人胚肺二倍体细胞KMB17凋亡的形态学发生

无血清培养是诱导细胞凋亡的常规方法,具有简便、快速的特点。用光学显微镜、荧光显微镜及透射电镜观察了人胚肺二倍体成纤维细胞（ＫＭＢ１７）在无血清培养过程中细胞凋亡的形态学发生过程。结果：无血清诱导后１ｈ,光镜下可见致密单层的成纤维状细胞出现疏松状态;３ｈ后,少数细胞（１％～５％）出现圆缩;６ｈ后,成纤维细胞全部由长梭形收缩为圆形,体积缩小。荧光及电镜下可将细胞凋亡形态上分为两个阶段,第一阶段细胞出现     

乙酰胆碱酯酶特异性抑制剂BW284C51抑制无血清诱导的凋亡

为了研究ＡＣｈＥ特异性抑制剂ＢＷ２８４Ｃ５１与细胞凋亡的关系。采用人二位体胚肮细胞株ＫＭＢ１７经无血清培养方法诱导出典型调亡,在无血清培养液中加入１０μｍｏ／Ｌ乙酰胆碱酯酶特异性抑制剂ＢＷ２８４Ｃ５１。结果：乙酰胆碱酯酶特异性抑制剂ＢＷ２８４Ｃ５１具有抑制夫血清诱导的调亡,ＡＣｈＥ参与了细胞凋亡的信号传导,抑制该酶的生就有抑制调亡的发生。结果表明：ＡＣｈＥ在凋亡过程中可能起非常重要的作用,参与了凋     

猴B病毒PCR检测方法的建立

目的　建立检测猴血B病毒的PCR方法。方法　根据MakotoH报道的引物 ,用PCR方法直接扩增猴血B病毒及扩增经Vero细胞培养后的猴血B病毒 ,扩增产物连于pGEM T载体。结果　这四对引物可同时对猴血B病毒及经Vero细胞培养后的猴血B病毒进行扩增 ,扩增结果一致 ,对扩增片段克隆测序的结果证实 ,其与美国猴B病毒E2 4 90株同源性为 10 0 %。结论　建立了从血样中直接检测猴B病毒DNA的PCR方法。     

HSV-1 VP22和hIL-18增强HBV DNA微球疫苗诱导的小鼠体液免疫应答

为了研究HSV-1VP22和hIL-18作为分子佐剂对HBVDNA微球疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响,HSV病毒经Vero细胞培养增殖后,提取病毒DNA,PCR扩增VP22编码基因。从人PBMC中提取总RNA,RT-PCR扩增hIL-18。VP22、hIL-18按不同需要插入pcDNA3.1-S,构建成3种质粒:pcDNA3.1-VP22-S、pcDNA3.1-S-IL-18、pcDNA3.1-VP22-S-IL-18。制备DNA壳聚糖微球疫苗,鼻腔免疫小鼠,同时裸质粒DNA肌注小鼠,ELISA检测小鼠血清IgG、粪便sIgA水平。结果,与pcDNA3.1-S相比,pcDNA3.1-VP22-S、pcDNA3.1-S-IL-18、pcDNA3.1-VP22-S-IL-18均能引起小鼠血清IgG、粪便sIgA水平升高。在鼻腔免疫实验中,pcDNA3.1-VP22-S、pcDNA3.1-S-IL-18、pcDNA3.1-VP22-S-IL-18免疫组的血清IgG水平均在第8周达到最高,并且与pcDNA3.1-S相比,抗体水平有差异(P<0.05)。研究结果表明,VP22和hIL-18能够增强乙肝DNA疫苗的体液免疫应答;制备的DNA微球疫苗经鼻腔免疫后,能够诱导黏膜免疫应答。     

人胚肺二倍体细胞KMB_(17)凋亡的形态学发生

无血清培养是诱导细胞凋亡的常规方法 ,具有简便、快速的特点 .用光学显微镜、荧光显微镜及透射电镜观察了人胚肺二倍体成纤维细胞 (KMB1 7)在无血清培养过程中细胞凋亡的形态学发生过程 .结果 :无血清诱导后 1h ,光镜下可见致密单层的成纤维状细胞出现疏松状态 ;3h后 ,少数细胞(1%～ 5% )出现圆缩 ;6h后 ,成纤维细胞全部由长梭形收缩为圆形 ,体积缩小 .荧光及电镜下可将细胞凋亡从形态上分为两个阶段 ,第一阶段细胞出现典型的凋亡特征 ,细胞圆缩、出芽、核染色质凝缩、成块状或新月状分布于核膜边缘 ;第二阶段 ,在细胞凋亡晚期出现坏死症状 :电镜下整个细胞崩解成碎片 .结果表明 :无血清培养诱导的凋亡在凋亡的晚期由于营养过度缺乏易出现二次坏死现象 .首次报道用于生物制品生产的人胚肺二倍体细胞在无血清诱导下凋亡发生的形态学特征 .     

CpG DNA中ISS数量与免疫刺激效果间的关系初探

研究CpG免疫刺激DNA中免疫刺激序列（ISS）的数量与免疫刺激效果间的关系。方法：将3种CpGODN（分别含2,4,8个ISS）与甲型肝炎灭活疫苗混合,通过腹腔注射途径免疫小鼠,于免疫后4,6,8w采血,用全自动微粒子酶联免疫测定分析检测抗HAVIgG水平.结果：含2个ISS的CpG ODN具有较好的佐剂效应,能增强甲型肝炎灭活疫苗的免疫效果,含4个ISS的CpG ODN不具有免疫刺激作用,而含8个ISS的CpG ODN则抑制了甲型肝炎灭活疫苗所诱导的免疫反应,结论：适当长度的CpG ODN（含2个ISS）可作为有效的佐剂来增强疫苗的免疫效果,而当其中的ISS含量过多,则反而具有免疫抑制作用。