牛皮癣并发骨髓重度受抑患者与急性再生障碍性贫血患者血液形态学的比较

1 资料与方法 1999-2002年本院血液内科收治的以全血细胞减少为主要症状的12例患者,其共同特点是均患有牛皮癣,而且此次住院前都有在个体诊所服中药史,诊断为药物所致造成的骨髓抑制,后经合理治疗痊愈,其中男7例,女5例.另外收集20例急性再障患者.分别在入院治疗2周左右时采集骨髓进行涂片、骨髓活检;末梢血采集进行常规涂片,瑞姬氏染色.选择取材、涂片、染色良好的骨髓片、血片,在1000×下进行血细胞分类计数;另外采末梢血进行血常规检测.     

治疗牛皮癣的药物致骨髓重度受抑与急性再生障碍性贫血的鉴别

目的：进一步探讨临床应用牛皮癣药物导致的骨髓重度受抑与急性再生障碍性贫血（以下简称急性再障）之间的实验室鉴别诊断的主要依据。方法：药物导致的骨髓重度受抑和急性再障患者行骨髓涂片、骨髓活检和末梢血涂片瑞姬氏染色后进行骨髓象和血象的检测；另外采静脉血应用血细胞自动化分析仪进行血常规检测。结果：治疗牛皮癣药物导致的骨髓重度受抑与急性再障患者外周血象极为相似，但骨髓重度受抑患者的骨髓涂片、活检不同于急性再障患者的显示，各系、各阶段有核细胞比例大致正常，巨核细胞、血小板数量虽少但还可见；此类药物导致的骨髓重度受抑患者骨髓涂片的骨髓小粒并不少，且虽有部分空虚，但其中网络的是三系造血细胞。结论：通过了解病史和使用牛皮癣药物的治疗史，骨髓象和血象的实验室分析，可以进一步找出此类药物导致的骨髓重度受抑与急性再障之间的实验室鉴别依据。     

人卵巢颗粒细胞分离培养的优化及生物学特性

目的:建立原代人卵巢颗粒细胞(hGCs)的分离培养方法,观察其生物学特性。方法:取卵日,收集hGCs,分为对照组(DMEM培养基)和实验组(DMEM培养基∶卵泡液=1∶1)进行培养。比较2组hGCs的生长状态和雌激素分泌情况。利用RT-qPCR检测Nanog、Oct4、Sox2的表达,应用流式细胞术检测CD44、CD73、CD45的表达。结果:hGCs培养24 h贴壁良好,细胞间伸出伪足。对照组和实验组分别在培养14 d和21 d后出现凋亡。实验组雌激素的分泌显著增加,第9天出现高峰,第21天显著下降。培养第7天实验组Oct4和Nanog mRNA表达显著增加。培养7 d后,CD44、CD73表达阳性, CD45表达阴性。结论:该方法简单、有效,可获得大量hGCs。培养基中添加卵泡液有益于hGCs的生长,增加培养天数。同时hGCs可分泌雌激素并具有一定的干细胞特性。     

硫唑嘌呤在胰腺癌动物模型制作中的应用

目的筛选建立胰腺癌动物模型最适合成瘤的硫唑嘌呤(AZA)浓度。方法将40只SD大鼠按照AZA浓度的不同分为5组:空白对照组(A组)、2.6mg/kg AZA组(B组)、2.2mg/kg AZA组(C组)、1.8mg/kg AZA组(D组)、1.4mg/kgAZA组(E组),每组8只。A组每天灌服2mL生理盐水,B、C、D、E组每天灌服相应浓度的AZA生理盐水液2mL。第30天后进行SD大鼠皮下移植Mia PACAⅡ胰腺癌细胞悬液,通过检测大鼠血浆CA24-2和制作胰腺组织病理切片的方法来判断其是否成瘤。结果接种胰腺癌细胞后的第15、20、25、30天,各造模组大鼠血中的CA24-2水平均有不同程度的升高,其中B组在移植后的第15、20、25、30天,体内CA24-2水平分别为(51.56±2.14)、(51.61±1.21)、(54.66±1.02)、(56.00±0.38)U/mL,与C、D、E组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且成瘤率最高,为83.3%。此外,胰腺病理切片镜下显示细胞核畸形、细胞大小不等,可见双核细胞及1～2个核仁,细胞核大且深染等病理特征,同时发现在移植部位的淋巴结和胰腺周围的淋巴结肿大。结论当AZA浓度为2.6mg/kg时,最有利于制作大鼠胰腺癌模型。     

