HPLC法同时测定大鼠肝微粒中原儿茶酸和香草酸的含量

目的：建立测定大鼠离体肝微粒中儿茶酚氧甲基转移酶（ COMT）底物（原儿茶酸）和代谢产物（香草酸）含量的HPLC法。方法离体肝微粒体样品经酸化后,乙酸乙酯提取。以绿原酸作为内标,色谱柱为 Welchrom C18,流动相为甲醇：0.1％磷酸＝25：75,流速为1 ml/min,检测波长为260 nm、326 nm,柱温30℃,进样量20μl。结果原儿茶酸和香草酸分别在0.5-20μg/ml和0.375-15μg/ml范围内线性关系良好,r≥0.9995;原儿茶酸的日内精密度和日间精密度RSD≤13.2％,方法回收率为90.3％-115.4％,提取率≥94.9％;香草酸的日内精密度和日间精密度RSD≤8.5％,方法回收率为93.4％-103.1％,提取回收率≥88.5％。结论该方法灵敏、简便、准确,可用于大鼠肝微体中COMT活性的测定。     

姜黄素乙醇脂质体大鼠体内药代动力学研究

【摘要】 目的 考察大鼠体内姜黄素乙醇脂质体的药动学特点。方法 大鼠灌胃给药,高效液相色谱法测定各血药浓度,采用DAS 2.1.1软件处理并分析药动学数据。结果 在非室模型分析中,经计算姜黄素乙醇脂质体的0~72 h曲线下面积〔AUC （0-72 h）〕为游离姜黄素的1.6倍,其峰浓度C max为游离姜黄素的1.5倍,姜黄素乙醇脂质体的相对生物利用度为152.2%,姜黄素乙醇脂质体的AUC （0-72 h）的90%可置信区间为102.2%~128.5%,不在生物等效性标准区间内。在室模型分析中,姜黄素乙醇脂质体的AUC （0-72 h）为游离姜黄素的1.4倍,姜黄素乙醇脂质体的相对生物利用度为128.2%。结论 姜黄素乙醇脂质体可提高口服生物利用度,且与游离姜黄素生物不等效。     

HPLC法测定大鼠肝微粒体中UGT酶的底物

目的 建立测定大鼠肝微粒中UGT酶底物的HPLC方法.方法 选择对硝基酚、对乙酰氨基酚作为UGT的特异性底物.采用高效液相色谱法,分别以非那西丁、咖啡因作为内标,色谱柱为Welchrom C18,体积流量为1 mL/min,柱温为30℃.对硝基酚和对乙酰氨基酚的流动相分别为乙腈-0.01 mol/L的醋酸铵缓冲液（pH5.00）=35∶65和乙腈-水=14∶86,对应的检测波长分别为316 nm和244 nm.结果 对硝基酚和对乙酰氨基酚在0.5～100 μmol/L范围内,线性关系良好.对硝基酚的日内精密度和日间精密度RSD％＜14.7％,方法回收率为89.9％～111.0％,提取回收率＞86.5％.对乙酰氨基酚的日内精密度和日间精密度RSD％＜13.0％,方法回收率105.6％～114.2％,提取回收率＞78.3％.结论 两组方法灵敏、简便、准确,可用于大鼠肝微粒体中UGT酶活性的测定.     

