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不同鼠疫检测技术在河北省鼠疫监测中的应用研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的通过用鼠疫血凝试验、胶体金标记免疫层析(金标)和ELISA 3种方法检测啮齿动物血清,用金标、ELISA、PCR与鼠疫反向血凝试验和细菌分离检测啮齿动物脏器,评价其在鼠疫监测中的应用效果。方法用鼠疫血凝试验、金标和ELISA 3种方法检测啮齿动物血清;用金标、ELISA、PCR、鼠疫反向血凝试验和细菌分离检测啮齿动物脏器。结果鼠疫血凝试验、金标和ELISA 3种方法对啮齿动物血清的阳性检出率分别为0.32%、0.32%和1.26%。金标、ELISA、PCR、鼠疫反向血凝试验和细菌分离对啮齿动物脏器的阳性检出率分别为3.15%、0.70%、4.90%、0.70%和0.70%。结论金标、ELISA、PCR值得推广应用,非常适合基层和快速诊断应用。 相似文献
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目的比较胶体金免疫层析法(GICA)和双单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验(DMcAbS-ELISA)检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性。方法用GICA试纸条和DMcAbS-ELISA平行检测308份强毒鼠疫耶尔森菌感染鼠脏器标本和327份对照鼠标本,用RIHA微量法同时检测作为参照。结果327份对照鼠鼠疫细菌学检验及GICA,DMcAbS-ELISA和RIHA的F1抗原检测均为阴性,GICA,DMcAbS-ELISA和RIHA在108cfu/mL水平上未发现与近缘假结核耶尔森菌有交叉反应;308只感染鼠样本细菌培养阳性284只,24只样本未分离到鼠疫菌;F1抗原检测GICA阳性287份,DM-cAbS-ELISA阳性280份,RIHA阳性276份,GICA阳性检出率最高93.19%,与DMcAbS-ELISA和RIHA比较,差异均有统计学意义(χ^2=5.14,9.09;P=0.016,0.001);GICA与DMcAbS-ELISA符合率97.73%(Kappa=0.845);GICA和DMcAbS-ELISA与RIHA符合率分别是96.43%和98.70%(Kappa=0.774,0.926);284份细菌培养阳性鼠标本F1抗原检测GICA阳性率是98.59%,高于DMcAbS-ELISA和RIHA,差异有统计学意义(χ^2=4.17,5.14;P=0.031,0.016);24份细菌培养阴性实验鼠标本F1抗原检测:GICA检出7份阳性,阳性率29.17%,DMcAbS-ELISA检出6份阳性,阳性率25%,RIHA检出3份阳性,阳性率12.5%,GICA高于DMcAbS-ELISA和RIHA,但差异无统计学意义(χ^2=2.25,0;P=0.125,1.000)。结论GICA检测鼠疫F1抗原敏感特异,快速简便,优于DMcAbS-ELISA和RIHA,是鼠疫快速诊断中有应用价值的检测技术。 相似文献
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目的 研究胶体金免疫层析试纸条检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性.方法通过鼠疫F1抗原单克隆抗体(F1MAb)捕捉F1抗原的胶体金免疫层析(GICA)试纸条,检测308只强毒鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)感染鼠脏器标本和225份对照鼠(达乌尔黄鼠217只,小白鼠5只,豚鼠3只)标本,同时用鼠疫反向间接血球凝集试验(RIHA)微量法和细菌培养做平行检测.