从脐血和骨髓中诱导成骨样细胞的体外研究

目的:探讨脐血和骨髓单个核细胞(monocytes,MNC)体外培养过程中的生长特性及诱导贴壁细胞向成骨细胞分化。方法:分离脐血和骨髓MNC,按培养基不同分成3组:分别为MesencultTM无血清培养基。CellGRO培养基+100mL/L胎牛血清。DMEM/F12培养基+100mL/LFBS。体外培养以获得贴壁细胞。观察不同培养条件下细胞扩增的效果。获得的贴壁细胞培养基中加入地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸,诱导细胞向成骨细胞分化。检测诱导后细胞成骨细胞标志物碱性磷酸酶、I型胶原和骨钙素的表达。结果:脐血和骨髓MNC在含有血清的培养基中可以获得更多的贴壁细胞。骨髓MNC贴壁细胞形态均一,呈典型的成纤维细胞样,而脐血贴壁细胞未获得典型的成纤维细胞样细胞,混有大量的圆形细胞。骨髓中获得的细胞可以持续传代10代以上仍保持良好的增殖状态;脐血贴壁细胞最多可以传代2次,细胞总数和纤维样细胞均逐代减少。诱导后的脐血和骨髓细胞均呈碱性磷酸酶阳性,免疫组化染色显示I型胶原和骨钙素表达阳性。结论:骨髓MNC体外培养可以获得典型的间充质干细胞且可以持续多代扩增,向成骨细胞诱导后,形态和标志物检测都呈典型的成骨细胞样。脐血MNC体外培养可获得贴壁细胞,但不呈间充质干细胞样,向成骨细胞诱导后,虽形态与成骨细胞不相似,但成骨细胞     

EB病毒感染与口腔鳞状细胞癌关系的研究

目的探讨EB病毒感染与口腔鳞癌发生、发展的关系.方法采用酶联免疫法检查234例住院患者血液中EBV抗体,对28例口腔癌病灶标本用多聚酶链反应技术(PCR)检测EBV基因组核抗原1区.结果 234例住院患者的血液的EBV抗体阳性13例,阳性率5.55%.28例口腔癌病灶标本EBV核抗原1区阳性2例,阳性率7.1%(P＞0.05).结论 EBV感染与口腔鳞癌的发生无明显关系.     

甲哌卡因在牙髓病治疗中的应用

在牙髓病治疗中无痛操作很重要，因此必然涉及到麻醉药物和麻醉效果。以往常用的麻醉药物多有不尽人意之处。2004-09～2006-07，我科应用法国Septodont公司生产的口腔专用局部注射麻醉剂甲哌卡因（商品名斯康杜尼）治疗牙髓病患者986例，1200个牙，收到了良好的效果，报道如下。     

两种来源的单个核细胞的培养比较

[目的] 观察体外分离培养的两种来源（脐血与骨髓）的单个核细胞，探讨其培养特点和差异。[方法] 体外分离、纯化和培养脐血与骨髓中单个核细胞（MNC），观察其形态和生长特性。[结果] 分离18份脐血，脐血标本的个体差异非常大，只有12份获得了贴壁细胞，MNC体外培养可以获得贴壁细胞，但形态不均一，主要为破骨样细胞和纤维样细胞，传代不超过二次。分离12份骨髓，均获得了贴壁细胞，MNC体外培养可以获得形态均一的纤维样间充质干细胞（MSC），可多次传代。[结论] 脐血不能获得典型的间充质样干细胞，骨髓中存在典型的间充质干细胞。     

骨髓间充质干细胞经不同时间成骨细胞诱导后细胞性质比较

目的 探讨骨髓间充质干细胞经成骨细胞诱导不同时间后的细胞性质。方法 成人骨髓分离单个核细胞（MNC）,体外培养获得间充质干细胞（MSC）,传至第4代后加入地塞米松（DEX）、抗坏血酸和β-甘油磷酸,诱导成骨分化。诱导7d和14d后的细胞与正常成人成骨细胞分别加入不同浓度骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和DEX,48h后检测细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性和骨钙素（OCN）的含量。结果 BMP-2和DEX对诱导7d后的细胞有明显的刺激增殖和ALP活性的作用;对诱导14d后的细胞,BMP-2和DEX都不能刺激细胞增殖和ALP活性,但OCN含量明显增加。正常成人成骨细胞对BMP-2和DEX作用的反应与诱导14d的成骨样细胞基本一致,但其OCN绝对含量明显高于MSC来源的成骨细胞。结论 骨髓MSC向成骨诱导7d和14d后细胞分化程度不同。诱导时间在MSC的成骨分化中是一个非常关键的因素,但其机制和最佳诱导时间尚需进一步研究。诱导14d后的MSC的成骨活性低于正常成人成骨细胞。     

