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1.
目的:研究BTB/POZ( broad complex, tramtrack and bric a brac/poxviruses and zinc finger)基因对乳腺癌细胞系增殖能力的影响。方法以人脾脏 cDNA 文库为模板, pCMV-HA-Vector 为载体,构建真核表达载体pCMV-HA-BPOZ;免疫印迹实验鉴定重组蛋白pCMV-HA-BPOZ的表达;细胞生长实验检测BPOZ对细胞增殖能力的影响;平板克隆实验检测BPOZ对细胞生长能力的影响。结果免疫印迹实验结果证实,构建的真核表达载体pCMV-HA-BPOZ能正确表达;过表达HA-BPOZ可显著抑制MCF7和ZR-75-1细胞的增殖和生长。结论成功构建了真核表达载体pCMV-HA-BPOZ,并在细胞中成功表达;BPOZ可明显抑制MCF7和ZR-75-1细胞的增殖和生长能力,为进一步研究BPOZ在乳腺癌发生发展中的作用打下基础。  相似文献   
2.
目的 研究白藜芦醇(RES)参与糖皮质激素诱导的成骨细胞线粒体自噬的作用机制。方法 体外培养人成骨细胞hFob1.19,地塞米松(DEX)诱导细胞线粒体自噬,使用不同浓度的RES (10-8~10-6 mol/L)处理成骨细胞5~120 min,CCK-8法检测成骨细胞的增殖,透射电镜检测成骨细胞内的自噬小体,酶联免疫吸附实验、实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测成骨细胞内碱性磷酸酶(ALP)、caspase 3、转录沉默信息调节因子1 (SIRT1)、细胞自噬标志蛋白(LC3和Beclin1)和细胞线粒体自噬标志蛋白(TOM20和Hsp60)的活性表达。结果 DEX和RES作用成骨细胞2 h后,RES可明显减弱DEX对细胞增殖的抑制作用(P <0.05);透射电镜显示,DEX+RES组自噬小体明显少于DEX组(P <0.05); DEX可明显抑制成骨细胞内ALP活性,而RES明显改善了DEX对ALP蛋白活性的抑制作用(P <0.05); RES可导致成骨细胞内caspase 3的蛋白活性明显降低(P <0.05); RES以剂量依赖性和...  相似文献   
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