阿尔茨海默病差异表达基因的生物信息学分析

目的：应用生物信息学方法分析阿尔茨海默病(Alzheimer,s disease,AD)不同病情程度的差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）,在分子水平上探讨AD的发病制,为研究AD提供新思路。方法：从基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)下载基因芯片数据集GSE28146,使用在线分析工具GEO2R分别筛选AD轻度组、中度组和重度组与正常对照组比较的DEGs。运用DAVID 数据库对筛选出的DEGs进行基因本体（gene ontology,GO）富集分析和京都基因与基因百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路分析,通过STRING数据库构建蛋白相互作用网络,并采用Cytoscape软件筛选关键基因。结果：AD轻度组、中度组和重度组分别筛选出881、896和1142个DEGs。GO功能富集显示：轻度组与凋亡相关过程的激活、调节免疫反应、蛋白质磷酸化等生物过程密切相关,中度组与炎症反应、凋亡调节、钙离子的释放等生物过程密切相关,重度组与NF-κB的激活、蛋白质磷酸化和去磷酸化、细胞外基质的降解等生物过程密切相关。KEGG分析显示：轻度组主要富集到p53和TGF-β等信号通路,中度组主要富集到癌症途径、自然杀伤细胞介导的细胞毒性、细胞黏附分子等信号通路,重度组主要富集到细胞周期、Hippo信号通路、神经活性配体-受体相互作用等信号通路。蛋白互作网路分析各组富集程度最高的前5个关键基因：轻度组为GART、EHMT2、KRAS、ESR1、CD44;中度组为CBLB、HERC1、UBE2G1、UBE2M、HECW2;重度组为UBE2C、SOCS3、FBXW7、UBE3B、UBA6。结论：采用生物信息学方法分析不同病情程度的AD,所富集的信号通路和筛选出的关键基因可能在AD发生发展过程中起重要作用,为进一步深入研究AD提供了依据和思路。     

吴茱萸碱逆转K562/Adr细胞多药耐药的实验研究

目的 探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对白血病K562细胞及其耐药株K562/Adr的增殖、细胞周期及多药耐药性(MDR)的影响。方法用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测EVO和/或柔红霉素(DNR)对细胞增殖的影响,并计算耐药指数(RI)和逆转倍数(RF);流式细胞仪检测EVO和/或DNR对K562及K562/Adr细胞周期的影响;流式细胞仪检测K562及K562/Adr细胞内DNR的荧光强度;定量PCR检测K562及K562/Adr细胞中MDR1基因的表达;Western blotting检测K562及K562/Adr细胞中MDR1、BCRP蛋白的表达。结果EVO、DNR作用于K562和K562/Adr细胞后,细胞增殖受到抑制,且呈剂量和时间依赖性;与K562细胞相比,K562/Adr细胞对DNR的RI为30.54,K562/Adr细胞对EVO的RI为19.09。当EVO(0.125 gmol/L)与不同浓度DNR联合作用后,能使DNR对K562/Adr细胞的IC_(50)明显下降,DNR+EVO对K562/Adr细胞的RF为12.07;EVO、DNR单独或联合作用于K562及K562/Adr细胞后,能够使K562/Adr细胞BCRP、MDR1蛋白及mRNA表达水平均明显下降。结论EVO能有效逆转白血病K562/Adr细胞对DNR的耐药现象,而这种作用可能与EVO通过减少细胞膜上多药耐药蛋白MDR1的表达有关。     

一种苦瓜皂甙的分离纯化及结构推断

通过正相硅胶色谱和反相硅胶柱色谱从苦瓜中分离得到一种物质,定性检验该物质为苦瓜皂甙,薄层色谱检验为单一化合物,反相高效液相色谱鉴定其纯度为98.45%.进一步用质谱对其分子结构进行初步推断,这种皂甙是一个连有2个糖基的母核荷质比为491、相对分子质量为815的皂甙.     