从骨髓和脐血造血干细胞中诱导成骨样细胞

骨髓有2个重要的功能:造血和成骨。骨髓中存在造血干细胞(hem atopoietic stem cells,HSCs)(CD34 细胞)和间充质干细胞(m esenchym al stem cells,MSCs)。这2种干细胞共同存在于骨髓腔中,MSC对HSC不仅有空间位置的机械支持作用,还分泌多种造血因子支持其造血功能,有助于HSC未分     

从脐血和骨髓中诱导成骨样细胞的体外研究

目的：探讨脐血和骨髓单个核细胞(monocytes，MNC)体外培养过程中的生长特性及诱导贴壁细胞向成骨细胞分化。方法：分离脐血和骨髓MNC，按培养基不同分成3组：分别为Mesencult^TM无血清培养基。CellGRO培养基 100mL／L胎牛血清。DMEM／F12培养基 100mL／L FBS。体外培养以获得贴壁细胞。观察不同培养条件下细胞扩增的效果。获得的贴壁细胞培养基中加入地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸，诱导细胞向成骨细胞分化。检测诱导后细胞成骨细胞标志物碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原和骨钙素的表达。结果：脐血和骨髓MNC在含有血清的培养基中可以获得更多的贴壁细胞。骨髓MNC贴壁细胞形态均一，呈典型的成纤维细胞样，而脐血贴壁细胞未获得典型的成纤维细胞样细胞，混有大量的圆形细胞。骨髓中获得的细胞可以持续传代10代以上仍保持良好的增殖状态；脐血贴壁细胞最多可以传代2次，细胞总数和纤维样细胞均逐代减少。诱导后的脐血和骨髓细胞均呈碱性磷酸酶阳性，免疫组化染色显示Ⅰ型胶原和骨钙素表达阳性。结论：骨髓MNC体外培养可以获得典型的间充质干细胞且可以持续多代扩增，向成骨细胞诱导后，形态和标志物检测都呈典型的成骨细胞样。脐血MNC体外培养可获得贴壁细胞，但不呈间充质干细胞样，向成骨细胞诱导后，虽形态与成骨细胞不相似，但成骨细胞的标志物表达均呈阳性。     

酶法测血清中硝酸盐浓度及初步临床应用

酶法测血清中硝酸盐浓度及初步临床应用天津医科大学医学检验系常成林天津医科大学口腔医院程瑞芳天津医科大学第二医院吕津英李忠信硝酸盐（ＮＯ３）和亚硝酸盐（ＮＯ－２）是一氧化氮（ＮＯ）的代谢产物，其浓度反映体内ＮＯ的生成情况，检测方法有Ｇｒｉｅｓｓ法［１］...     

人骨形成蛋白2和地塞米松对不同来源成骨细胞的作用

目的：观察不同浓度的人骨形成蛋白2(BMP-2)和地塞米松(DEX)对3种来源成骨细胞的作用，并比较其特性。方法：体外培养胰酶消化法所得的正常成人的成骨细胞，成骨样细胞系和由骨髓单个核细胞(MNC)经DEX诱导7d后所得的成骨细胞，经不同浓度的BMP-2和DEX处理，观察细胞形态，并进行MTT试验和测定细胞裂解液的碱性磷酸酶(ALP)。结果：对正常成人的成骨细胞，BMP-2处理48h，72h对第4代和第8代的细胞无明显促增殖和分化作用；DEX作用48h和72h促第4代细胞增殖且表达ALP明显增加，DEX浓度为10^-8mol／L时其促增殖和分化的效果最佳，DEX对第8代细胞无明显作用。对成骨样细胞系BMP-2促增殖作用不明显，DEX处理48，72h后明显促其增殖；BMP-2及DEX作用72h后ALP表达明显增加，当作用于源自骨髓MNC的成骨细胞48，72h均促其增殖和分化。结论：BMP-2和DEX对不同成骨细胞的效应因细胞来源和作用时间不同而有差别。     

口腔扁平苔藓与肝病关系的调查

目的 研究口腔扁平苔藓的发生。发展与肝炎病毒感染之间的关系。方法 对106例肝病患者进行口腔粘膜检查，对60例口腔扁平苔藓患者进行肝炎病毒抗体检测和肝功能检测。并对20例患者血样进行丙型肝炎病毒RNA的PCR检测。结果 106例肝病患者未发现口腔扁平苔藓体征，60例口腔扁平苔藓患者中，乙型肝炎病毒表面抗原阳性7例，未发现丙型肝炎病毒抗体阳性，肝功能正常，口腔扁平苔藓患者丙型肝炎病毒RNA片段PCR检测，未发现阳性。结论 口腔扁平苔藓的发生发展与肝炎病毒感染和肝功能异常没有直接关系。