白藜芦醇干预缺血后处理对受损H9C2心肌细胞修复的研究

目的近年来研究发现白藜芦醇（Resveratrol,RSV）具有抗氧化、清除自由基、减轻缺血再灌注损伤等作用。将其与减轻缺血再灌注损伤的主要手段——缺血后处理（Ischemic Postconditioning,IPO）相结合,共同作用于体外培养的H9C2心肌细胞受损模型。方法采用免疫细胞化学、western blot以及RT-PCR等方法,观察这种共同作用对体外培养的H9C2心肌细胞受损模型细胞增殖的影响。结果 p38表达量随着RSV＋IPO的干预和时间的延长而增加;通过直观和检测cyclinA2发现H9C2细胞数量因加入干预手段有所增加,cyclinA2的表达量也有相同趋势。结论研究结果表明,该方法不仅可以抑制细胞凋亡,更具有促进细胞增殖的作用。     

原花青素联合缺血后处理对H9C2心肌细胞的保护作用

目的观察原花青素(procyanidine,PC)与缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)联合干预H9C2心肌细胞,对其凋亡率及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(P-p38MAPK)的作用。方法将培养的H9C2心肌细胞分为正常对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理组(IPO组)、原花青素+缺血后处理组(PC+IPO组)。利用AO-EB染色法检测H9C2心肌细胞的凋亡率;利用Western blotting方法检测H9C2心肌细胞P-p38MAPK蛋白表达情况。结果对细胞凋亡率的影响:IPO单独和联合PC干预H9C2心肌细胞0、12h、24h后,各时间点IPO组和PC+IPO组细胞凋亡率均低于I/R组(P<0.01)。12h时,PC+IPO组细胞凋亡率低于IPO组(P<0.05)。对P-p38MAPK表达的影响:12h时,I/R组表达高于C组(P<0.01);PC+IPO组和IPO组表达低于I/R组(P<0.01),同时PC+IPO组低于IPO组(P<0.05)。结论 IPO单独和联合PC干预均可通过减少心肌细胞凋亡起到心肌保护作用,并且PC联合IPO更有效。该保护作用机制可能与抑制p38MAPK有关。     

NIMA相关蛋白激酶7、Nod样受体蛋白3与多囊卵巢综合征炎症指标相关性研究

目的探讨卵巢颗粒细胞中NIMA相关蛋白激酶7(NEK7)和Nod样受体蛋白3(NLRP3) mRNA表达量与多囊卵巢综合征(PCOS)患者炎症指标的相关性及其预测价值。方法选取2018年8月至2019年3月来山西省儿童医院/山西省妇幼保健院生殖中心就诊的30例PCOS患者为研究组和同期由于男方因素或输卵管因素就诊的34例非PCOS不孕症患者为对照组。取卵日收集行IVF/ICSI-ET患者的卵泡液和颗粒细胞,检测卵泡液中炎症因子白介素(IL)-1β、IL-18的表达以及颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达,并将NEK7、NLRP3的mRNA表达量与各指标进行相关性分析。最后应用受试者工作特征曲线(ROC)分析NEK7、NLRP3 mRNA对PCOS的预测价值。结果研究组体重指数(BMI)和获卵数显著高于对照组,且LH、LH/FSH、睾酮(T)水平亦显著高于对照组(P均<0.05)。研究组卵泡液中炎症因子IL-1β、IL-18的表达显著高于对照组,卵巢颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达亦显著高于对照组(P均<0.05)。相关性分析结果显示,研究组患者卵巢颗粒细胞中NEK7和NLRP3 mRNA水平与血清基础LH、LH/FSH、炎症因子IL-1β、IL-18均呈显著正相关(P均<0.05)。ROC分析结果显示,NEK7是PCOS的有效预测因子,预测炎症的曲线下面积为0.741,临界值为1.154。结论 NEK7、NLRP3可能通过促进IL-1β、IL-18的释放影响PCOS炎症的发生及发展,且NEK7是PCOS的有效预测因子,可能为PCOS的临床治疗提供新思路。     

