3-methyladenine抑制自噬诱导胰腺癌细胞SW1990失巢凋亡

【目的】 探讨3-methyladenine(3-MA)对人胰腺癌SW1990细胞增殖?迁移及失巢凋亡的影响作用及其机制?【方法】 以胰腺癌细胞SW1990及永生化胰腺导管上皮细胞H6C7为研究对象,设3-MA处理组及PBS对照组,采用软琼脂克隆培养法及Poly-HEMA悬浮培养法筛选抵抗失巢凋亡的细胞?Annexin V-FITC/PI双染和TUNEL试剂盒法检测细胞凋亡;免疫荧光法及透射电镜检测细胞自噬;CCK-8法检测细胞增殖; Transwell小室检测细胞迁移能力?【结果】永生化胰腺导管上皮细胞H6C7处理组及对照组均无集落形成,胰腺癌细胞SW1990处理组形成(2.3 ± 2.63)个集落,对照组形成(9 ± 3)个,与H6C7 相比,SW1990具有较强的抵抗失巢凋亡的能力 (P < 0.05)?3-MA可抑制胰腺癌SW1990细胞自噬(P < 0.05)并抑制其增殖及迁移能力(P < 0.01)且诱导失巢凋亡(P < 0.01)?【结论】 3-MA可诱导胰腺癌细胞SW1990失巢凋亡,其机制可能与细胞自噬受抑有关?     

超声造影定量分析评估克罗恩病炎症活动程度的应用价值

目的探讨超声造影（CEUS）定量分析评估克罗恩病（CD）炎症活动程度的应用价值。 方法回顾性分析2014年2月至8月于中山大学附属第六医院就诊或随访的55例经临床、内镜、病理综合诊断的CD患者。以血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平为诊断金标准,评价能量多普勒（PDI）Limberg分级、CEUS增强模式及定量分析参数［峰值强度（PI）、上升时间（RT）、达峰时间（TTP）］评估CD炎症活动程度的价值。采用独立样本t检验比较炎症活动期与炎症非活动期CD患者CEUS定量分析参数PI、RT及TTP;以hs-CRP水平作为诊断金标准,分别绘制PDI技术、CEUS增强模式、CEUS定量分析参数PI、RT及TTP诊断CD炎症活动程度的受试者工作特征（ROC）曲线,并采用χ²检验比较曲线下面积。 结果hs-CRP水平显示,本组55例CD患者中,炎症活动期39例,炎症非活动期16例。以hs-CRP水平作为诊断金标准,PDI技术诊断CD炎症活动程度的Youden指数为0.49,CEUS增强模式诊断CD炎症活动程度的Youden指数为0.25;炎症活动期CD患者PI高于炎症非活动期CD患者［（22.7±3.4）dB vs（18.5±3.7）dB］,而炎症活动期CD患者RT及TTP均短于炎症非活动期CD患者［（6.1±1.6）s vs（7.4±3.0）s,（7.5±1.9）s vs（9.3±2.9）s］,且差异均有统计学意义（t=-4.1,P<0.001;t=2.1,P<0.05;t=2.8,P<0.01）;ROC曲线显示,CEUS定量分析参数PI、RT、TTP诊断CD炎症活动期的阈值分别为19 dB、6.2 s、8.7 s,Youden指数分别为0.56、0.39和0.45;PDI技术、CEUS增强模式、CEUS定量分析参数PI、RT、TTP诊断CD炎症活动程度的曲线下面积分别为0.74、0.62、0.82、0.65、0.74。CEUS定量分析参数PI诊断CD炎症活动程度的曲线下面积大于CEUS增强模式诊断CD炎症活动程度的曲线下面积,且差异有统计学意义（P=0.03）,而其余曲线下面积两两比较差异均无统计学意义。 结论CEUS定量分析评估CD炎症活动程度的能力优于CEUS定性分析,与传统PDI Limberg分级方法无显著差异。且CEUS定量分析技术客观可靠,不易受检查者的主观影响,值得临床推广应用。     

超声引导下胃肠道病变穿刺活检

目的探讨超声引导下胃肠道病变穿刺活检的临床应用价值。方法对30例经肠镜、CT或MRI检查发现但未能明确诊断的胃肠道病变(胃来源2例、小肠4例、结肠4例、直肠18例、肛管2例)进行超声引导下穿刺活检,总结活检方法、成功率及相关并发症。结果 30例中,经腹穿刺10例,经直肠穿刺16例,经肛周穿刺4例。标本取材满意29例,目标病灶穿刺成功率96.67%(29/30)。29例取材成功者中,活检病理提示良性病变11例,恶性病变18例,其中7例手术切除,6例活检病理与手术病理相符,1例活检病理不能鉴别未分化癌与间皮瘤,手术病理证实为未分化癌,其余病例与随访结果相符。穿刺后随访1~18个月,所有患者均未出现穿刺相关并发症。结论对于胃肠道病变,尤其是内镜活检困难或无效的病变,超声引导穿刺活检是安全、有效的诊断方法。     