吴茱萸碱油包水型复合纳米乳的药代动力学和在体肠吸收

目的 考察吴茱萸碱油包水型复合纳米乳在雄性SD大鼠体内的药代动力学、在体肠吸收情况.方法 12只雄性SD大鼠灌胃给予吴茱萸碱油包水型复合纳米乳和吴茱萸碱(吴荣萸碱质量浓度为100mg/kg)后,分别于0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、5、8、12、24、48和72 h时眼底采血,用HPLC法检测血药浓度,用DAS 2.1.1软件对数据进行拟合,分析其药动学行为;建立在体单向肠灌流模型,研究药物在大鼠体内的吸收情况.结果 吴茱萸碱油包水型复合纳米乳的药时曲线下面积(AUC)为(4 924.59±1 105.28) μg·L·h-1,峰浓度(Gmax)为(305.47±51.23) μg·L-1和达峰时间(Tmax)为(0.83±0.29)h;其在胃中的吸收速率常数(Ka)为(1.05±0.82)×10-5 L·s--1;在十二指肠、空肠、回肠和结肠中的Ka分别为(12.19±1.57)×10-5、(12.66±1.35)×101、(11.94±4.17)×10-5和(11.21士1.25)×10-5 L·s-1,有效渗透系数(Pcff)分别为(26.03±3.84)×10-5、(18.48±5.99)×10-5、(19.77±2.59)×10-5和(36.02±1.48)×10-5 cm·s-1.结论 吴茱萸碱油包水型复合纳米乳增强了吴茱萸碱在胃和各个肠段中的吸收,提高了吴茱萸碱在大鼠体内的生物利用度.     

星点设计-效应面法优化姜黄素正负离子纳米结构脂质载体处方

目的 采用星点设计-效应面法(CCD-RSM)筛选姜黄素(Cur)正负离子纳米结构脂质载体(Cur-CNLC)最佳处方。方法 采用薄膜分散-超声乳化法制备Cur-CNLC,分别以固体脂质质量(X1)、液体脂质质量(X2)、卵磷脂质量(X3)和混合表面活性剂用量(X4)为考察对象,以包封率(Y1)和脂质载药量(Y2)为考察指标,根据CCD原理和多元线性回归及二项式拟合建立指标与因素之间的数学关系,经RSM预测最优处方。结果 按最优处方制备的Cur-CNLC包封率为(94.38±2.67)%,与预测值的偏差为1.23%;脂质载药量为(6.93±0.39)%,与预测值的偏差为2.62%;平均粒径为(235.9±9.6)nm,多分散指数(PDI)为0.272±0.017,Zeta电位为(-28.40±0.35)m V。结论 采用CCD-RSM优化的Cur-CNLC,包封率高,稳定性好,方法可靠。     

大鼠口服羟基红花黄色素A的药动学特征研究

目的考察羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)在大鼠体内的线性动力学特征。方法将18只雄性SD大鼠随机分成3组,以给药剂量30、60和120 mg·kg^-1分别灌胃给予HSYA,给药后按预设时间点于大鼠眼底静脉丛取血,采用HPLC测定HSYA的血药浓度运用描述法和置信区间法分析HSYA在大鼠体内的线性动力学特征。结果HSYA的非房室模型和房室模型药动学参数清除率(clearance,CL)均在6L·h^-1·kg^-1左右,无剂量依赖性,且血药浓度-时间曲线下面积(area under concentration-time curve,AUC)和峰浓度(peak concentration,ρmax)均与给药剂量呈线性关系。结论30~120mg·kg^-1内HSYA在SD大鼠体内呈现线性动力学过程。     

微乳液递送吴茱萸碱的体外释放行为及在体吸收研究

目的考察微乳液递送吴茱萸碱(evodiamine loaded microemulsion,EDM)体外释放特征及大鼠的在体吸收情况。方法制备EDM,用透析法研究其在p H 1.2盐酸溶液和p H6.8磷酸缓冲溶液中的体外释放特征,计算其累积释放率。再用大鼠在体单向肠循环法研究其在十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收情况,以及在胃的吸收情况,计算其在各部位的吸收速率常数(absorption rate constant,K_a)与有效渗透率(effective permeability,P_eff)。本实验用HPLC法测定吴茱萸碱(evodiamine,ED)的浓度。结果EDM和ED在p H 1.2盐酸溶液中的累积释放率分别为(64.76±0.73)%、(13.98±0.49)%,EDM的累积释放率为ED的4.63倍;在p H 6.8磷酸缓冲液中的累积释放率分别为(91.72±0.51)%、(18.34±0.20)%,EDM的累积释放率为ED的5.01倍。EDM在胃肠的K_a为ED的3倍以上,P_eff为ED的2倍以上。结论微乳液能使ED的体外释放以及大鼠胃肠吸收均得以改善。