建泽泻鲨烯合酶基因克隆及其生物信息学分析

目的 对建泽泻原萜烷型三萜类成分生物合成关键酶鲨烯合酶（squalene synthase,SS）进行基因全长的克隆和生物信息学分析。方法 以建泽泻总RNA为模板,运用同源克隆法和RACE技术克隆建泽泻SS基因的cDNA全长,并通过DNAMAN软件及ExPASy在线分析等方法对其进行生物信息学研究。结果 获得建泽泻SS基因全长cDNA,GenBank注册号为JX866770,序列分析表明,所克隆的cDNA序列全长为1 577 bp,包含一个长1 230 bp的开放阅读框架,编码409个氨基酸的蛋白,与其他药用植物具有较高的同源性。预测该蛋白的相对分子质量为4.68×10⁴,等电点为5.97,无信号肽,包含2个富含天冬氨酸（DXXDD）的保守功能域。结论 首次克隆获得建泽泻SS基因的全长cDNA,为泽泻原萜烷型三萜类成分生物合成途径阐明与生物工程应用提供科学依据。     

建泽泻鲨烯合酶基因克隆及其生物信息学分析

目的 对建泽泻原萜烷型三萜类成分生物合成关键酶鲨烯合酶(squalene synthase,SS)进行基因全长的克隆和生物信息学分析.方法 以建泽泻总RNA为模板,运用同源克隆法和RACE技术克隆建泽泻SS基因的cDNA全长,并通过DNAMAN软件及ExPASy在线分析等方法对其进行生物信息学研究.结果 获得建泽泻SS基因全长cDNA,GenBank注册号为JX866770,序列分析表明,所克隆的cDNA序列全长为1577bp,包含一个长1230bp的开放阅读框架,编码409个氨基酸的蛋白,与其他药用植物具有较高的同源性.预测该蛋白的相对分子质量为4.68×104,等电点为5.97,无信号肽,包含2个富含天冬氨酸(DXXDD)的保守功能域.结论 首次克隆获得建泽泻SS基因的全长cDNA,为泽泻原萜烷型三萜类成分生物合成途径阐明与生物工程应用提供科学依据.     

野生和栽培茅苍术RAPD分析

目的 获取野生与栽培茅苍术差异遗传信息.方法 运用RAPD分子标记方法,从DNA水平上分析野生与栽培茅苍术的遗传变异.结果 筛选了60个随机引物,从中选取18个多态性强、重复性好的引物进行扩增,共检测到228个位点,110个多态性位点,多态位点比率为48.25％;野生与栽培茅苍术的遗传距离为0.32.结论 野生和栽培茅苍术基因组DNA存在显著差异,研究工作为茅苍术优良种质资源鉴定和可持续利用提供科学依据.     

濒危药用植物茅苍术花粉形态、活力测定及贮存研究

目的:研究濒危药用植物茅苍术花粉形态、活力测定及贮存。方法:采用扫描电镜观察茅苍术花粉形态,用液体培养及染色法筛选花粉萌发最适培养基及活力测定方法,并检测不同贮存条件下花粉的活力。结果:茅苍术花粉粒呈类球形,具3萌发沟,外壁表面具刺状雕纹;在ME3+16%PEG4000+10%蔗糖液体培养基上花粉萌发率最高,达62.1%,而其他3种染色法均不宜用于茅苍术花粉活力的检测;低温可明显延长茅苍术花粉的贮存时间,在-80℃低温下可贮存60 d。结论:液体培养法适于茅苍术花粉粒活力的测定,花粉萌发率与贮存温度及时间密切相关,本研究为茅苍术人工辅助授粉及野生抚育研究提供了科学的依据。