人大隐静脉平滑肌细胞体外培养及其生长特性分析

目的：探讨人血管平滑肌细胞（VSMC）体外培养方法及其生长的特性。 方法：采用组织块贴壁结合酶消化法培养人大隐静脉VSMC并传代,以形态学观察、免疫荧光染色法、考马斯亮蓝染色法鉴定细胞;以台盼蓝染色法、四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、绘制生长曲线、划痕法测定细胞成活率、增殖及迁移能力。 结果：原代培养5~7 d细胞从组织块爬出,传代细胞呈“峰-谷”样生长;胞质内α-平滑肌肌动蛋白免疫荧光染色阳性;考马斯亮蓝染色可见VSMC细胞骨架呈致密束状;传代细胞成活率为97%;生长曲线呈类“S”形;细胞生长3~6 d内光密度值变化明显;无血清培养的VSMC在24 h内划痕宽度变化显著。 结论：体外培养的VSMC纯度高,结构、功能良好,为收缩表型,细胞生长第3~6天增殖活力较强,24 h内迁移能力最强。     

RhoA/SRF信号通路介导Nelin诱导人血管平滑肌细胞表型转化

目的 探讨Nelin基因对人血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)表型转化的调控机制.方法 应用过表达慢病毒载体[Nelin-VSMC]及干扰慢病毒载体[LV-Nelin-SiRNA-VSMC]制备稳定转染的VSMC细胞模型,通过荧光定量PCR以及蛋白质印迹分析(Western blotanalysis,WB)等技术手段,观察Nelin蛋白过表达及表达抑制对人VSMC表型转化的影响及其调控机制.结果 Nelin-VSMC组细胞呈收缩表型,细胞细长,成“谷-峰”样生长,Nelin mRNA、Nelin蛋白和平滑肌分化标志蛋白平滑肌α-肌动蛋白(SMoα-actin)表达显著增加,同时SMα-actin相关调控因子-血清反应因子(SRF)入核转位,RhoA总蛋白表达上调,经Rho激酶特异性抑制剂Y-27632作用后,SRF在细胞核中表达显著减少,同时SMα-actin表达下调;LV-Nelin-SiRNA-VSMC组细胞呈合成表型,细胞体积变大,细胞极性消失,生长状态无序,Nelin mRNA、Nelin蛋白和SMα-actin蛋白表达显著降低,同时伴有SRF出核转位及RhoA总蛋白表达下调.结论 在体外培养的人VSMC中,Nelin依次激活SMα-actin蛋白相关调控因子RhoA和SRF引起SMα-actin表达增加,促进VSMC向收缩表型转换.     

肝硬变门静脉高压症脾切除对免疫功能的影响

目的:探讨门静脉高压症患者切除脾脏时免疫功能的影响。方法:采集126例门静脉高压症患者的肝素防凝血,正常对照组30例,利用Epics-XL型流式细胞仪分析测定T淋巴细胞亚群。结果:门静脉高压症患者较正常人细胞免疫功能明显降低,CD3,CD4,CD4/CD8的比值均降低,有非常显著意义(P<0.001)。保脾组手术后CD3值较手术前明显升高(P<0.05)。保脾组与切脾组手术后CD3值有明显差别(P<0.02)。保睥和切脾手术前后的体液免疫指标无明显差别。结论:门静脉高压症的保脾手术可维持机体较高的细胞免疫功能,但对体液免疫无意义。     

改良大隐静脉高位结扎并剥脱术治疗原发性大隐静脉曲张78例分析

目的探讨改良大隐静脉高位结扎并剥脱术的治疗效果。方法78例原发性大隐静脉曲张患者随机分为2组。A组：采用经典大隐静脉高位结扎并剥脱术；B组：采用改良大隐静脉高位结扎并剥脱术。即行大隐静脉高位结扎前仅切断并结扎股内侧与股外侧属支，其余属支保留。距最近属支约0．5cm处钳夹切断大隐静脉，近断端行缝扎后结扎；远断端通入剥脱器逐段剥脱直至内踝前方大隐静脉起始处。小腿段曲张静脉团另切口剥脱，切断并结扎交通支。术后给予弹性绷带加压包扎。结果B组手术时间（平均65min）明显短于A组（平均90min），两组比较差异有统计学意义（u=2.008，P〈0．05）。两组均无切口感染。但B组切口瘢痕小，美容效果满意。随访2年，两组均无复发。结论改良大隐静脉高位结扎并剥脱术与经典大隐静脉高位结扎并剥脱术在治疗效果上相同，但改良法具有简单、省时、创伤小等优点。     

