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目的:研究骨髓基质成纤维细胞与成骨的关系。方法:Luria多器官培养器体外器官培养法,肾被膜下移植技术以及石蜡切片技术,结果:移植物在移植处形成软骨细胞团及骨基质,结论:骨髓基质成纤维细胞集落形成细胞(CFU-F)为基质多能干细胞,能增生分化为成骨所必需的基质细胞。 相似文献
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目的通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法以Klenow和MungBeanNuclease通过增加2个及减少2个碱基调整SD序列和ATG之间距离,SDS-PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果获得了重组质粒pLX2,pLX3,诱导后与表达质粒pLX1(7.78%)相比,表达量分别为8.03%,9.9%,经纯化后获得的bFGF纯度达98%,ED50为2.29ng/ml。结论调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量,从而提高了目的基因在大肠杆菌中的表达水平。 相似文献
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目的 :研究骨髓基质成纤维细胞与成骨的关系。方法 :Luria多器官培养器体外器官培养法、肾被膜下移植技术以及石蜡切片技术。结果 :移植物在移植处形成软骨细胞团及骨基质。结论 :骨髓基质成纤维细胞集落形成细胞 ( CFU-F)为基质多能干细胞 ,能增生分化为成骨所必需的基质细胞 相似文献
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HIV-1中国流行株gag与hIL-2在重组痘苗病毒中的共表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达,以期获得重组痘苗病毒,观察细胞因子的佐剂作用,与核酸疫苗混合免疫,评价免疫效果,为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法:将HIV-1中国流行株 gag基因、gag和hIL-2基因片段插入到 pJ38载体启动子下游,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒,SDS-PAGE、Western blot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫Balb/c小鼠,进行淋巴细胞转化实验、CTL、CD4 、CD8 T细胞数目以及血清抗体的细胞免疫和体液免疫指标检测。结果:获得了重组痘苗病毒 vJ38gag和 vJ38gag-IL-2。与 vJ38-gag相比,vJ38gag-IL-2,具有更好的免疫原性,重组痘苗病毒免疫3次的效果好于重组病毒免疫2次,以2rVV-DNA混合免疫效果最好。结论:重组痘苗病毒vJ38gag和vJ38gag-IL-2能够表达外源蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。细胞因子IL-2发挥了免疫佐剂的作用。 相似文献
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目的:通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)cDNA在大肠杆菌DH5a中的表达,为bFGF进一步研究提供材料来源,方法:用多聚酶链反应(PCR)及DNA重组技术将PCR产物克隆到pGEM-5Z载体并测序,然后克隆到表达载体pXH上。结果:转化重组质粒pLX1的大肠杆菌经42℃温控诱导4 ̄5h,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约35000,薄层扫描分析表明该蛋白占菌体 相似文献
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目的:通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)cDNA在大肠杆菌DH5α中的表达,为bFGF进一步研究提供材料来源。方法:用多聚酶链反应(PCR)及DNA重组技术将PCR产物克隆到pGEM-5Z载体并测序,然后克隆到表达载体pXH上。结果:转化重组质粒pLX1的大肠杆菌经42℃温控诱导45h,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约35000,薄层扫描分析表明该蛋白占菌体总蛋白量的99%。经FactorXa酶切后得到分子量约为17000的bFGF,其生物学活性ED50为229ng/ml。结论:经PCR方法扩增的bFGF可在大肠杆菌中高效表达,为其进一步结构与功能研究打下基础 相似文献
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目的 将HIV 1中国流行株B亚型gag和hIL 2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达 ,与核酸疫苗联合免疫 ,评价免疫效果 ,为新型艾滋病疫苗开发研制奠定基础。方法 将HIV 1中国流行株gag hIL 2基因片段插入到痘苗病毒载体pJ38启动子下游 ,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒 ,SDS PAGE、Westernblot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫BALB c小鼠 ,进行淋巴细胞转化实验及血清抗体的细胞免疫和体液免疫指标检测。结果 获得了重组痘苗病毒vJ38gag IL 2 ,具有更好的免疫原性 ,3rVV效果好于 2rVV ,以 2rVV DNA混合免疫效果最好。结论 重组痘苗病毒vJ38gag IL 2能够表达外源蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫 相似文献
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目的:通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法:以Klenow和MungBean Nuclease通过增加2个及减少2个碱基调整SD序列和ATG之间距离,SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白表达量,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果:获得了重组质粒pLX2,pLX3,诱导后与表达质粒pLX1(7.78%)相比,表达量分别为8.03%,9.9%,经纯化后获得的bFGF纯度达98%,ED50为2.29ng/ml。结论:调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量,从而提高了目的的基因在大肠杆菌中的表达水平。 相似文献
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红景天制剂对老年小鼠脾淋巴细胞化反应及脂质过氧化作用的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
脂质过氧化是引起膜流动性降低、机体老化和疾病发生的重要原因之一 ,而机体本身存在抗氧化剂和抗氧化酶系等保护系统 ,用以防止或终止过氧化作用〔1〕。据报道红景天具有明显抗疲劳、抗缺氧、抗衰老的作用 ,可增强机体免疫力〔2〕。本实验通过饲喂老龄小鼠红景天制剂 ,测定心、肝组织中过氧化物含量及谷胱甘肽过氧化物酶的活性 ,了解红景天制剂对老年小鼠的抗氧化作用 ,并通过测定老龄小鼠脾细胞对刀豆蛋白(ConA)和脂多糖 (LPS)的反应性 ,探讨红景天制剂对老年小鼠脾细胞免疫功能的影响。材料与方法 (1)材料 :将吉林省长白山高山… 相似文献
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