“84”消毒液对常见细菌杀灭作用的观察

<正> “84”消毒液是广泛用于医院消毒的含氯消毒剂。为观察其在不同浓度下对细菌繁殖体的杀灭效果,进行了定量悬液杀菌试验。 该“84”消毒液有效氯含量为55g/L～65g/L用无菌蒸馏水稀释成不同浓度的消毒液,分装试管每支4ml(对照管取生理盐水)。然后分别在每个试管内加入金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)、铜绿色假单胞菌(AICC 27853)的菌液各1ml,于37℃下作用不同时间,取0.5ml样液加到4.5ml中和剂试管内中和作用后,各取0.1ml用涂抹法接种在营养琼旨平板上,放37℃恒温箱中培养48h,记录菌数,计算杀灭率。     

LAMP技术检测单纯疱疹病毒-2型的初步应用

目的建立一种对单纯疱疹病毒-2型(HSV-2)进行快速、高效、简便的LAMP检测方法。方法用病毒DNA提取试剂盒提取HSV-2基因组DNA,设计4条扩增HSV-2糖蛋白gG基因的LAMP引物,以灭菌水为阴性对照,进行LAMP,LAMP产物经电泳、酶切鉴定。将HSV-2 DNA作10倍系列稀释后进行LAMP,检测其敏感性。结果HSV-2 LAMP产物电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组无扩增条带。LAMP产物的特异性通过限制性内切酶得到了证实。LAMP检测HSV-2的敏感性为0.01 ng/μL。结论检测HSV-2的LAMP方法特异、敏感、简便。     

2株重组弓形虫P30抗原单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备重组P30抗原单克隆抗体,研究其生物活性。方法重组质粒pET28b-P30经BL21（DE3）表达,纯化、复性后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备单克隆抗体。ELISA筛选阳性克隆,经亚克隆建株。体内诱生腹水法制备抗体,测定其亚类、效价,Western blot分析其特异性,双单抗夹心-ELISA测定其敏感度。双单抗夹心-ELISA法检测弓形虫感染鼠血清中的CAg。结果筛选出2株抗重组P30的单克隆抗体9D7、2H9,抗体重链分别为IgG2a、IgG1,轻链均为κ链,Western blot显示2株单抗均能识别弓形虫速殖体天然P30抗原。双单抗夹心-ELISA检测抗原量为0.5μg/ml;同法检测鼠血清中的CAg,感染第4、6、8 d的阳性率分别为20%、60%、60%。结论制备的P30抗原单克隆抗体具有较高的敏感性和特异性,为其应用研究打下了基础。     

影响新生儿听定向反应及其附加分的多因素分析

目的 探讨影响新生儿听定向反应及其附加分的多种环境因素及敏感性。方法 随机选取武汉市某医院妇产科1999年1-10月出生的足月新生儿103例，测定新生儿神经行为能力并疏集有关影响因素，同时测定新生儿脐血铅和胎粪铅含量。分别以新生儿非生物听定向反应评分及非生物听定向反应附加评分作为因变量，以影响因素及脐血铅，胎粪铅等24项指标作为自变量，采用多项有序分类反应型变量的logistic逐步回归的分析方法，在P=0.10水平筛选出相应的影响因素。结果 家庭人口数，孕期感染及孕期感染月份3项因素选入影响新生儿非生物听定向反应评分的模型，孕期情绪，孕期服药，新生儿性别，孕期感染，孕期感染月份，孕周，胎粪铅等7项因素选入影响新生儿非生物听定向反应附加评分的模型。结论 孕周长、女性新生儿，孕期情绪好有利于新生儿非生物听定向反应附加评分的发育，孕期早期感染，孕期服药，高胎粪铅水平不利于新生儿非生物听定向反应附加评分的发育。     

影响新生儿视定向反应及其附加分的多因素分析

本资料来源于足月正常的新生儿,排除了先天性疾病及后天性疾病对其发育的干扰,着重研究日常生活环境中各种因素对新生儿非生物性视定向反应评分及非生物性视定向反应评分附加分的影响。1　对象与方法1 .1　对象　随机选择一冶职工医院妇产科1 999年1～1 0月出生的新生儿1 0 3例。新生儿断脐前用含肝素的密封的一次性玻璃自动采血器,采取脐血5 m l。新生儿出生后统一使用一次性的纸尿裤(妇产科统一分发) ,收集出生2 4小时内的胎粪。标本收集齐全后,统一在华中科技大学同济医学院职业病流行病学实验室进行测定,用石墨炉原子吸收光谱法测定脐血…     

