,EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶,采用聚合酶链反应（PCR）扩增耐药基因,并对阳性产物进行双向测序分析,确定其基因型。结果：84株CRAB对临床常用的12种抗菌药物有9种耐药率〉90%,对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率最低（44.0%）,所有菌株均为多重耐药株。三维试验在83株菌（98.8%）中检出AmpC酶,协同试验未检出产金属酶菌株。所有菌株均携带blaOXA-23、blaOXA-51及blaADC基因,1株携带blaOXA-58基因,未检测到blaOXA-24及金属酶基因（blaIMP、blaVIM-2、blaNDM-1及blaSIM-1）;外排泵编码基因adeB、调控基因adeS和adeR的检出率分别为98.8%（83/84）、81.0%（68/84）和67.9%（57/84）;所有菌株均检出外膜蛋白carO基因;69株（82.1%）检测出I类整合酶基因（intI1）,全部菌株携带插入序列ISAba1。结论：南昌地区CRAB耐药性及多重耐药性非常严重,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制为产OXA-23型碳青霉烯酶,AmpC酶、外排泵AdeABC、I类整合子和插入序列ISAba1,可能与CRAB的多重耐药性密切相关。     

UF-100尿沉渣分析仪检测红细胞结果的误差

尿红细胞检测是诊断泌尿系疾病、特别是肾病的重要实验指标之一.显微镜尿沉渣检查仍是目前检测尿液有形成分的主要手段.随着自动化尿液分析仪的问世,给尿常规检测带来了一些方便,UF-100尿沉渣分析仪是对尿样直接作荧光染色后,利用流式细胞原理和电阻抗技术对尿液中红细胞进行定量分析,该仪器具有使用简单、快速、不需离心.结果重复性好等特点.但在日常工作中,诸如结晶、酵母菌等因素均可导致UF-100在红细胞计数中测定错误,应引起实验室重视.     

UF-100尿沉渣分析仪检测红细胞结果的误差

尿红细胞检测是诊断泌尿系疾病、特别是肾病的重要实验指标之一.显微镜尿沉渣检查仍是目前检测尿液有形成分的主要手段.随着自动化尿液分析仪的问世,给尿常规检测带来了一些方便,UF-100尿沉渣分析仪是对尿样直接作荧光染色后,利用流式细胞原理和电阻抗技术对尿液中红细胞进行定量分析,该仪器具有使用简单、快速、不需离心.结果重复性好等特点.但在日常工作中,诸如结晶、酵母菌等因素均可导致UF-100在红细胞计数中测定错误,应引起实验室重视.     

质谱法对鲍曼不动杆菌的快速鉴定研究

目的建立表面解吸常压化学电离质谱(SDAPCI-MS)技术检测鲍曼不动杆菌特有的挥发性代谢产物(VCs)以便快速鉴定鲍曼不动杆菌。方法复苏临床分离获得的鲍曼不动杆菌10株,接种到血琼脂平板上,37℃孵育培养,用SDAPCI-MS对培养不同时间的鲍曼不动杆菌进行VCs检测。结果与空白培养基比较,检测到鲍曼不动杆菌特有的VCs及特征的质荷比峰(m/z 60和118),且鲍曼不动杆菌在不同培养时间产生的VCs基本相同。结论 SDAPCI-MS有望通过特征性VCs对鲍曼不动杆菌进行快速检测。     

环介导恒温扩增法快速检测曲霉菌的研究

目的建立环介导恒温扩增(LAMP)检测曲霉菌的方法。方法用LAMP技术扩增曲霉菌菌株,并应用临床标本检测,同时对方法特异性、敏感性进行观察。结果所测曲霉菌菌株均获扩增产物,对其他非曲霉菌菌株无交叉反应,其检测敏感性可达0.05pg。结论LAMP方法特异性好,灵敏度高,操作简便,快速,适合从临床标本中检测曲霉菌。     