人羊水间充质干细胞分离培养方法的优化

背景：目前关于人羊水间充质干细胞的体外分离培养方法不一,获得较多数量的间充质干细胞仍有困难。目的：分离80份羊水标本,比较不同的体外培养方法,优化筛选到一种合适的培养纯化条件,为人羊水间充质干细胞的基础研究和临床广泛应用奠定基础。方法：无菌条件下采集足月分娩和终止妊娠引产的羊水,分离羊水细胞,比较孕期、不同培养基、接种密度、首次换液时间对人羊水间充质干细胞原代培养过程的影响,通过细胞化学染色方法检测细胞代谢情况,观察人羊水间充质干细胞的生物学特性。结果与结论：相同培养条件下,采用AmnioMAXⅡcomplete羊水专用细胞培养基,以5×104/cm2的密度接种,首次换液时间为6d时,人羊水间充质干细胞原代培养成功率较高。孕期为14～20周的人羊水间充质干细胞培养成功率高于晚期妊娠（21～36周）及足月分娩（37～42周）的羊水。人羊水间充质干细胞强表达过碘酸-雪夫、酸性磷酸酶、酸性α-醋酸萘酚酯酶染色,弱表达中性粒细胞碱性磷酸酶,不表达过氧化酶、苏丹黑染色。提示,优化筛选到一种合适的人羊水间充质干细胞培养纯化条件。     

经血源性和羊水源性间充质干细胞基本生物学特性的比较

目的 比较经血源性与羊水源性的间充质干细胞(MSCs)在相同培养条件下的基本生物学特性,旨在为临床提供一种新的干细胞来源.方法 用Ficoll密度梯度离心法分离经血源性MSCs,采用离心贴壁培养的方法 分离羊水中的MSCs.对两种来源细胞的形态及培养特性进行观察,并利用细胞化学染色的方法 对两者的生物化学特性进行鉴定.结果 从经血及羊水中均可成功分离培养出具有典型样特征的MSCs:纤维样或梭形、紧密漩涡状的细胞,并证实可稳定传代.在同等培养条件下,相同代数经血源性MSCs克隆形态相似性更高.经血源性MSCs原代培养24 h左右可见贴壁细胞,而羊水源性MSCs为48 h左右;经血源性MSCs与羊水源性MSCs原代达80%~90%融合度时间均为10 d左右;经血源性MSCs细胞倍增时间约为7 d,羊水源性MSCs约为10 d.细胞化学染色:ACP染色均为强阳性、AS-DCE、ANAE、NAP、PAS、POX、SBB均为阴性,细胞内化学成分及定位大致相同.结论 与羊水源性MSCs相比,经血源性MSCs取材方便,易分离纯化,无伦理学争议,成为MSCs又一可靠的来源     

尿毒症血液透析患者血浆抗氧化能力的测定

目的 探讨尿毒症血液透析患者透析前后的血浆抗氧化能力变化的临床意义.方法 将113例尿毒症血液透析患者进行透析前后血液氧化与抗氧化能力测定,并与正常对照组进行比较.结果 尿毒症患者血液超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮(NO)与对照组比较均有不同程度下降,而丙二醛(MDA)明显增高,并有显著性差异(P＜0.001).血液透析后SOD、GSH-PX、NO与透析前比较下降,MDA增高,显著性差异(P＜0.001).结论 尿毒症患者血液中抗氧化能力下降,而活性氧增强;血液透析时氧化应激状态增强,对减少血液透析治疗的副作用、延长尿毒症患者的生存期有重要意义.