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目的构建含载脂蛋白M(ApoM)基因启动子区的荧光素酶报告基因的真核表达载体,探讨ApoM基因启动子区域-778C→T置换对ApoM表达的影响。方法采用PCR法扩增人染色体中含ApoM基因-1316 bp至+73 bp的DNA片段,筛选出含ApoM-778TT基因型(-778 bp无变异)及ApoM-778CT/CC基因型(-778bp变异)的DNA片段,构建含以上两个基因片段的PGL3重组载体。并采用阳离子脂质体转染法将携带萤火虫荧光素酶报告基因的重组质粒转染HepG2细胞,经48 h培养,检测荧光素酶的活性,以反映ApoM的表达水平。结果荧光素酶报告基因活性显示,ApoM-778C基因型携带者引起荧光素酶相对活性明显低于ApoM-778T基因型者。结论 ApoM基因启动子-778C→T对ApoM转录活性起抑制作用,它可能是影响ApoM基因表达的重要因素。 相似文献
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血清前白蛋白在肝病检测中的临床意义 总被引:5,自引:0,他引:5
用免疫散射比浊法测定了102 例各类肝病患者血清前白蛋白( PAB) ,并同时进行血清蛋白电泳分析。结果发现PAB 在各型肝炎、肝硬化和肝癌病人血液中的水平下降,白蛋白( ALB) 水平( 除急黄肝外) 均下降,γ- 球蛋白水平( 除急黄肝外) 均升高,升高顺序与ALB 下降顺序一致。这表明血清PAB 检测对重症肝炎早期诊断及治疗效果的监测有重要意义,是判断肝硬化代偿期与失代偿期的良好指标 相似文献
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应用ROC曲线评价超敏肌钙蛋白T对急性心肌梗死的诊断价值及诊断界值的确定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 通过绘制超敏肌钙蛋白T(cTnT)和肌钙蛋白T(cTnT)对于急性心肌梗死(AMI)与稳定型心绞痛(SAP)鉴别诊断的ROC曲线,对比分析两种方法的优越性,确定本实验室的诊断界值.方法 电化学免疫发光法测定AMI组、SAP组与健康对照组的血清超敏cTnT和cTnT,并对超敏cTnT和cTnT进行统计学比较(t检验)和ROC分析.结果 超敏cTnT在AMI诊断中的敏感度为82.6%,特异度为92.3%,阳性结果预测值为97.9%,诊断临界值为0.035 ng/mL;cTnT的敏感度为78.3%,特异度为84.6%,阳性结果预测值为94.4%,诊断临界值为0.079 ng/mL.超敏cTnT的ROC曲线下面积(AUC)为0.916,cTnT的AUC=0.856.结论 血清超敏cTnT是诊断急性心肌梗死灵敏而特异的诊断指标,其诊断性能优于cTnT. 相似文献
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为了解贵阳市区2~6岁儿童HBV感染状况,评估乙肝免疫效果,本文测定3 231名儿童HBV-M。1对象与方法1.1对象随机抽取该市市区5所幼儿园1994~1997年全部拟入园体检儿童为检测对象,大部分儿童乙肝疫苗接种史清楚。1.2方法空腹采静脉血2 ml,常规分离血清后用ELISA法测定HBV-M,药盒为丽珠试剂公司生产。2结果 检测各项指标见附表。 结果显示,抗—HBs阳性率由1994年的59.01%上升至1997年的74.89%,将1994、1995年抗-HBs阳性率分别与1997年做卡方检验,… 相似文献
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由多家实验室用参考方法对覆盖该测定方法测量范围的多份新鲜混合血清进行检测获得参考值结果,用于校准不同检测系统是酶学测定标准化工作的重要部分,可提高临床酶学活性测定的准确性和实验室间的可比性。本研究对贵阳地区10家二级以上医院的生化实验室,采用由北京大学第一医院和北京中生公司依据IFCC推荐方法联合定值γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)冰冻人血清校准γ-GT不同检测系统,分析校准前后不同检测系统-GT测定结果室间变异及其与参考方法测定间的偏差。以证明采用冰冻人血清统一校准γ-GT的可行性。材料:γ-GT校准品:-70℃冰冻保存人血清,用定值γ-GT活性浓度为74.16U/L,0.5ml/eppendorf管分装。血清样本:5支不同浓度冰冻混合人血清样本,参考方法定值γ-GT活性浓度,依次为43.01、74.16、125.47183.36、258.84U/L,0.5ml/eppendorf管分装,-70℃冰冻密封保存。贵阳市10家二甲以上医院生化实验室的10套检测系统。方法:参考方法定值:用参考方法测定制备分装的6瓶酶校准品,由北京两家酶学参考实验室共同定值,每瓶重复测定2次,取其平均值作为酶校准品定值,5个不同浓度混... 相似文献
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用正交试验选择磷钨酸—镁沉淀法分离高密度脂蛋白 总被引:2,自引:0,他引:2
用正交试验选择磷钨酸-镁(PTA-Mg)沉淀法分高血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDI-C)的最佳实验条件。着重讨论沉淀剂pH值、各组分浓度、孵育及离心条件对分高效果的影响。经Trinder’s酶法测定及联合免疫火箭电泳评价沉淀效果.表明在pH6.0Mp2+0.5mol/L.磷钨酸1.4g/dl、室温孵育15min,4000rpm×10min离心的条件下,可使HDL部分被分离得更加完全.与原实验室方法比较Y=1.1003x—0.5665.γ=0.99716.精密度符合要求。 相似文献
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目的:证实苯乙基异硫氰酸酯(phenethyl isothiocyanate ,PEITC)诱导人急性髓系白血病(AML) M2白血病细胞系Kasumi‐1细胞凋亡的效应,初步探讨PEITC诱导Kasumi‐1细胞凋亡的机制。方法培养人M2白血病细胞株Kasumi‐1细胞,CCK‐8法检测不同浓度 PEITC处理后Ka‐sumi‐1细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species , ROS)生成的情况;Real‐time PCR及Western blot检测 HO‐1以及凋亡相关基因caspase3、caspase8、caspase9 mRNA及蛋白水平的变化。结果 CCK‐8结果显示PEITC作用Kasumi‐1细胞24 h、48 h、72 h后,细胞增殖抑制率呈现浓度-时间依赖性。流式细胞术显示 PEITC能够诱导Kasumi‐1细胞的凋亡。Real‐time PCR及Western blot结果显示PEITC处理细胞后,HO‐1表达下降,而凋亡相关基因Caspase3、Caspase8、Caspase9的表达上调。DCFH‐DA探针法显示 PEITC作用Kasumi‐1细胞后,ROS生成增多。结论 PEITC能够促进Kasumi‐1细胞凋亡,呈时间剂量梯度依赖关系;PEITC诱导Kasumi‐1细胞凋亡可能通过的机制包括下调 HO‐1表达促进 ROS 生成及凋亡相关基因Caspase3、Caspase8、Caspase9的激活。 相似文献
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