不同剂量白喉毒素对野生型听力成熟小鼠耳蜗结构及听功能的影响

目的 观察不同剂量白喉毒素对野生型听力成熟小鼠的耳蜗结构及听功能的影响,为建立白喉毒素受体介导的细胞敲除系统动物模型提供参考.方法 4周龄C57BL/6J小鼠30只随机分为50 ng/g组、100 ng/g组和对照组,每组10只;其中50 ng/g组和100 ng/g组小鼠分别单次腹腔注射白喉毒素50 ng/g、100 ng/g,对照组小鼠单次腹腔注射等量生理盐水,注射后7天观察两组动物的一般情况,并记录小鼠ABR反应阈,观察小鼠内外毛细胞、螺旋神经节神经元.结果 在白喉毒素注射后第7天,各组动物情况良好,无明显体重下降,中耳腔无积液.50 ng/g组小鼠2、8、32 kHz ABR反应阈分别为57.5±2.74、20.83±2.04、45.83±2.04 dB SPL,与对照组比较(分别为56.25±2.31、20.0±3.78、49.38±6.78 dB SPL)差异无统计学意义;内、外毛细胞损失率分别为0.8%±0.5%、1%±0.6%;对照组分别为0.3%±0.5%、0.4%±0.3%;螺旋神经节神经元SGN密度为39.45±3.65个/105 μm2、对照组为41.03±3.73个/105 μm2,均未见明显细胞缺失.100 ng/g组小鼠2、8、32 kHz ABR反应阈分别为85±3.54、63±4.47、90±0 dB SPL,较前两组显著升高(t=19.62,P<0.001),内、外毛细胞损失率分别为0.5%±0.1%、10.7%±0.3%,损伤严重,底、中、顶回缺失达10%(t=42.219, P<0.001);SGN密度为25.55±3.66个/105 μm2,平均减少38%,与对照组相比差异有显著统计学意义(t=10.985,P<0.001).结论 100 ng/g白喉毒素注射能引起听力成熟野生型C57BL/6J小鼠外毛细胞及螺旋神经元的损伤.     

斑马鱼听觉诱发电位检测系统的建立和应用

目的 建立斑马鱼听觉诱发电位(auditory evoked potential,AEP)检测系统.方法 设计并制作斑马鱼听觉诱发电位检测水箱;应用该系统检测和记录35条体长为10~46 mm斑马鱼的AEP,将斑马鱼分为5组:体长12~15 mm,6条;体长17~20 mm,4条;体长22~26 mm,4条;体长32~37 mm,9条;体长42~46 mm,12条.对照组为金鱼,体长38~54 mm,8条.通过麻醉实验、鱼鳔实验、噪声暴露实验并以金鱼为对照验证斑马鱼AEP检测系统的可靠性.结果 实验证实斑马鱼AEP检测系统获得的响应为听觉电生理反应;所有体长斑马鱼的听力频率范围为100 Hz~12 kHz,在发育过程中无听觉频率扩展的现象;成鱼最佳听力范围为600 Hz~1 kHz,5组斑马鱼AEP阈值分别为141.7±1.32、124.8±1.31、121.8±1.49、117.8±1.09和124.4±1.87 dB w;斑马鱼AEP阈值随体长增加而变化,具有随着发育成熟AEP阈值降低,随着衰老阈值升高的特征.结论 本研究建立了稳定的斑马鱼听觉诱发电位检测系统,该系统可用于斑马鱼AEP的检测.     

弓形虫昆山分离株P30蛋白的纯化、复性和鉴定

目的表达并纯化弓形虫昆山分离株膜蛋白P30。方法将构建的pET28b-P30重组质粒转入大肠埃希菌BL21,挑重组菌于LB培养基中增菌,IPTG诱导其表达,然后纯化包涵体,用尿素溶解包涵体,Ni2 螯合柱纯化产物,以透析法复性蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果大肠埃希菌表达的P30蛋白以包涵体的形式存在,P30蛋白经Ni2 螯合柱纯化后纯度大于95%。经Western blot鉴定,复性蛋白能被弓形虫感染的鼠血清识别。结论得到了纯度高的膜蛋白P30。     

血清EB病毒PCR检测的性别意义

采用ＰＣＲ 技术检测１６０ 例正常男性和女性的血清ＥＢ 病毒。结果显示，男性组８ 例阳性，阳性率为１０ ％ ；女性组１ 例阳性，阳性率为１－２７ ％ ，两者存在显著差异，提示男性对ＥＢ 病毒的免疫力低于女性。     

肝内梗阻型急性化脓性胆管炎诊治体会

通过对 15例肝内梗阻型急性化脓性胆管炎临床诊治特点的分析 ,阐述其病理与发病机理。方法　 1988～ 1999年收治肝内梗阻型急性化脓性胆管炎 15例 ,3例以感染性休克入院 ,12例入院时误诊。 15例均行胆总管、肝总管切开取石外引流。结果　因感染性休克死亡 2例 ;术后并发肝衰、肝、肾综合症死亡 2例 ,11例治愈。术后残余结石 6例 ,4例再手术取石。结论　对肝内梗阻型急性化脓性胆管炎的诊断 ,不能追求所谓典型症状。在及时手术引流胆总管的同时 ,应十分强调对肝脏的探查 ,慎防遗漏肝内病灶。