负载异体抗原对低剂量粒细胞巨噬细胞集落刺激因子诱导的树突状细胞免疫学性状的影响

目的观察低剂量粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱生的未成熟树突状细胞(GM~(low)DC)对异体抗原的摄取能力,以及负载异体抗原后细胞表型和功能的改变。方法对处于增殖期的C_(57)BL/6小鼠单个核细胞(MNC)作氚标记亮氨酸(~3H-Leu)掺入处理,制备~3H-Leu标记的抗原上清液。将此抗原上清液分别与昆明小鼠GM~(low)DC和成熟树突状细胞(DC)孵育30、60、90 min,检测细胞每分钟放射性荧光闪烁计数(cpm)值；用流式细胞仪检测负载异体抗原前后GM~(low)DC表面I~A/I~E、CD80分子的表达情况。分离C_(57)BL/6小鼠的T淋巴细胞,根据加入的刺激因素分组并进行同种混合淋巴细胞反应(MLR)：对照组(不加刺激因素)、GM~(low)DC组、GM~(low)DC+异体抗原组、GM~(low)DC+异体抗原+细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4Ig(CTLA-4Ig)组。检测各组细胞cpm值,计算刺激指数(SI)。结果加入异体抗原上清液后30、60、90 min,GM~(low)DC的cpm值均明显高于同时相点的成熟DC(P＜0．05或0．01)。负载异体抗原前,GM~(low)DC细胞表面I~A/I~E的表达率为(32±8)%,CD80的表达率为(25±10)%；负载后两者分别为(54±10)%、(71±18)%,均明显升高(P＜0．05或0．01)。MLR：GM~(low)DC+异体抗原组细胞cpm值明显高于对照组(P＜0．05),SI＞2．0；GM~(low)DC组以及GM~(low)DC+异体抗原+CTLA-4Ig组细胞cpm值与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0．05),AI均＜2．0。结论GM~(low)DC具有较强的抗原摄取能力,负载抗原后,细胞在表型及功能上渐趋成熟。应用CTLA-4Ig可阻断其免疫应答效应,建立免疫耐受。     

髌骨骨折的围手术期及术后康复锻炼的护理

目的探讨髌骨骨折的围手术期及术后功能锻炼的护理。方法27例髌骨骨折中,行切开复位内固定17例,髌骨部分切除5例,单纯石膏固定5例。结果随访27例,时间6个月～1年,其中3个月内膝关节功能完全恢复14例,部分恢复5例,6个月-1年完全恢复6例,1年后未完全恢复2例。结论对髌骨骨折患者进行正确、有效的围手术期及术后康复护理,能有效促进膝关节的功能康复。     

游离皮瓣移植术后血管危象的治疗体会

目的 探讨游离皮瓣移植术后血管危象的监测、处理.方法 回顾性分析51例游离皮瓣移植术中发生的8例血管危象,以及采取的术后监测方法、危象皮瓣的抢救措施.结果 8例发生血管危象的皮瓣中6例经抢救成活,2例失败.结论 严密监测,及时发现皮瓣血管危象,根据引起血循环障碍的原因,采取针对性措施,可以有效防止皮瓣坏死.     

携带供者抗原的第三方树突状细胞诱导小鼠皮肤移植耐受的研究

目的 了解携带供者抗原的第三方树突状细胞(DC)是否具有与供者源未成熟DC相似的免疫功能.方法 雌性C57BL/6小鼠、BALB/c小鼠和昆明小鼠分别为皮肤移植的供者、受者和第三方.将40只BALB/c小鼠分为对照组、环磷酰胺组、供者源未成熟DC组、第三方未成熟DC组、携带供者抗原第三方DC组,每组8只.后4组大鼠皮肤移植术前4 d用环磷酰胺(200 mg/kg)预处理,对照组同法给予等量等渗盐水.后3组术前2 d用1 ml相应DC悬液(1×107个/ml)预处理,并在术后12 d重复给予1 ml DC悬液(1×107个/ml)1次;前2组于上述2个时相点同法给予等量等渗盐水.记录各组皮片平均成活时间(MST)并于术后5 d对皮片进行组织学观察.结果 与对照组(16.1±3.5)d比较,供者源未成熟DC组和携带供者抗原第三方DC组小鼠移植皮片的MST明显延长,分别为(38.3±7.7)、(34.9±7.7)d(P＜0.01);携带供者抗原第三方DC组与供者源未成熟DC组皮片的MST相近(P＞0.05),但与第三方未成熟DC组(23.7±2.7)d比较,差异有统计学意义(P＜0.05).镜下见携带供者抗原第三方DC组移植皮片结构较清楚、排列有序,与供者源未成熟DC组情况相近.结论 携带供者抗原的第三方DC与供者源未成熟DC,均可在一定程度上建立抗原特异性免疫耐受.     