反义miR-196a对人胰腺癌PANC-1细胞侵袭和迁移的抑制作用

目的:探讨微小RNA-196a(miR-196a)在胰腺癌细胞系中表达状况及反义miR-196a对人胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响。方法:miR-196a采用实时荧光定量PCR检测。人工化学合成反义miR-196a并转染PANC-1细胞。CCK-8法检测细胞增殖。流式细胞术检测细胞凋亡情况。通过划痕损伤实验和Transwell小室细胞侵袭、迁移实验检测PANC-1细胞侵袭和迁移能力。构建野生型及突变型核因子κB抑制蛋白α(NFKBIA)3'UTR的萤光素酶报告载体,检测海肾萤光素酶的相对活性以验证miR-196a对NFKBIAmRNA的作用靶点。结果:人胰腺癌细胞系中miR-196a呈高表达;转染反义miR-196a后,PANC-1细胞miR-196a表达下降,其细胞增殖和凋亡无显著改变(P>0.05);而转染反义miR-196a组中通过Transwell小室的细胞数明显低于各对照组(P<0.01)。与各对照组相比,共转染野生型NFKBIA的3'UTR和反义miR-196a可使海肾萤光素酶相对活性显著提高。结论:miR-196a可能是癌微RNA(oncomiR)之一,有望成为人胰腺癌基因治疗的候选靶点。     

微小RNA-143对人胰腺癌PANC-1细胞迁移的抑制作用及其机制的探讨

目的:探讨微小RNA(microRNA,miR)-143对人胰腺癌PANC-1细胞生物学特性的影响。方法:人工合成miR-143的模拟物,并通过LipofectAMINE2000转染入PANC-1细胞。采用实时荧光定量PCR法检测miR-143的表达水平。采用MTT法和FCM法检测对细胞增殖及凋亡的影响,采用Transwell小室和划痕实验检测对PANC-1细胞迁移能力的影响。构建野生型及突变型转化生长因子β活化激酶1[transforming growth factor(TGF)-β activated kinase 1,TAK1]的3’端非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)双荧光素酶报告载体,检测海肾荧光素酶的相对活性以验证miR-143对TAK1mRNA的作用靶点。结果:转染miR-143模拟物后,PANC-1细胞中miR-143表达上调,但其细胞增殖及凋亡与转染前的差异无统计学意义(P>0.05)。转染miR-143组通过Transwell小室的细胞数明显低于各对照组,划痕实验检测结果显示细胞迁移能力受到抑制(P<0.05)。与各对照组相比,共转染野生型TAK1的3’-UTR和miR-143可使海肾荧光素酶相对活性显著降低。结论:miR-143对人胰腺癌PANC-1细胞的迁移能力有抑制作用,TAK1可能是其靶基因之一。     

