荧光定量聚合酶链反应分型法检测乙型肝炎病毒B、C基因型的研究

目的探讨用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分型法检测乙型肝炎病毒(HBV)B、C基因型,了解不同类型HBV感染者中HBV基因型的分布特点。方法选取2010年9月至2012年10月在成都市第五人民医院就治的乙型肝炎患者135例作为研究对象,用荧光定量PCR分型法检测135例HBV感染者的HBV基因型。结果荧光定量PCR分型法成功分型131例(97.04%)样本,4例(2.96%)未检出,其中,B/C混合型28例(20.74%);C型17例(12.60%);B型86例(63.70%)。B基因型的病毒载量显著高于C基因型、B/C混合型(P<0.05)。B基因型在慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎和急性乙型肝炎患者中所占百分比显著高于C基因型与B/C混合型(P<0.05)。结论本地区的HBV基因型以B基因型为主,其次是C基因型、B/C混合型。     

快速培养法与实时荧光定量聚合酶链反应检测肺炎支原体的对照研究

目的探讨快速培养法和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)的异同。方法对2011年1～12月住院的218例疑似肺炎支原体肺炎患儿采集咽拭子,同时用快速培养法和实时FQ-PCR法检测MP。结果快速培养法与实时FQ-PCR法诊断肺炎支原体肺炎的灵敏度、阳性预测值、假阴性率及诊断符合率差异无统计学意义(P>0.05);实时FQ-PCR法诊断肺炎支原体肺炎的特异度明显高于快速培养法,假阳性率明显低于快速培养法,差异有统计学意义(P<0.05)。二者联合检测的灵敏度、阴性预测值及诊断符合率分别为93.8%、90.7%和90.8%,均高于快速培养法和实时FQ-PCR法(P<0.05);假阴性率为6.2%,明显低于快速培养法和实时FQ-PCR法(P<0.05);联合检测的特异度为86.7%,明显高于快速培养法(P<0.05)。结论两种方法的敏感度差别不大,而实时FQ-PCR法的特异性优于快速培养法。应用这两种不同方法学原理的检测方法组合检测,取长补短,在提高肺炎支原体感染检出率的同时,还可以互相佐证,减少实验误差,提高检测的准确性。     

创伤性检查前感染性标志物检测的临床意义

目的探讨创伤性检查前患者乙型肝炎病毒(HBV)、甲型肝炎病毒(HAV)、丙型肝炎病毒(HCV)、梅毒螺旋体(TP)、艾滋病病毒(HIV)的感染状况。方法采用酶联免疫吸附试验检测HBsAg、HAV-IgM、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV。结果 7403例患者中HBsAg阳性18.30%、抗-HAV阳性0.27%、抗-HCV阳性1.28%、抗-TP阳性2.48%、抗-HIV阳性0.22%。结论将HBsAg、HAV-IgM、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV作为创伤性检查前必查项目,有利于避免医源性传染及医疗纠纷的发生,防止医务人员的职业感染,保证医疗安全。     

血清lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1与上皮性卵巢癌患者临床病理特征、血清细胞凋亡分子和预后不良的关系研究

目的 探讨血清长链非编码核糖核酸(lncRNA)中的赖氨酰氧化酶样1(LOXL1-AS1)、肺腺癌转移性相关转录本1(MALAT1)与上皮性卵巢癌(EOC)患者临床病理特征、血清细胞凋亡分子和预后不良的关系。方法 选取2017年1月至2020年1月该院收治的EOC患者68例作为EOC组,另选取70例卵巢良性肿瘤患者作为良性组,选取同期体检健康者60例作为对照组;对比3组患者血清中lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1表达水平,以lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平中位值(1.90、1.38)分别将EOC患者分为lncRNA LOXL1-AS1低表达组(34例)和lncRNA LOXL1-AS1高表达组(34例),以及lncRNA MALAT1低表达组(33例)和lncRNA MALAT1高表达组(35例),对比EOC患者各表达组的临床病理特征、血清细胞凋亡分子[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、生存素(Survivin)、B细胞CLI/淋巴瘤2关联凋亡基因1(Bag-1)]水平,并采用Pearson相关...     

一步法检测梅毒抗体ELISA试剂的钩状效应分析

近年来,随着分子生物学技术的发展,以及对梅毒螺旋体表面脂蛋白抗原的核苷酸序列的了解,采用基因工程的方法,在体外表达得到了梅毒螺旋体的相应特异基因工程抗原,大大地提高了酶联免疫吸附试验（ELISA）测定的特异性。此外ELISA还具有简单、快速和高通量的优点,所以,ELISA成为了梅毒血清学诊断的首选方法。目前,国内检测梅毒抗体绝大多数采用ELISA中的双抗原夹心一步法。     

超声波辅助快速酶法革兰阴性杆菌鉴定系统的研制

目的缩短非发酵菌、弧菌及肠杆菌科革兰阴性杆菌的鉴定周期,加快微生物检验报告时间.方法研制一种可不需经过分科即能实现细菌的种级鉴定的21项7位码的细菌酶学生化反应鉴定系统（包括鉴定卡和检索系统）,制定超声波粉碎最佳方案并采用超声波粉碎细菌加快酶的释放,将细菌酶提取液注入鉴定卡中,35℃孵育4～8h观察结果.以标准菌株为质控,传统生化反应方法为金标准,同时与国产鉴定系统GYZ系列（15e、15n、9v）作比较,用室间质控菌株和临床菌株分别进行测试.最后对比经超声波粉碎与不经粉碎的差别,统计该鉴定系统相对于传统方法和国产鉴定系统GYZ系列对测试菌株的符合率,并计算出该鉴定系统鉴定各科细菌时所需时间.结果经标准菌株测试,超声波粉碎细菌前后生化反应无差别（快慢1h内）的有：糖类分解、硝酸盐还原、靛基质、硫化氢、尿素水解、七叶苷水解;轻微差别（快2h）的有：苯丙氨酸脱氨、DNA水解;差异显著（快4h以上）的有：精氨酸双水解、赖氨酸脱羧、鸟氨酸脱羧、ONPG试验.3株标准菌株54项生化反应一致率96.3%;12株室间质控菌株鉴定种级符合率75%,属级92%,错误1株;65株经金标准传统双歧图表法确定的菌株鉴定种级符合率86%,属级95%,错误3株;与GYZ系列平行对照共测试临床分离菌株138株,117株结果相同,一致率85%（χ^2＝1.4546, P ＞0.05）.本方法对肠杆菌科和弧菌科细菌的鉴定只需4～6h,而对非发酵菌的鉴定为6～8h,比GYZ系统快12～40h.结论该鉴定系统能在不经过分科鉴定的情况下快速鉴定非发酵菌、弧菌及肠杆菌科革兰阴性杆菌至种级水平,为感染疾病的诊断节省宝贵的时间.与传统方法及国产鉴定系统GYZ系列有较好的种属级符合率.说明该系统有较好的研究和应用前景.