三戳孔法腹腔镜胆囊切除术体会

腹腔镜胆囊切除术（LC）因其创伤小、痛苦轻、美观且康复快等优点，已被人们承认和接受。国内开展已进入普及阶段，然而其操作技术均系采用经典的四戳孔法。我们在经典的四孔法行LC取得一定经验的基础上，于2005年8月至2008年8月采用改良三戳孔法连续对680例患者行LC手术，旨在探讨该技术临床应用可行性、安全性和其应用价值，现将资料报告如下。     

第三方未成熟树突状细胞负载异体抗原诱导免疫耐受的实验研究

目的观察第三方未成熟树突状细胞（imDC）负载同种异体抗原后对其免疫特性的影响。方法从健康足月新生儿脐血中分离单核细胞，采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-SCg）和重组人白细胞介素（rhIL）4联合培养7d，诱导其分化成imDC，并通过光学显微镜和扫描电镜观察细胞形态、检测细胞表型及混合淋巴细胞反应（MLR）；将培养的细胞与异体淋巴细胞抗原共同孵育，并给予共刺激分子阻断剂细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白（CTLA-4Ig）处理，检测抗原负载前后的细胞表型变化，通过MLR比较致敏前后T淋巴细胞增殖的能力。结果（1）培养后细胞具有典型的imDC特征，CD1α、CD83、CD80、CD86等成熟标志呈低表达，分别为21．42％、0．59％、5．39％、3．85％；人类白细胞DR抗原（HLA-DR）的表达率为60．66％，MLR结果提示其不能刺激同种异体T淋巴细胞增殖。（2）负载抗原后的DC表现出成熟特性，CD1α、CD83、CD80、CD86及HLA-DR表达明显增高，分别为65．51％、42．20％、56．45％、38．52％、76．44％（P〈0．05）；能够刺激T淋巴细胞增殖[刺激指数（SI）〉2．00]。（3）给予共刺激阻断剂CTLA-4Ig致耐处理后，SI由2．51下降到0．39。可明显抑制T淋巴细胞增殖。结论第三方imDC负载抗原后能表现出成熟特性；经CTLA-4Ig致耐处理，不能刺激未致敏T淋巴细胞增殖。有望诱导受体针对供者抗原的特异性免疫耐受。     

巨大腹腔脓肿1例

患者 ,男 ,37岁。下腹部持续性纯痛 ,逐渐膨隆1+ 年 ,无明显诱因 ,伴阵发性加剧 ,大便次数增多 ,较稀。外院考虑胃肠炎 ,抗生素治疗 ,效果不佳。查体 :全身皮肤、粘膜苍白 ,腹部膨隆 ,未见肠型及蠕动波 ,触诊腹肌软 ,中下腹部扪及一个 10 0ｃｍ× 10 0ｃｍ大小包块 ,质较硬 ,张力高 ,推之不动 ,叩呈浊音 ,移动性浊音阳性。血常规 :ＷＢＣ 5 8.0× 10 9/Ｌ ,ＲＢＣ 0 78×10 12 /Ｌ ,Ｈｂ 2 4 ｇ/Ｌ。超声检查 :腹腔内探及大小约2 3 0ｃｍ× 9.0ｃｍ× 18.0ｃｍ的囊性包块 ,边界清 ,呈长椭圆形 ,有完整包膜 ,内部回声不均匀 ,后壁回声增强…     

树突状细胞与免疫耐受

Steinman和Cohn于1973年从小鼠外周淋巴组织中分离出一种新的细胞，同其他单核白细胞一样，这类细胞拥有丰富的线粒体、各种内涵体，核膜外有异染色质。但其细胞表面具有树突样或伪足样突起，因此而得名为树突状细胞（dendritic cell，DC）。     

腺病毒载体转染人未成熟树突状细胞对其成熟特性的影响

目的观察重组腺病毒载体AdEASY-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转染人未成熟树突状细胞(imDC)后,其表型特征及免疫学功能的变化,并探讨白细胞介素(IL)10对腺病毒转染诱导imDC成熟的抑制作用。方法贴壁法分离人脐带血来源的单核细胞,利用重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4诱导分化imDC。对照组为常规培养的imDC,转染组用AdEASY-EGFP转染imDC,IL-10组用IL-10处理转染后细胞。流式细胞仪检测细胞表面成熟标志[CD86、CD83和人类白细胞DR抗原(HLA-DR)],混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激同种异体未致敏T淋巴细胞的增殖能力。结果腺病毒转染imDC后,转染组细胞成熟表型表达率分别为CD86:46±10、CD83: 38±7、HLA-DR:82±10,均较对照组(10±7、8±3、68±8)显著上调,且刺激T淋巴细胞增殖的能力显著加强(SI>2．0)。IL-10组处理的imDC上述表型表达率分别为CD86:8±5、CD83:9±3、HLA-DR: 63±12,与对照组比较差异无统计学意义(P>0．05),其刺激T淋巴细胞增殖的能力也明显下降。结论腺病毒能有效转染imDC,但在转染后有促进其成熟的趋势;用IL-10能有效抑制该成熟状态。     

微粒皮移植手术方法的改进及临床应用

一、资料与方法1.一般资料 :笔者单位 1998～ 2 0 0 1年收治的烧伤总面积大于 5 0 %、Ⅲ度面积 2 0 %TBSA以上行早期切痂微粒皮移植术患者 35例。采用改进微粒皮移植法 (A组 )与传统微粒皮移植法[1 ] (B组 )相对照。A组 18例 ,其中男 16例、女 2例。年龄 (38.6 3± 0 .5 1)岁 ,烧伤总面积 (81.16± 10 .90 ) % [Ⅲ度 (30 .0 8± 7.90 ) % ]TBSA,手术面积 (35 .80± 18.2 0 ) % ;B组17例 ,其中男 16例、女 1例 ,年龄 (37.2 7± 0 .4 9)岁 ,烧伤总面积为 (80 .0 5± 11.5 0 ) % [Ⅲ度 (2 9.16± 8.2 0 ) % ]TBSA,手术面积 (36 .2 0± 1…