鲍氏不动杆菌的耐药性及同源性研究

目的调查当地省级医院临床分离的鲍氏不动杆菌耐药性及产AmpC酶情况,并对AmpC酶阳性的多重耐药菌株进行同源性研究.方法药敏试验采用纸片琼脂扩散法,采用AmpC酶表型筛选法结合PCR法检测AmpC酶,利用RAPD分型技术对AmpC阳性的多重耐药鲍氏不动杆菌进行基因分型.结果106株鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药率最低11.1%,对青霉素类、头孢菌素类和单环β-内酰胺类抗生素耐药率均较高,特别是氨曲南和哌拉西林;对氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗生素也有一定的耐药性;共检测出25株AmpC酶阳性菌株,产AmpC酶阳性率占总菌株数的23.58%;通过聚类分析发现5、6、10、12、13、14、20、23号菌株分为同一聚类群;8、17、18号菌株分为同一聚类群.结论鲍氏不动杆菌对各类抗生素均有不同程度的耐药性;AmpC酶表型筛选试验检测AmpC酶结果可靠,操作简便、快速,易于在临床实验室中推广使用;RAPD分型技术对鲍氏不动杆菌进行基因分型对于确定鲍氏不动杆菌菌株间的同源性,监控感染的传播有重要意义.     

高产AmpC酶阴沟肠杆菌的耐药性及同源性分析

目的掌握阴沟肠杆菌的耐药谱及分子流行病学特征.方法高产AmpC酶采用表型筛选法,耐药谱选用改良K-B法,基因分型采用随机扩增多态DNA(RAPD)法.结果50株阴沟肠杆菌中表现高产AmpC酶株有16株(32%)、单产ESBLs菌株有8株(16%)、同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有8株(16%),未发现亚胺培南耐药株,产酶和不产酶菌株间的耐药率差异存在显著性,RAPD基因分型得的遗传聚类图,可分为4类.结论阴沟肠杆菌有很高的耐药性,阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南,RAPD技术对阴沟肠杆菌感染同源性分析是一个有效的方法.     

多重耐药阴沟肠杆菌的耐药性及分子流行病学研究

目的掌握阴沟肠杆菌的耐药谱及分子流行病学特征。方法耐药谱选用改良K-B法,基因分型采用随机扩增多态DNA(RAPD)法。结果48株阴沟肠杆菌中ESBLs检出率为35.4%,未发现亚胺培南耐药株,产ESBLs和不产ESBLs菌株间的耐药率存在显著性差异。RAPD基因分型得的遗传聚类图,可分为四类,1、2、5、6号标本为同一聚类群。结论阴沟肠杆菌有很高的耐药性,阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南,其次为阿米卡星和环丙沙星。RAPD技术对阴沟肠杆菌感染同源性分析是一个有效的方法。     

下呼吸道感染真菌的分离鉴定及药敏分析

目的了解下呼吸道真菌感染情况及对抗真菌药物抑菌效果,为临床提供帮助。方法对医院2006年1月-2008年12月临床送检的痰液或纤维支气管镜收集的标本,按照全国临床检验操作规程的有关要求进行分离鉴定,对其中较常见的假丝酵母菌属(106株),采用Rosco纸片扩散法对常用5种抗真菌药物进行药敏试验。结果 2116份痰标本共分离出6种假丝酵母菌属,共422株,检出率19.9%,其中以白色假丝酵母菌为主,占52.1%,其次是热带假丝酵母菌,为20.4%,类星形假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、高里假丝酵母菌、皱褶假丝酵母菌,分别为12.1%、6.2%、5.0%、2.8%、1.4%;大多为与细菌混合感染;药敏结果为白色假丝酵母菌和类星形假丝酵母菌敏感率大多>90.0%,热带假丝酵母菌敏感率也>80.0%,克柔假丝酵母菌对氟康唑几乎全部耐药。结论下呼吸道假丝酵母菌感染比较严重,且常与细菌合并感染;常见感染假丝酵母菌对常用抗真菌药物有一定耐药性,应引起重视;Rosco纸扩散法操作简单,结果可靠稳定,适用常规抗真菌药敏试验。     

BOX-PCR技术在肺炎链球菌检测中应用

目的建立BOX-PCR方法 ,用于肺炎链球菌的检测和流行病学调查。方法用BOX-PCR技术扩增23株肺炎链球菌菌株,并应用50例临床标本检测,同时对方法的特异性、敏感性进行研究。结果对所测肺炎链球菌菌株均获得扩增产物,对其他非肺炎链球菌菌属无交叉反应,其检测敏感性可达101cfu/ml,50例临床标本BOX-PCR方法有9例检测出肺炎链球菌阳性(18.0%),而培养法阳性4例(8.0%)。结论 BOX-PCR方法能快速、特异、灵敏地检测肺炎链球菌和进行流行病学调查。