吴茱萸碱抑制荷瘤小鼠结肠癌HCT-116细胞增殖

目的研究吴茱萸碱(Evo)对人结肠癌荷瘤Balb/c裸鼠HCT-116细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法用HCT-116细胞接种到4周龄的Balb/c裸小鼠右下腋部,待荷瘤直径约0.5 cm后用灌胃针灌入Evo(3 mg/kg)进行治疗,每3 d测瘤体直径及小鼠质量,绘制质量曲线及瘤体体积曲线,灌喂22 d后处死,取瘤体组织;HE染色法验证Balb/c裸鼠瘤体的成瘤情况;免疫组化检测瘤体HDAC3、NF-κB、p53的表达;Westernblot检测瘤体组蛋白去乙酰化酶HDAC3、NF-κB、p53的变化。结果 Evo灌喂组小鼠的瘤体体积和瘤体质量明显小于对照组,质量较对照组重;Evo灌喂组肿瘤细胞皱缩,胞核深染,较对照组核分裂像明显减少;经吴茱萸碱处理的裸鼠的瘤体中NF-κB、p53表达量较对照组增高,HDAC3则反之(P0.05)。结论吴茱萸碱可以通过下调HDAC3来影响NF-κB及p53蛋白的表达,抑制人结肠细胞系HCT-116的体内增殖。     

耳炎苏黎士菌脓毒症抗感染治疗1例

耳炎苏黎士菌为少见条件致病菌, 常定植于皮肤和外耳道, 多引起中耳炎, 血流感染病例罕见。本文报告1例耳炎苏黎士菌脓毒症合并重症肺炎病例及其抗感染治疗过程, 旨在提高临床对耳炎苏黎士菌血流感染的认识, 并为临床治疗提供参考。     

HPLC测定生脉注射液中五味子醇甲的含量

目的：为制订生脉注射液质量标准。方法：采用高效液相色谱法测定生脉注射液中五味子醇甲的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,甲醇－水（６５：３５）为流动相,紫外检测波长２５４ｎｍ进行测定,柱温３０℃,流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ。结果：方法的平均加样回收率１００．４％,ＲＳＤ－０．７０％。Ｙ＝１９５４．２＋１８７２０．２Ｘ,ｒ＝０．９９９９,五味子醇甲在０．１～０．５ｕｇ范围内呈良好的线性关系。结论：结果     

银杏叶耐缺氧功能研究

通过小鼠常压耐缺氧试验,亚硝酸钠中毒存活和急性脑缺血缺氧试验,对银杏叶的耐缺氧功能进行评价,结果表明:银杏叶可明显延长常压缺氧条件下的小鼠存活时间,延长亚硝酸钠中毒后的小鼠存活时间,明显延长断头小鼠的喘气时间.说明银杏叶具有显著的耐缺氧作用.     

人参皂苷Rh_2促进K562细胞自噬凋亡的体内实验研究

该实验为研究人参皂苷Rh_2对人白血病细胞体内抑制作用,并从自噬凋亡角度来探讨其机制。采用人白血病K562细胞异体移植瘤模型,灌胃人参皂苷Rh_2后,测取肿瘤直径、体积、抑瘤率,观察人参皂苷Rh_2的抗肿瘤活性;化学发光法检测瘤组织HDAC和HAT活性;Western blotting法检测HDAC1,HDAC2,HDAC3,HDAC4,HDAC5,HDAC6的表达;Real-time PCR法检测自噬重要基因和HDAC6,Hsp90的mRNA表达水平;HE染色观察细胞凋亡,免疫组化法检测HDAC6,Hsp90和激活型的caspase 3蛋白表达水平。结果显示,人参皂苷Rh_2能抑制K562细胞异体移植瘤的生长,抑制率达53.10%;人参皂苷Rh_2能明显降低HDAC活性和降低HDAC1,HDAC2,HDAC6表达;人参皂苷Rh_2能抑制HDAC6和Hsp90表达,并增加自噬重要基因beclin-1,LC3A和LC3B表达;组织病理学结果显示人参皂苷Rh_2可明显增加肿瘤细胞凋亡。人参皂苷Rh_2具有较好的体内抗肿瘤作用,可能通过HDAC6,Hsp90通路调节自噬凋亡,抑制肿瘤细胞在体内增殖。     

药推结合治疗小儿反复呼吸道感染缓解期临床体会

根据小儿反复呼吸道感染缓解期的临床表现特点,认为该病是由正气不足、失治误治或调护不当等所致。采用辨证用药与辨证施推结合治疗,疗效显著,值得推广。     

苦瓜提取物中降血糖皂甙的筛选

苦瓜皂甙经过提取,正丁醇和乙酸乙酯萃取,把苦瓜提取物按照极性分为3个组分,分别为:乙酸乙酯相(MCE-A),正丁醇相(MCE-B)和水相(MCE-C).动物实验表明,对正常小鼠和糖尿病小鼠,MCE-B具有较显著的降血糖作用,而MCE-A和MCE-B降糖效果不明显.组分分析表明,苦瓜正丁醇萃取相含有45．51%的皂甙成分.