超声检查对不同病理类型阑尾炎的诊断价值

目的探讨超声检查对不同病理类型阑尾炎的诊断价值。 方法分析2012年6月至2013年12月中山大学附属第六医院经手术病理证实为阑尾炎且术前行超声检查的111例患者的超声表现。其中急性单纯性阑尾炎6例,急性化脓性阑尾炎45例,急性坏疽性阑尾炎15,慢性阑尾炎33例,慢性阑尾炎急性发作12例。采用Kruskal-Wallis检验比较不同病理类型阑尾炎患者术前超声测量的阑尾长度、宽度、管壁厚度,进一步组间两两比较采用Kruskal-Wallis检验;采用Fisher确切概率法比较不同病理类型阑尾炎患者超声表现差异,进一步组间两两比较采用Fisher确切概率法。 结果111例手术病理证实为阑尾炎的患者中,90例患者术前超声检查提示阑尾炎,超声诊断准确率为81.08%（90/111）。急性单纯性阑尾炎、急性化脓性阑尾炎、急性坏疽性阑尾炎、慢性阑尾炎、慢性阑尾炎急性发作患者术前超声诊断准确率分别为83.33%（5/6）、91.11%（41/45）、93.33%（14/15）、60.61%（20/33）、83.33%（10/12）。不同病理类型阑尾炎患者术前超声测量的阑尾长度差异无统计学意义,但急性坏疽性阑尾炎患者术前超声测量的阑尾宽度均大于急性单纯性阑尾炎、慢性阑尾炎患者,且差异均有统计学意义[（13.79 ± 4.48） mm vs（7.60 ± 1.52） mm,χ²=4.211,P=0.024;（13.79 ± 4.48） mm vs（9.35 ± 5.01） mm,χ²=4.071,P=0.033];急性化脓性阑尾炎、急性坏疽性阑尾炎患者管壁厚度均大于慢性阑尾炎患者,且差异均有统计学意义[（4.39 ± 1.42） mm vs（3.37 ± 0.93） mm,χ²=3.931,P=0.043;（4.81 ± 1.57） mm vs（3.37 ± 0.93） mm,χ²=4.274,P=0.021]。不同病理类型阑尾炎患者的超声表现在管腔内粪石、淋巴结肿大和合并包块方面差异均无统计学意义。在管壁层次不清及管腔扩张两方面,急性化脓性阑尾炎、急性坏疽性阑尾炎与慢性阑尾炎患者的超声表现差异均有统计学意义[管壁层次不清：91.11%（41/45） vs 54.55%（18/33）,P=0.003;93.33%（14/15） vs 54.55%（18/33）,P=0.045。管腔扩张：64.44%（29/45） vs 27.27%（9/33）,P=0.007;80.00%（12/15） vs 27.27%（9/33）,P=0.007];在合并阑尾区积液方面,急性坏疽性阑尾炎与慢性阑尾炎患者的超声表现差异有统计学意义[53.33%（8/15）vs 6.06%（2/33）,P=0.006]。 结论超声检查对阑尾炎尤其是急性化脓性和急性坏疽性阑尾炎有较高的诊断价值。超声测量阑尾宽度、管壁厚度及对管壁层次、管腔扩张程度及阑尾区有无积液等特征的观察对鉴别诊断慢性阑尾炎与急性化脓性阑尾炎、急性坏疽性阑尾炎有一定的价值;阑尾宽度对鉴别诊断急性坏疽性阑尾炎与急性单纯性阑尾炎有意义。超声检查对鉴别诊断急性化脓性与急性坏疽性阑尾炎、急性单纯性阑尾炎与慢性阑尾炎及慢性阑尾炎急性发作的价值有限。     

经直肠超声术前评估直肠癌累及直肠系膜筋膜

目的 探讨经直肠超声（ERUS）术前评估直肠癌累及直肠系膜筋膜（MRF）的价值。方法 44例直肠癌患者术前均接受ERUS检查,其中18例接受新辅助放化疗,26例未接受;所有患者于接受ERUS检查后1周内行全直肠系膜切除手术（TME）。以术后病理诊断环周切缘（CRM）的结果为金标准,判断ERUS术前评估直肠癌累及MRF的诊断效能。结果 44例患者中,术后病理诊断T1期2例,T2期17例,T3期25例;CRM阳性2例,CRM阴性42例。低位直肠癌16例,中位直肠癌28例。肿瘤位于前壁和前侧壁26例,后壁和后侧壁13例,累及肠壁全周5例。ERUS对术前接受和未接受新辅助放化疗的患者诊断准确率分别为83.33%（15/18）和92.31%（24/26）;肿物位于前壁和前侧壁时,诊断准确率为80.77%（21/26）,而肿物位于后壁和后侧壁时为100%（13/13）;对于低位和中位直肠癌,诊断准确率分别为75.00%（12/16）和96.43%（27/28）;总准确率为88.64%（39/44）。结论 ERUS是术前评估直肠癌是否累及MRF的有效辅助检查方法。     

经直肠超声与体部线圈磁共振检查对直肠癌T分期的比较研究

目的比较经直肠超声(ERUS)和体部线圈MRI对直肠癌T分期诊断准确性。方法回顾性分析31例术前未接受新辅助放化疗的直肠癌患者,对所有患者均于术前1周行ERUS和MR检查、后行一期手术切除。以术后病理结果作为金标准,比较ERUS和MRI对直肠癌T分期的诊断效能。结果 31例患者中,术后病理诊断T1期7例,T2期6例,T3期18例。ERUS显示病变累及肠管长度约(28.18±13.30)mm,MRI显示约为(35.58±18.24)mm,二者差异有统计学意义(t=3.497,P=0.002),但两种检查所测得病变下缘距肛门距离、病灶厚度的差异均无统计学意义(P均>0.05)。ERUS诊断直肠癌T1、T2、T3、T4期的准确率分别为93.55%,93.55%,87.10%和100%,总准确率为93.55%;MRI诊断直肠癌T1、T2、T3、T4期的准确率分别为87.10%,70.97%,64.52%和93.55%,总准确率为79.03%;ERUS、MRI诊断的直肠癌各期以及总准确率的差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 ERUS和MRI均为直肠癌术前分期诊断的可靠检查方法,ERUS对于T分期的准确性稍高于MRI。