结果 225只对照鼠鼠疫细菌学检验及GICA和RIHA的F1抗原检测均为阴性,GICA和RIHA在1×108 cfu/ml水平上未发现与近缘假结核耶尔森菌有交叉反应.GICA、RIHA对鼠疫菌检测灵敏性为2.5×105、2.0×105cfu/ml;检测F1抗原灵敏性为1、10 μg/L.GICA与细菌学检验符合率为97.94%(522/533),Kappa值=0.959,阳性检出率组间比较,差异无统计学意义(x2=0.36,P>0.05);与RIHA符合率为97.94%(522/533),Kappa值=0.959,阳性检出率组间比较差异有统计学意义(x2=9.09,P<0.05).308只实验鼠样本细菌培养阳性284只,284份细菌培养阳性标本中,GICA有280份检测阳性,阳性率为98.59%,高于RIHA[阳性率为96.13%(522/533)],两组比较差异有统计学意义(x2=5.14;P<0.05).GICA的敏感度为98.59%(280/284),特异度为97.19%(242/249),阳性预测值为97.56%(280/287),阴性预测值为98.37%(242/246),Youden指数为0.9578.结论 GICA检测鼠疫F1抗原敏感特异,快速简便,是鼠疫早期快速诊断中有应用价值的检测技术. 相似文献
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河北省鼠疫耶尔森菌毒力测定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究河北省鼠疫自然疫源地分离的鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)对小鼠和豚鼠的毒力。方法选取2005年分离的鼠疫菌株(200501、200502、200507、200511、200512)、1972年分离的鼠疫菌株(7220)、1994年分离的鼠疫菌株(9401).腹股沟皮下注射法接种小鼠和豚鼠,动物死亡后常规解剖取肝、脾等脏器做细菌培养,计算每株鼠疫菌对小鼠和豚鼠的半数致死量(LD_(50))及LD_(50)的95%可信区间,比较各菌毒力的强弱。结果7220株和2005年分离的5株鼠疫菌毒力强,小鼠LD_(50)介于21.72~113.59个菌;9401株毒力相对较弱,LD_(50)为1809.88个菌。7株菌对豚鼠均有较强的毒力,LD_(50)介于3.35×10~2~6.64×10~4个菌。结论7株鼠疫菌属于鄂尔多斯高原型强毒鼠疫菌,对小鼠和豚鼠均有较强的毒力。 相似文献
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胶体金免疫层析法检测鼠疫F1抗体技术的应用及效果评价 总被引:2,自引:2,他引:2
目的研究鼠疫胶体金免疫层析法(GICA)快速检测鼠疫F1抗体技术在鼠疫血清学诊断、监测及流行病学调查中的应用及效果评价。方法应用GICA、双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)和间接血球凝集试验(IHA)对比检测190份啮齿动物血清和11份鼠疫免疫血清中鼠疫F1抗体。结果190份动物血清IHA检测结果均为阴性:GICA检测出1份阳性血清,滴度1:10;DAgS-ELISA检测出3份阳性血清,滴度1:4( ) 2份和1:16( )1份。3种方法检测11份鼠疫免疫血清均为9份阳性,但GICA敏感性低于IHA和DAgS-ELISA (GICA与IHA:t=3.257,P<0.05;GICA与ELISA:t=3.625,P<0.01;IHA与ELISA:t=1.437,P>0.05)。201份血清检测结果,GICA与IHA总符合率99.50%,与DAgS-ELISA总符合率99.00%,3种方法检测结果差异无统计学意义(x2=0.5,P>0.05)。结论GICA检测鼠疫F1抗体敏感特异、简便快速,与DAgS-ELISA同样为鼠疫血清学快速诊断和鼠疫监测中有应用价值的检测技术。 相似文献
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目的评价不同检测技术检测河北鼠疫监测工作中腐败材料的应用效果。方法运用细菌培养、胶体金免疫试纸条(GICA)、反向血凝试验(RIHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及聚合酶链式反应(PCR)共5种检测技术对255份鼠脏器材料(肝脾混合物)新鲜时和腐败后分别进行检测,记录实验数据,进行统计分析。结果细菌培养对新鲜标本检测敏感性为100%,特异性为100%;材料腐败后,鼠疫菌培养检出受限,敏感性仅为16. 7%,经卡方检验,有统计学意义。标本腐败对胶体金免疫层析、反相血凝试验、酶联免疫吸附试验和聚合酶链式反应检测结果影响较小,经卡方检验,P值均远远大于0. 05,无统计学意义。结论细菌培养受材料腐败的影响很大,但它是唯一能得到纯菌的方法;抗原检测方法中,胶体金免疫层析技术操作最简单,敏感性和特异性受材料腐败的影响较小,可列为监测中筛选阳性标本的首选方法;聚合酶链式反应是基于分子水平的检测,受材料腐败的影响很小。在实际监测工作中,要联合运用细菌培养,抗原检测和基因检测,以提高鼠疫菌的检出率。 相似文献