迈之灵治疗下肢深静脉瓣膜功能不全疗效观察

目的 探讨深静脉血栓后下肢静脉瓣膜功能不全的有效治疗方法和疗效.方法 回顾性分析2003年2月至2010年1月门诊长期随访266例下肢深静脉瓣膜功能不全患者的临床资料.结果 266例患者经过2个月的迈之灵药物治疗,超过90％患者肢体肿胀减轻和消退,其中141例(53.0％)患者152条肢体(54.3％)]的腿围减少值＞2 cm,最大改善达到5 cm;119例(44.7％)患者120条肢体(42.9％)]的腿围减少值在1 ～2 cm;其余的6例(8条肢体)的腿围较治疗前没有显著的改善.溃疡的改善:34例患者的溃疡情况均有一定程度改善,有24例溃疡成功愈合,其余10例也均有不同程度溃疡面缩小,同时无新发溃疡出现.结论 服用迈之灵可有效改善深静脉血栓性静脉炎后遗症患肢的肿胀和肢体溃疡,用于门诊治疗CVI安全而有效.     

改良大隐静脉高位结扎并剥脱术治疗原发性大隐静脉曲张78例分析

目的探讨改良大隐静脉高位结扎并剥脱术的治疗效果.方法78例原发性大隐静脉曲张患者随机分为2组.A组:采用经典大隐静脉高位结扎并剥脱术;B组:采用改良大隐静脉高位结扎并剥脱术.即行大隐静脉高位结扎前仅切断并结扎股内侧与股外侧属支,其余属支保留.距最近属支约0.5 cm处钳夹切断大隐静脉,近断端行缝扎后结扎;远断端通入剥脱器逐段剥脱直至内踝前方大隐静脉起始处.小腿段曲张静脉团另切口剥脱,切断并结扎交通支.术后给予弹性绷带加压包扎.结果B组手术时间(平均65 min)明显短于A组(平均90min),两组比较差异有统计学意义(u=2.008,P＜0.05).两组均无切口感染.但B组切口瘢痕小,美容效果满意.随访2年,两组均无复发.结论改良大隐静脉高位结扎并剥脱术与经典大隐静脉高位结扎并剥脱术在治疗效果上相同,但改良法具有简单、省时、创伤小等优点.     

腔内介入联合手术治疗急性下肢动脉缺血的临床探讨

目的:探讨腔内介入联合手术治疗急性下肢动脉缺血的临床价值。方法:根据患者的症状、体征、踝肱指数和影像学表现等,采用Forgaty导管取栓、置管溶栓、球囊扩张、支架植入等中的一种或多种方法治疗下肢动脉缺血。结果:37例中单纯取栓12例,置管溶栓8例,取栓+置管溶栓5例,取栓+经皮血管腔内血管成形术(percutaneous transluminal angioplasty,PTA)2例,取栓+PTA+支架术8例,溶栓+支架术2例,成功率100%。肢体疼痛麻木缓解、皮温变暖34例(92%)。疗效为优22例(59%),良好10例(27%),一般2例(5%),不良3例(8%)。1例腘动脉瘤溶栓后缺血加重截肢,2例取栓后第1足趾干性坏疽。术后无严重并发症;术后随访6~24个月,其中1例死于心肌梗死,7例失访,余术侧肢体均无缺血复发症状。结论:腔内介入联合手术是治疗急性下肢动脉缺血的有效方法,严格把握其适应证是提高疗效的关键。     

再论布-加综合征介入治疗的应用

目的进一步分析布-加综合征（BCS）介入治疗的选择及其疗效。方法对65例患者行球囊扩张或/和支架植入术。术后对患者进行随访,最长随访时间已达10年。结果全部患者恢复顺利,术后1周下肢肿胀明显减轻,肝脾不同程度缩小,胸腹壁静脉曲张明显好转。随访证实患者术后远期疗效均良好。结论介入治疗是治疗BCS的首选,应用过程中应重视适应证选择、手术操作及并发症的预防。     

肝硬化门脉高压症患者肝功能分级、与肝组织中一氧化氮和一氧化氮合酶含量的探讨

目的探讨肝硬化门脉高压症患者肝组织中一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）与肝功能分级的关系。方法用硝酸还原酶化学比色法,检测56例肝硬化门脉高压症患者（按肝功能Child分级标准分为A、B、C级三组）及19例正常对照组肝组织中的NO含量和NOS活性,分析其与肝功能分级的相关性。结果肝硬化门脉高压组肝组织中NO含量分别为（0．851±0．141）μmol／g．plot、（1．059±0．211）p．mol／g．prot、（1．987±0．566）μmol／g．prot。？NOS活性分别为（0．701±0．105）U／mg．prot,（0．861±0．118）U／mg．prot,（1．414±0．241）U／mg．prot,均高于正常对照组[（0．211±0．099）μmol／g．pmt,（0．282±0．086）U／mg．prot],且与肝功能Child分级呈正相关（r=0．847）。结论肝硬化门脉高压组患者肝组织中NO含量较正常对照组明显增加,NOS活性显著增强,与肝功能Child分级呈正相关。