脱细胞腮腺基质的制备及组织学特征初步观察

目的:探讨脱细胞腮腺支架材料的制备方法,制备涎腺组织工程的理想支架材料。方法:对新西兰大白兔腮腺进行冻融联合酶消化,最后冷冻干燥,观察其组织学特征。结果:制备的脱细胞腮腺基质的细胞成分能被有效去除,材料保留了利于腮腺细胞生长的三维网状基质胶原结构,有一定的强度和韧性。结论:采用反复冻融联合酶消化、冷冻干燥法能获得一种无细胞的理想组织工程腮腺支架材料。     

早孕期胎儿超声检测预测胎儿重型α地中海贫血的价值

目的探讨早孕期(胎龄为11^＋0～13^＋6周)超声检测指标预测胎儿重型α地中海贫血的价值。 方法选择2015年1月3日至2016年12月30日,于广州市妇女儿童医疗中心接受定期产前检查、夫妻双方均为轻型α地中海贫血基因携带者所孕育的282例单胎妊娠胎儿为研究对象。对所有胎儿于胎龄为11^＋0～13^＋6周时进行超声筛查。早孕期超声检测指标包括：胎儿心胸直径比(CTR)、大脑中动脉血流峰值流速(MCA-PSV)和胎盘厚度(PT)。若胎儿的上述超声检测指标筛查结果呈阳性,则对其进一步进行绒毛穿刺或者羊膜腔穿刺,进行α地中海贫血基因检测;若呈阴性,则进行孕期随访,并于生后对新生儿常规进行脐带血血红蛋白(Hb)电泳分析,判断胎儿是否罹患重型α地中海贫血。根据产前α地中海贫血基因检测结果,或新生儿Hb电泳分析结果,将所有胎儿分别纳入重型组(重型α地中海贫血胎儿)与对照组(轻型α地中海贫血胎儿及健康胎儿)。采用成组t检验,对重型组与对照组胎儿早孕期超声筛查的CTR、MCA-PSV、PT值进行比较。绘制早孕期胎儿超声筛查的CTR、MCA-PSV、PT值,预测胎儿重型α地中海贫血的受试者工作特征(ROC)曲线,并计算ROC曲线下面积(ROC-AUC),根据约登指数最大原则,确定早孕期胎儿超声筛查的CTR、MCA-PSV、PT值,预测胎儿重型α地中海贫血的最佳临界值,并计算其敏感度、特异度和似然比。本研究遵循的程序符合广州市妇女儿童医疗中心人体试验委员会制定的标准,并经过该伦理委员会批准(批准文号：2014120106)。 结果①根据282例胎儿的随访结果,最终61例(21.6%)被确诊为重型α地中海贫血,而被纳入重型组(n＝61);221例为轻型α地中海贫血或健康胎儿,则被纳入对照组(n＝221)。2组胎儿胎龄构成比等一般临床资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②重型组胎儿的早孕期CTR、MCA-PSV、PT值分别为(0.52±0.04)、(1.61±0.58) cm/s、(1.30±0.20) mm,均显著超过对照组的(0.44±0.03)、(1.20±0.30) cm/s 、(1.00±0.30) mm,2组比较,差异均有统计学意义(t＝19.470、9.320、6.700,P<0.001)。③ROC曲线分析结果显示,早孕期胎儿的CTR、MCA-PSV、PT值,对于预测胎儿重型α地中海贫血的ROC-AUC分别为0.949(95%CI：0.909～0.990,P<0.001),0.811(95%CI：0.741～0.811,P<0.001),0.778(95%CI：0.720～0.856,P<0.001)。根据约登指数最大原则,早孕期胎儿的CTR、MCA-PSV、PT值,对于预测胎儿重型α地中海贫血的最佳临界值分别为0.48、1.50 MoM及1.50 MoM(MoM为中位数倍数),此时其预测胎儿重型α地中海贫血的敏感度分别为92.7%、48.2%及24.6%,特异度分别为95.5%、90.8%及94.1%,似然比分别为20.6、5.2及5.0。 结论早孕期胎儿超声检测相关指标,可有效预测重型和非重型α地中海贫血胎儿,其中预测敏感度和特异度最高的均为早孕期胎儿超声检测的CTR。对于重型α地中海贫血高危胎儿,若早孕期对胎儿的超声检测指标均为正常,则胎儿罹患重型α地中海贫血的几率低。     

