LPS诱导胆管炎症对胆管上皮细胞骨架形态学变化的影响及大黄灵仙方对其干预机制研究

目的：观察脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）对细胞骨架的影响以及大黄灵仙方调节NF-κB/MAPK信号通路对细胞骨架蛋白的作用。方法：采用鬼笔环肽荧光染色剂对各组干预后的胆管上皮细胞进行染色,在激光共聚焦显微镜下观察各组细胞骨架的排列情况;采用免疫印迹法检测骨架蛋白F-actin的表达。结果：LPS干预后,胆管上皮细胞出现细胞核皱缩或破损,骨架丝状断裂或成团;通路阻制剂联合大黄灵仙方干预后细胞骨架部分修复;其余各组细胞骨架均有不同程度的断裂。与正常组相比,LPS组F-actin蛋白表达减少（P<0.05）;与LPS组相比,LPS组+中药组、LPS+PDTC+中药组、LPS+SB203580+中药组、LPS+PDTC+SB203580+中药组F-actin蛋白表达明显增加（P<0.05）;与中药组相比,LPS+PDTC+中药组、LPS+SB203580+中药组、LPS+PDTC+SB203580+中药组F-actin蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论：大黄灵仙方可恢复炎症状态下胆管上皮细胞骨架的排列顺序,保护其微丝结构,其机制可能与调节N...     

MEBT/MEBO对大鼠慢性难愈合创面组织中MMP-2、CXCL1、GM-CSF蛋白表达的影响

目的 观察湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、趋化因子配体1(CXCL1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)蛋白表达的影响。方法 将72只SD大鼠随机分为急性皮损组、慢性创面组、贝复新组、美宝组各18只，除急性皮损组外，其余组皮下注射氢化可的松建立慢性难愈合创面，注射完成后用生理盐水清理创面，贝复新组创面敷贝复新凝胶，美宝组创面敷美宝烧伤膏，均每日上下午各换药1次。观察各组大鼠伤后第3,7,14天创面情况并取创面肉芽组织，Masson染色观察创面中胶原纤维生成情况，ELISA法检测肉芽组织中MMP-2含量，免疫组化法检测创面组织中CXCL1、GM-CSF蛋白表达情况。结果 美宝组大鼠创面愈合速度快于慢性创面组和贝复新组。Masson染色显示各组创面组织中胶原纤维含量随伤后时间的延长逐渐增加；伤后第3,7天，美宝组胶原纤维含量均明显高于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05);伤后第14天，各组胶原纤维含量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。创面组织中MMP-2含量，贝复新组随伤后时间延长而增...     

大黄灵仙方调控TAK1与TRAF6相互作用及共定位对胆管细胞炎症反应的影响

目的:观察大黄灵仙方(DHLX)对大鼠胆管上皮细胞的修复作用,探讨其作用机制是否通过调节转化生长因子-β(TGF-β)激活激酶1(TAK1)与肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的相互结合,调控核转录因子-κB(NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路活化而发挥作用。方法:将20只SD大鼠随机分为正常组和DHLX组,分别予生理盐水及DHLX(320 mg·kg^-1·d^-1)灌胃8 d,制备正常血清及含DHLX血清;从正常SD大鼠中提取胆管上皮细胞,取胆管上皮细胞分为9组:正常组、模型组(20 mg·L^-1)、脂多糖(LPS)+DHLX组(20 mg·L^-1+10%含药血清)、LPS+PDTC组(20 mg·L^-1+200μmol·L^-1)、LPS+SB203580组(20 mg·L^-1+0.5μmol·L^-1)、LPS+PDTC+SB203580组(20 mg·L^-1+200...     

基于IL-6/JAK/STAT3信号通路探讨大黄灵仙方缓解胆管细胞炎性反应的作用机制

目的：基于IL-6/JAK/STAT3信号通路探讨大黄灵仙方缓解脂多糖（LPS）诱导肝内胆管炎症模型大鼠的胆管细胞炎性反应的作用机制。方法：将50只SD大鼠随机分为5组，空白组、模型组、胆宁片（0.5 g/kg）、大黄灵仙方低、高浓度组（2.4 g/kg、4.8 g/kg），每组10只。除空白组以外，其余各组大鼠于胆总管处一次性注射1.25 mg/kg LPS以构建肝内胆管感染动物模型。第8天灌胃结束后取材，取大鼠肝门处肝脏组织，采用HE染色观察肝门和胆管树组织病理变化。生化法测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的表达水平。酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中白介素6(IL-6)、Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导和转录活化因子3(STAT3)的表达水平。蛋白免疫印迹法（WB）、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胆管树组织中的IL-6、JAK2、STAT3蛋白及mRNA的表达水平。结果：（1）与空白组对比，模型组大鼠的肝窦和门管区小叶间胆管等结构均被破坏，周围存在炎性细胞浸润，血清中ALT、AST、M...     

运用推拿手法治疗大学生颈肩综合征的临床疗效观察

目的运用传统推拿手法治疗颈肩综合征,观察其临床治疗效果,并作出客观性评价。方法在内蒙古医科大学在校大学生中筛选出30名颈肩综合征患者,给予传统推拿手法治疗,评价其临床疗效和nPQ评分。结果传统推拿手法治疗颈肩综合征有效率为96.67%,可显著缓解颈肩综合征的症状。结论运用推拿手法治疗颈肩综合征能达到缓解患者疼痛、改善活动功能受限等症状,具有明显的临床疗效。     

大黄灵仙方对胆固醇结石豚鼠模型胆囊Cajal间质细胞中scf/c-kit信号通路的影响

目的 观察在大黄灵仙方的调控下干细胞生长因子(scf)、酪氨酸激酶受体(c-kit)的表达水平，探讨其影响胆囊动力学改变的可能机制，为大黄灵仙方预防胆石症的发生及复发提供理论依据。方法 将45只SPF级健康雄性豚鼠随机分为正常组、模型组、中药组，其中正常组予正常饲料喂养，模型组、中药组予高脂致石饲料喂养，喂养8周后分别从各组中随机抽取5只豚鼠，肉眼观察下结石形成超过4只，则判断为模型建立成功。造模成功后中药组予大黄灵仙方灌胃，模型组予等体积生理盐水灌胃，连续灌胃给药8周后取豚鼠胆囊组织,HE染色观察观察胆囊组织的病理学改变,Western blot测定胆囊组织中TNFα的表达水平，免疫组化测定胆囊平滑肌组织中scf、c-kit的蛋白表达水平。符合正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD多重比较法。结果 HE染色显示模型组胆囊组织炎症明显，中药组胆囊组织内炎症程度较模型组明显减轻。Western blot结果表明在模型组中，胆囊组织中TNFα的表达水平最高，中药组次之，正常组最低(P值均<0.05);免疫组化结果表明豚鼠胆囊平滑肌组织中scf、c-k...