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目的调查河北省鼠疫疫源地绵羊鼠疫F1抗体的分布水平,探讨绵羊在鼠疫监测过程的意义。方法在河北历史人间鼠疫发生地和动物间鼠疫活动疫源地的1个镇1个行政村进行随机抽样,共采集绵羊血样394份。同时进行常规鼠疫间接血凝试验、鼠疫F1抗体胶体金试验和双抗原夹心ELISA检测F1抗体试验。结果鼠疫间接血凝试验阳性1份;双抗原夹心ELISA测F1抗体试验阳性1份;鼠疫F1抗体胶体金试验阳性2份。结论在河北省鼠疫自然疫源地有一定数量的鼠疫F1抗体阳性绵羊,具体原因尚不清楚,有待进一步调查和研究。 相似文献
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目的 观察双单克隆抗体(F1-McAb)夹心酶联免疫试验(DMcAbS-ELISA)快速检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性.方法 采用鼠疫细菌学检验、DMcAbS-ELISA和反向间接血球凝集试验(RIHA)对比检测鼠疫感染鼠和阴性对照鼠脏器标本.结果 共检测225份阴性对照鼠脏器标本,鼠疫细菌学检验、DMcAbS-ELISA和RIHA法检测F1抗原均为阴性.共检测308只鼠疫感染鼠脏器标本,鼠疫细菌学检验、DMcAbS-ELISA、RIHA法阳性率分别为92.21%(284/308)、90.91%(280/308)和89.61%(276/308),3种方法比较,差异无统计学意义(x2=5.65,P>0.05).DMcAbS-ELISA法与鼠疫细菌学检验结果符合率为97.00%[(274+243)/533],Kappa值为0.940;与RIHA法符合率为99.25%[(276+253)/533],Kappa值为0.985.脏器标本F1抗原检测的真实性比较:DMcAbS-ELISA法敏感性为96.48%(274/284),特异性为97.59%(243/249),阳性预测值为97.86%(274/280),阴性预测值为96.05%(243/253),一致性为96.99%11/4×(274/280+274/284+ 243/253+243/249)|,Youden指数为0.9407;RIHA法的敏感性为96.13%(273/284),特异性为98.80%(246/249),阳性预测值为98.91%(273/276),阴性预测值为95.72%(246/257),一致性为97.39%[1/4×(273/276+273/284+246/257+246/249)],Youden指数为0.9492.DMcAbS-ELISA法对鼠疫菌检测灵敏度为2.7×104cfu/ml,RIHA法为2.2×105 cfu/ml;两种方法检测F1抗原灵敏度均为10 μg/L.结论 DMcAbS-ELISA法检测鼠疫F1抗原具有敏感、特异、简便、快速的特点,是有应用价值的鼠疫快速诊断技术. 相似文献
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目的:评价辣根过氧化酶标记鼠疫F1单克隆抗体(HRP‐F1McAb)酶免疫染色技术检测小鼠脏器鼠疫F1抗原的应用效果。方法通过HRP‐F1McAb酶免疫染色法检测鼠疫菌EV株感染小鼠脏器标本和对照小鼠脏器标本,同时用细菌学、RIHA和ELISA做平行检测。结果 HRP‐F1McAb酶免疫染色法与细菌学一致率为96.36%,阳性检出率差异无统计学意义(χ2=0,P>0.05);HRP‐F1McAb酶免疫染色法和RIHA一致率为98.18%,阳性检出率差异无统计学意义(χ2=0,P>0.05);HRP‐F1McAb酶免疫染色法和ELISA一致率为96.36%,阳性检出率差异无统计学意义(χ2=0,P>0.05)。结论酶免疫染色法检测小鼠脏器鼠疫F1抗原特异敏感、简单快速。 相似文献