骨髓间充质干细胞移植对舍格伦综合征大鼠模型的治疗作用

目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对舍格伦综合征(Sjǒgren’s syndrome)大鼠模型的治疗作用及其在下颌下腺(submandibular gland,SMG)内存活、迁徙及分化情况。方法:建立大鼠舍格伦综合征动物模型;分离、培养大鼠BMSCs并对其进行鉴定和标记;下颌下腺局部注射移植经绿色荧光蛋白标记的BMSCs;测定大鼠静态唾液总流率,记录正常组、模型组、模型治疗组及模型治疗对照组大鼠每日饮水量;荧光显微镜下观察移植干细胞在模型治疗组和模型治疗对照组下颌下腺内的存活、迁徙及分化情况。所得实验数据采用SPSS12.0软件包进行t检验。结果:模型治疗组静态唾液总流率和每天饮水量与模型治疗对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。经标记的骨髓间充质干细胞移植后第1周,BMSCs主要分布于针道附近,第2周主要分布于腺泡之间的间质中,第4周开始在下颌下腺其他区域出现。术后第1周,免疫组化染色移植干细胞未见淀粉酶表达,第8周可见在少量移植细胞的胞质内有淀粉酶表达,具备了类似腺泡细胞的分泌功能。模型治疗对照组未发现以上现象。结论:BMSCs移植对舍格伦综合征大鼠有一定治疗作用。     

探究牙周炎与血清超敏C反应蛋白的关系

目的探究牙周炎与血清超敏C反应蛋白(HS-CRP)的关系。方法选取广州市中西医结合医院78例牙周炎患者作为研究对象,将其设为研究组,同时选取同期接受体检为健康的78例患者作为研究对象,将其设为参照组,均给予其血清HS-CRP检测,对其检测水平进行分析;将研究组患者按照病情严重程度将其分为轻度、中度和重度,观察不同程度的牙周炎血清HS-CRP水平;给予研究组患者治疗,观察其治疗前后的牙周炎血清HS-CRP水平。结果对比两组血清HS-CRP检测结果发现,研究组高于参照组,两组间差异显著且具有统计学意义(P<0.05)。对比不同程度牙周炎血清HSCRP水平发现,轻度<中度<重度,两两比较组间差异显著且具有统计学意义(P<0.05)。对比研究组治疗前后的牙周炎血清HS-CRP水平发现,治疗后低于治疗前,差异显著且具有统计学意义(P<0.05)。结论牙周炎与血清HS-CRP的关系密切,其可作为牙周炎临床诊断、病情划分及疗效判定的参照指标,可为临床诊治提供有效依据。     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对腺样囊性癌细胞 RECK 基因表达及细胞侵袭力的影响

目的：探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-aza-2′deoxycytidine,5-aza-dC）对腺样囊性癌细胞中 RECK基因表达及肿瘤侵袭力的影响。方法：采用甲基化特异性 PCR、实时定量 PCR、Western 印记检测腺样囊性癌细胞中 RECK 基因的甲基化状态及 RECK 基因 mRNA 和蛋白的表达,transwell 体外侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果：RECK 基因甲基化条带仅在 ACC-M细胞中发现,经5-aza-dC 处理后 ACC-M细胞中 RECK 基因甲基化得到逆转,RECK 基因 mRNA 及蛋白的表达显著提升。ACC-M细胞的侵袭力明显降低。结论：5-aza-dC 可逆转腺样囊性癌 ACC-M细胞中 RECK 基因的高甲基化状态并恢复 RECK 基因 mRNA 及蛋白的表达,抑制 ACC-M细胞侵袭力。     

脱细胞腮腺基质材料制备及生物相容性实验研究

目的：探讨新西兰大白兔脱细胞腮腺基质的生物相容性。方法采用冻融联合酶消化-冷冻干燥法制备的脱细胞腮腺基质材料,通过体外毒性试验、全身急性毒性及亚毒性试验等评价其生物相容性。结果脱细胞腮腺基质材料具有利于腮腺细胞生长的三维网状基质胶原结构。加入浓度为50%、100%的脱细胞腮腺基质浸提液的培养液培养腮腺细胞于3、5、7d时细胞数目与对照组无显著差异（P〉0.05）。浸提液注入兔腹腔未引起急性及亚急性毒性反应,心、肝、脾、肺、肾组织学检查未见组织和细胞变性。加入脱细胞腮腺基质浸提液的兔血溶血程度为1.86%。注射浸提液的兔的升高温度的最高值均小于0.6℃,体温升高总和小于1.4℃,符合致热原试验要求。结论脱细胞腮腺基质材料具有很好的生物相容性。